體外動物細胞培養時需要大量谷氨酰胺,利用量常超過其他必須氨基酸利用量的總和。維生素是維持細胞生長的生物活性物質,在細胞代謝中起調節及控制作用。維生素可分為水溶性和脂溶性兩類,水溶性維生素主要包括泛酸、維生素B12、葉酸、煙酰胺、吡哆醛、硫胺素、核黃素、維生素C、膽堿、肌醇等;脂溶性維生素主要包括維生素A、D、E、K等;有的培養液中還直接采用ATP和輔酶A;大部分培養基中還有生物素。許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。比如,泛酸可以在細胞內轉變成?;d體蛋白和輔酶(如輔酶A),參與糖類、脂類和蛋白質代謝中的催化反應;維生素B12則在細胞內...
將蒸過的原料置于室溫下過夜,未被殺死的孢子便發芽生長,芽孢發育成營養細胞,再30min便可殺死。如此連續反復進行2-3次,亦可達到徹底**的目的。3、分批**的操作分批滅歇是在所用的發酵罐或其他培養裝置中進行的,它是在配制罐中配好培養基后,通過**管道輸入發酵罐等培養設備中,然后開始**。在進行培養基的間歇**之前,通常先將發酵罐等培養裝置的分空氣過濾器進行**,并且用空氣將分過濾器吹干。開始**時,應先放去夾套或蛇管中的冷水,開啟排氣管閥,通過空氣管向發酵罐內的培養基通入蒸汽進行加熱,同時,也可在夾套內通蒸汽進行間接加熱。當培養基溫度升到70℃左右時,從取樣管和放料管向罐內通入蒸汽進...
以及無血清培養的基礎細胞培養基。RPMI-1640細胞培養基專門針對淋巴細胞培養設計,含有BSS、21種氨基酸、維生素等,***適于多種正常細胞和腫*細胞的培養,也用做懸浮細胞培養。HamF12細胞培養基含微量元素,可在血清含量低時用,適用于克隆化培養。F12適用于CHO細胞,也是無血清細胞培養基中常用的基礎細胞培養基。DMEM/F12細胞培養基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發無血清細胞培養基時的基礎細胞培養基。與天然培養基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養中使用合成培養基時必須加入一定量的天然培養...
cs液體培養基和1/2cs液體培養基在用不同ph超純水(ph為)配制時的ph都較為穩定,在未調ph的情況下,可直接用于多種植物培養。如圖8所示。(2)以克新18號馬鈴薯無菌苗為例,觀察在未調ph和將ph調至:a、培養基制作方法:隨機選取超純水,測得其ph為,用于配制8種不同的液體培養基。第一種:1/2ms未調ph液體培養基,其為取1/2ms基本培養基置于ph為;第二種:1/2cs未調ph液體培養基,其為取1/2cs基本培養基置于ph為;第三種:ms未調ph液體培養基,其為取ms基本培養基置于ph為;第四種:cs未調ph液體培養基,其為取cs基本培養基置于ph為;第五種:1/,其為取1/...
發酵培養基為:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,cecl30-40mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;發酵工藝同實施例1,100l發酵罐中含有70l發酵培養基。設置cecl3的添加濃度為0,,如圖1-2所示,隨著cecl3添加量的增加,菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升,當添加量為10mg/l時,菌體濃度和谷氨酸含量達到峰值,然后出現下降趨勢,但是整個過程中,糖酸轉化率沒有明顯改變(附圖未顯示);說明cecl3稀土鹽能夠促進菌株增殖,提高谷氨酸相關合成酶的活...
體外培養時,一定的濃度范圍條件下,葡萄糖主要經糖酵解循環轉化成乳酸來為細胞提供能量。(氨基酸)氨基酸在細胞內的重要生理作用主要體現在以下幾個方面:①是蛋白質的基本組成單位,用于合成蛋白質和多肽;②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;③某些氨基酸還具有獨特的生理作用,如甘氨酸參與生物轉化作用,丙氨酸和谷氨酰胺參與細胞內氨的運輸等;④可轉變成糖類和脂肪,參與氧化供能。細胞所能利用的氨基酸是L型同分異構體,D型氨基酸不能被利用。不同的細胞對氨基酸的需求各異,但有些必需氨基酸是細胞不能自身合成的,必須依靠外源的細胞培養液提供。其余非必需氨基酸,細胞可以自己合成,或通...
