培養基是生物制品領域中常用的物質,在細菌和細胞培養中十分必要,但是現有技術中有些培養基的某種組份容易分解,造成保存時間短等問題,導致培養基的使用成本十分高。其中,在動物培養基中,谷氨酰胺是一種必要的組份,但是在常溫下,很短的時間內,約7-10日中培養基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,這給其商品化帶來很大的困難。這樣的培養基在現有技術中很多,都具有上述的缺陷,例如,中國CN1087778C公開了一種雜交瘤細胞的無血清培養基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是這種培養基的保存時間十分有限,很難達到商業使用的目的。培養基制備器勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁。湖北培養基制備器哪家好
天然培養基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期,體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養基所替代。較廣使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。血清種類:目用于組織培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因:來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細胞培養中用量很大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,具有極為重要的功能。海南培養基制備器培養基配成后一般需測試并調節pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。
培養基的質量測試:每批培養基制備好以后,應仔細檢查一遍,如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。并測定其好終pH。將全部培養基放入36±1°C恒溫箱培養過夜,如發現有菌生長,即棄去。用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基,培養24~48小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養基即應棄去,不能使用。培養基的保存:培養基應存放于冷暗處,好好能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制備記錄副頁或明顯標簽。臺州培養基制備器報價培養基制備器外控高低電平控制啟停,正反,簡易分裝,光耦隔離;外控模擬量調節轉速。
培養基的滅菌:培養基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌,各種培養基的滅菌時間和壓力,按其成分不同而定。普通培養基采用121℃、滅菌15min,但容器和裝量較大時,應延長至20min。含糖培養基115℃、滅菌30min。含糖、血清、雞蛋等培養基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,連續3d,間歇滅菌。血清或組織液,采用低熱56—58水浴1h,連續5—6d滅菌,一些遇高溫即被破壞的物質如尿素、腹水等,可用細菌過濾器,過濾除菌。高壓滅菌應嚴格按照操作規程執行,必須逐漸加熱,徹底排除滅菌器內的空氣,再逐漸升壓保持預定的壓力和時間,達到全部殺滅微生物。以上的滅菌時間和溫度要經過驗證確認,如不同類型培養基混合一起滅菌時宜采用115℃、滅菌30min為好。培養基制備器一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形。
簡單制作培養基,需調整培養基成分,介質中使用的化學物質應該是化學純品,銅鍋或鐵鍋易導致銅、鐵混入培養基,使細菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋子,可用溫水加熱,隨時攪拌,防止結焦。若發現結焦,則不能使用介質,需重新調配。在溶解大多數固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡單制作培養基,需調整培養基的pH值,由于加熱消毒過程中培養基的pH值會發生變化,因此應在培養基組分完全溶解后,調整pH值。舉例來說,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經驗,掌握培養基的很終pH值,保證培養基的質量。在調整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養基沉淀。培養基制備器滅菌之后保持的溫度是可以預設的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險鎖。湖北培養基制備器哪家好
制備培養基的操作要點:成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,。湖北培養基制備器哪家好
實驗室在制作培養基時候的經驗總結:1、培養基pH值的調正:pH因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的較終pH,保證培養基的質量。pH調整后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。2、培養基過濾澄清:液體培養基必須澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。湖北培養基制備器哪家好