制作牛肉膏蛋白胨固體培養基:(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過菌的培養皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養基的錐形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養基(約10~20mL)倒入培養皿,左手立即蓋上培養皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過來放置,使培養皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了。液體培養基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。廣東不銹鋼內桶培養基制備儀
培養基的購置:從培養基自身的質量來看,不同生產廠家的產品,甚至同一廠家不同批號的產品都會存在差異。對培養基的供應企業進行評價后選擇合格的供應商,這是培養基購買過程中重要的步驟。應選擇產品市場信譽度高、有質量保證能力和服務保證能力的企業;企業是否通過了質量管理體系的認證是較為客觀的評價指標。要求生產企業提供:培養基成分名稱及產品編號、批號、使用前的pH、儲藏信息和有效期、性能評價和所用測試菌株、技術數據清單、質控證書以及必要的安全/危害數據等材料。廣東不銹鋼內桶培養基制備儀培養基根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、培養基等。
培養基pH值不在標準范圍內的問題:出現此類情況有很多原因,生物大致分為①廠家質量:出廠時pH不穩定。②滅菌問題:是蒸壓過高或殺菌時間過長,導致葡萄糖焦化,因此,pH值降低。③存放周期:保存時間超過保質期或結塊水的質量有問題。④水質問題:采用去離子水/蒸餾水/純凈水等,不要采用礦泉水和自來水。⑤存儲溫度:儲存溫度過高。⑥光線直射等六種原因,可逐一檢查排除解決問題。這樣的培養基稱之為鑒別培養基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養基就是一種常用的鑒別性培養基。
培養基制備的基本方法:1.培養基配方的選定:同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對。2、培養基的制備記錄,每次制備培養基均應有記錄,包括培養推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份。3.培養基成分的稱取。培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。5、培養塞pH的初步調整培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正。培養自養微生物的培養基應由簡單的無機物組成。
消毒與滅菌的區別:消毒指使用較為溫和的物理或化學方法單殺死物體表面或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調節pH7.2~7.6,經滅菌處理后,即為基礎液體培養基。北京Systec培養基制備儀
組合培養基是一類按微生物的營養要求精確設計后用多種高純化學試劑配制成的培養基。廣東不銹鋼內桶培養基制備儀
培養基制備儀:培養基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經消毒過后的無菌水。2、培養基進行復水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復水后培養基總體積的2倍,預防出現溢出情況。4、在對培養基進行加熱時,若培養基內含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現培養基結底炭化從而造成成分損害。部分培養基則需要使用沸水進行加熱,預防發生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去。6、而當對培養基實施滅菌時,需嚴格按照說明規范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結合實際情況,合理調節滅菌時間,防止出現培養基滅菌過度而造成的成分變性。廣東不銹鋼內桶培養基制備儀
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