將蒸過的原料置于室溫下過夜,未被殺死的孢子便發芽生長,芽孢發育成營養細胞,再30min便可殺死。如此連續反復進行2-3次,亦可達到徹底**的目的。3、分批**的操作分批滅歇是在所用的發酵罐或其他培養裝置中進行的,它是在配制罐中配好培養基后,通過**管道輸入發酵罐等培養設備中,然后開始**。在進行培養基的間歇**之前,通常先將發酵罐等培養裝置的分空氣過濾器進行**,并且用空氣將分過濾器吹干。開始**時,應先放去夾套或蛇管中的冷水,開啟排氣管閥,通過空氣管向發酵罐內的培養基通入蒸汽進行加熱,同時,也可在夾套內通蒸汽進行間接加熱。當培養基溫度升到70℃左右時,從取樣管和放料管向罐內通入蒸汽進...
因為解凍時可能會有營養成份析出,影響培養效果。正常情況下于2~8℃避光保存,使用前從冰箱取出,放入室溫進行平衡。通常的液體培養基有效期是6個月到12個月。液體細胞培養基盡量避免長期貯存,其中的谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解,如果細胞生長不良,可考慮檢測培養基中的谷氨酰胺含量確定是否再補加谷氨酰胺。市售商業化液體細胞培養基有具體的有效期,對于使用干粉細胞培養基自行配制成液體以后,也應低溫(2~8℃)貯存。除培養基中如谷氨酰胺易降解之外,培養基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會發生降解或是析出。5.細胞培養基使用過程中常見問題分析由于大多數細胞適宜的pH為,偏離此范圍可能對細胞生長...
它*需要很小的實驗品牌:IBS型號:MEDIACLAVE&MEDIAJET參考報價:面議轉1854血液增菌培養基中制備實驗檢測方案(抗體試劑盒)實驗原理:供血液和骨髓液病原菌的增菌培養。血液增菌培養基主要用于血液和骨髓液病原菌的增菌培養。品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬制備微生物檢測培養基細節問題制*廠潔凈車間的節能設計節能是我國可持續展開計謀中的首要能源政策。然則,歷久以來,*廠潔凈室設計中針對的首要矛盾是微粒及**空氣過濾器,而節能問題不時未惹起高度注重。跟著我國GMP達標*廠的潔凈室樹立局限疾速展開與擴展,品牌:安捷倫型號:1260Lnifnti...
式中:N0—開始**(t=0)時原有活菌數;Nt----經時間t后殘存活菌數。k:意義同上;t:表示理論**時間k=()logNt/N0;比死亡速率常數K,K值大,表明微生物容易死亡。理論**時間的計算需要注意以下幾個問題:(1)K值因不同的微生物種類不同、不同的生理狀態、不同的外界環境,差別很大,實質上,它是微生物熱阻的一種表示形式,微生物的熱阻越大,K值也越小。可以取耐熱性芽孢桿菌的K進行計算。(2)在計算過程中,N0,Nt如何取值?N0為**開始時培養基中活微生物數,可以參考一般培養基中的活微生物數為(1-2)×107個/ml;Nt通常取,既**失敗的概率為千分之一。(3)上述*...
參與細胞的代謝活動。此外,通過提供鈉,K+和Ca2+,幫助細胞調節細胞膜功能。Na+是細胞外液中**主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用,還與Cl-共同參與生物電活動、維持水平衡和酸堿平衡等。K+主要分布在細胞內液,對于***某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+和Mg2+主要參與信號傳導、能量代謝、脂肪酸合成、核糖體穩定和蛋白質合成等多種生理作用。PO43-、SO42-、HCO3-是基質所需陰離子,同時是細胞內電荷的調節者。磷對于細胞的生長、代謝和調控都有重要的作用,含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白質是構成細胞的主要成分,ATP、ADP是能量生...
從而提高菌株增殖速率,但是濃度過大會導致抑菌現象,后期菌株增殖放緩,以產酸為主,2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑,使得細胞壁疏松,提高細胞通透性,促進谷氨酸釋放到發酵液,從而提高了谷氨酸產量和糖酸轉化率。三、通過上述實驗確定cecl3添加量為10mg/l、2-羥基乙胺的添加量40mg/l,在此基礎上,研究發酵培養基b對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉化率的影響。對照組1采用發酵培養基a進行發酵,不采用發酵培養基b,100l發酵罐中含有70l發酵培養基a;發酵工藝參照實施例1。對照組2:發酵培養基b中不添加琥珀酸,其余同實施例1。對照組3:發酵培養基b中不添加殼聚糖,其余同實施例1。...
本發明涉及植物**培養技術領域,特別涉及一種植物**培養基。背景技術:ms培養基于1962年由murashige和skoog設計,是目前植物**培養中應用**為***的培養基。據《危險化學品安全管理條例》(***令第591號)、《民用物品安全管理條例》及《易制爆危險化學品名錄》(2017年版)可知,ms培養基的主要成分硝酸鉀、硝酸銨均為易制爆管制試劑,隨著**監管越發嚴格,所有易制爆試劑的購買、儲存及使用變得越來越困難,尤其是兼有硝態氮和銨態氮的硝酸銨,其純品被禁止市場流通,為植物**培養帶來很大難度。b5培養基于1968年由gamborg等為培養大豆根細胞而設計,n6培養基于1974...
此法由巴斯德創立,用于酒類消毒而得名。目前用于牛乳消毒。方法有兩種:一種為℃加熱15秒,另一種為63-66℃加熱30分鐘。大多采用第一種方法。(2)煮沸法。在1個大氣壓下,水煮沸后溫度達100℃,煮沸5分鐘后可殺死一般**繁殖體。如于水中加入2%碳酸鈉,可將其沸點提高至105℃,既可促進芽胞的殺滅,又可防止金屬器皿生銹。(3)流通蒸氣消毒法。又稱常壓蒸氣消毒法,常用附諾(Amold)流通蒸氣**器,利用1個大氣壓下100℃水蒸氣進行消毒,10-30分鐘后**繁殖體被殺死,但對芽孢作用不大。(4)間歇**法(fractionalsterilization)。采用間歇方式達到**目的。將*...
本發明涉及植物**培養技術領域,尤其是涉及一種繡球的液體培養基組培快繁方法。背景技術:繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球屬落葉灌木,別名八仙花、**花、粉團花、雪球花、草繡球等,是園林上應用***的觀賞植物。原產于我國長江流域及以南,自然株高2m。葉對生,倒卵或橢圓形,邊緣有鋸齒,傘房花序頂生,直徑20cm,近球形?;ㄉ嘧?,青白色,漸轉粉紅色,再轉紫紅色,花色美艷。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4~6時,花色多呈藍色;ph值,則呈紅色。繡球花葉片翠綠,花色鮮艷,盛開時花團錦簇,美麗多姿,每簇花可開2個月之久,觀賞期長。由于繡球花的孕性花極為少數...
CD3-CD56+:50%-90%NK細胞無血清培養基制劑制備過程中,需要對細胞進行3次清洗,在大量的實驗中會發現,在清洗細胞的過程中往往會損失大量細胞,少則30%多則50%。友康研**細胞回收液干細胞溫和消化酶專門用于干細胞的消化,包括臍帶間充質干細胞,脂肪間充質干細胞,胚胎干細胞(ES)等。消化作用其溫和,對細胞的干細胞溫和消化酶(500mL/瓶)T細胞無血清培養基可用于Car-T細胞的培養。培養時可不添加任何自體血漿。T細胞無血清培養基用于HEK293細胞的培養及重組蛋白的表達,HEK293蛋白表達無血清培養基成分明確,比較大細胞密度可達7×10E6cells/mHEK293蛋白...
對于大多數哺乳類動物細胞,滲透壓在260~320mOsm/kg的范圍內都適宜。在生產、配制細胞培養基的過程中,滲透壓的測定較為重要,有助于防止在生產、配制過程中出現稱量等方面的錯誤。反應器高密度培養動物細胞過程,在添加碳酸氫鈉的過程中注意滲透壓的監控,防止滲透壓過高對細胞的損害。溫度溫度對細胞培養基有較大的影響,溫度過高可引起營養成份的降解或破壞,細胞培養基的pH、離子強度和電解常數pKa也可能受到影響。如細胞培養液中的谷氨酰胺,在高溫條件下降解的速度較快,如35℃貯存時,放置3天降解25%左右,在4℃貯存3周降解約20%。粘滯性及表面張力含血清細胞培養液的粘滯性主要是由血清引起的,在...
但酚紅在無血清細胞培養基中可能帶來胞內鈉/鉀失衡,影響細胞生長。碳酸氫鈉在細胞培養基中主要是作為緩沖系統,此外還具有調節滲透壓的作用。通常產品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標準、安全量,是在科學的基礎上根據實踐經驗所得。但是由于不同的細胞系(株)不同,同一株細胞適應環境也可能不同(細胞耐受性不同等),且存在的地域性水質差異等,在實際生產過程中也可稍作改動,但使用者需做相應的檢測(理化及細胞生產試驗等)。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH~,在高濃度時對一些細胞可能**。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10...
mgso4·7h2o20-200mg/l,2-羥基乙胺10-50mg/l,cecl31-20mg/l,mnso4·h2o1-10mg/l,feso4·7h2o1-10mg/l,vb15-50mg/l,生物素1-10μg/l;將各原料攪拌均勻后,調節ph為6-7,121℃**,自然冷卻,制得發酵培養基a。更推薦地,所述發酵培養基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg...
按每個2品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【原創】實驗室培養基制備質量保證通則我正在學習這個標準,對實驗室認可很重要,有興趣的一起學習,同時希望得到高人指點品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【分享】微生物常識---第二講培養基制備技術一、玻璃器皿的清洗在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過**等準備就緒后,才能使用。品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【資料】培養基...
微量元素在細胞內通常以與有機物結合的形式存在。其中鐵在細胞中參與氧的轉運;鈷是維生素B12的組成部分,參與葉酸的合成和脂肪酸的合成;鎳能夠***脫氧核糖核酸酶、乙酰輔酶A合成酶等在細胞內具有重要功能的酶,還具有穩定核酸結構的功能;亞硒酸鈉中的硒,作為谷胱甘肽過氧化物酶的輔基,具有抗過氧化物能力,參與消除細胞內的脂肪酸過氧化物,提高細胞的生長速率和活性。在低血清、無血清細胞培養基中,為滿足細胞生長增殖需要,常常添加一些成份:蛋白質、多肽、核苷、嘌呤、檸檬酸循環的中間產物、脂類、及一些血清替代因子等。其中蛋白質具有重要的作用,動物細胞對許多物質(難溶于水的離子或脂類物質)的攝取需要借助蛋白...
培養基制備培養基使用說明中有加熱溶解后高壓**,有的加熱沸騰后高壓**,見過一些實驗室,不經加熱直接高壓**,也有的實驗室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對檢測結果有沒有影響?品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養基制備培養基制備后應保持一定的透明度,下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸,調PH值C、過濾、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【求助】培養基制備請問牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區別?可互相替代嗎?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號:12...
實驗組和對照組3選用發酵中期添加琥珀酸,此時,菌體增殖放緩,以產酸為主,琥珀酸對三羧酸循環有正向促進作用,而對乙醛酸循環途徑起**作用,從而導致谷氨酸產量的增加;梯度試驗發現,琥珀酸添加量過**于10g/l),并不會對谷氨酸產量帶來進一步的提升,綜合成本考慮,選擇低于10g/l的添加量較為合適。對照組2和實驗組在發酵中后期添加殼聚糖,能夠改變細胞壁的通透性,促進谷氨酸分泌到胞外,從而提升谷氨酸產量和糖酸轉化率;但是殼聚糖添加量(超過100mg/l)過大會導致抑菌現象發生,進而造成菌株死亡。雖然,上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述,但在本發明基礎上,可以對之作一些...
參與細胞的代謝活動。此外,通過提供鈉,K+和Ca2+,幫助細胞調節細胞膜功能。Na+是細胞外液中**主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用,還與Cl-共同參與生物電活動、維持水平衡和酸堿平衡等。K+主要分布在細胞內液,對于***某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+和Mg2+主要參與信號傳導、能量代謝、脂肪酸合成、核糖體穩定和蛋白質合成等多種生理作用。PO43-、SO42-、HCO3-是基質所需陰離子,同時是細胞內電荷的調節者。磷對于細胞的生長、代謝和調控都有重要的作用,含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白質是構成細胞的主要成分,ATP、ADP是能量生...
導致細胞培養基變質失效。控制細胞培養基中**和霉菌,是延長細胞培養基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華******典》2005版二部附錄第100頁的口服給*制劑的微生物限度標準,并嚴于該標準,規定細胞培養基產品的**數每1g不得超過200個,霉菌數每1g不得超過50個。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,混勻即得試樣。按中華******典2005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進行,檢查項目為**數、霉菌數。檢查法采用平皿法。細胞生長試驗這是一個性能特性表述的要求。細胞培養基的功能就是培養哺乳類動物細胞,因此經過細胞培養效果的檢驗是產品***劣的直觀表述,這也是很多生物制*用...
cs液體培養基和1/2cs液體培養基在用不同ph超純水(ph為)配制時的ph都較為穩定,在未調ph的情況下,可直接用于多種植物培養。如圖8所示。(2)以克新18號馬鈴薯無菌苗為例,觀察在未調ph和將ph調至:a、培養基制作方法:隨機選取超純水,測得其ph為,用于配制8種不同的液體培養基。第一種:1/2ms未調ph液體培養基,其為取1/2ms基本培養基置于ph為;第二種:1/2cs未調ph液體培養基,其為取1/2cs基本培養基置于ph為;第三種:ms未調ph液體培養基,其為取ms基本培養基置于ph為;第四種:cs未調ph液體培養基,其為取cs基本培養基置于ph為;第五種:1/,其為取1/...
才能滿足新細胞合成、細胞代謝等生化反應所需要的物質和能量。細胞培養基的主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助營養物質等。此外,還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。水是細胞的主要成份,也是細胞賴以生存的主要環境。細胞培養液中90%以上的成份是水。細胞對水的品質非常敏感,水的品質將直接影響細胞培養的效果。而水中通常含有重金屬、氯、磷、有機物、熱原等污染物,細胞培養用水須經過純化,品質應符合***典注射用水標準或者超純水的標準。能源和碳源是用于維持細胞生命和支持細胞生長,主要包括糖、糖酵解的產物和谷氨酰胺,其他氨基酸是次要的能源和碳源物質。細胞能夠利用的糖類主...
無動物組分無血清細胞培養基的應用三、細胞培養基的質量標準和檢測方法澄清度水是細胞培養基的溶劑。細胞培養基中的營養成分只有完全溶解于水才能被細胞吸收攝取,細胞才能生長增殖,因此細胞培養基是否溶解以及培養液是否透明澄清直接影響培養基使用。該項目是通過對水溶解后的細胞培養基的澄清度檢查,判斷細胞培養基的澄清度。按中華******典2005年版二部附錄ⅨB進行。pH值哺乳類動物細胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導致細胞死亡。pH值的測定也可以檢查細胞培養基的批間差。清大天一標準規定取規定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細胞培...
實驗組和對照組3選用發酵中期添加琥珀酸,此時,菌體增殖放緩,以產酸為主,琥珀酸對三羧酸循環有正向促進作用,而對乙醛酸循環途徑起**作用,從而導致谷氨酸產量的增加;梯度試驗發現,琥珀酸添加量過**于10g/l),并不會對谷氨酸產量帶來進一步的提升,綜合成本考慮,選擇低于10g/l的添加量較為合適。對照組2和實驗組在發酵中后期添加殼聚糖,能夠改變細胞壁的通透性,促進谷氨酸分泌到胞外,從而提升谷氨酸產量和糖酸轉化率;但是殼聚糖添加量(超過100mg/l)過大會導致抑菌現象發生,進而造成菌株死亡。雖然,上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述,但在本發明基礎上,可以對之作一些...
如何正確地使用培養基及**大程度地保持培養基的營養以維持細胞的生長,對每個培養者都很重要。培養基的使用依不同的培養基種類、培養方式、細胞種類的不同而存在差異。細胞培養液的構成細胞培養液指細胞生長的液體環境,一般指完全培養液,添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養液。細胞培養基&血清模式血清對于在傳統培養基配方中生長和增殖的大多數細胞系來說是需要的,因為大多數單獨的培養基并不能提供細胞生長所需要的全部營養,如MEM培養基,較為常用的量為5%~10%的比例,而特殊的低血清培養基血清量可降至3%左右,細胞的形態和功能不受影響。細胞培養基&乳歐液模式化學合成培養基現雖已大規模使...