在分子生物學和細胞生物學研究中,核酸染料是不可或缺的工具,用于檢測和分析DNA和RNA。RcView吖啶橙核酸染料是一種新型的熒光染料,以其性能和安全性,逐漸成為實驗室中理想的核酸染色選擇。一、產品特點高靈敏度與特異性RcView吖啶橙核酸染料能夠與核酸結合后產生強烈的熒光信號,其靈敏度與傳統的溴化乙錠(EB)相當,但安全性更高。在紫外透射光下,雙鏈DNA呈現綠色熒光,而單鏈DNA和RNA則呈現紅色熒光,這種獨特的雙色特性使其能夠區分不同形式的核酸。安全性傳統的EB染料具有強致病性,而RcView吖啶橙核酸染料通過多項致突變性試驗(如Ames試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗等),結果均為陰性,是一種安全的替代品。操作簡便RcView的使用方法與EB完全相同,適用于瓊脂糖凝膠電泳中的核酸染色。用戶只需在融化的瓊脂糖凝膠溶液中加入RcView,輕輕搖勻后倒膠即可。使用 Tn5 轉座酶可以保證 DNA的 片段化的質量,同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低,能夠為后續的實驗。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag
一步法操作,簡化實驗流程該試劑盒將逆轉錄和qPCR反應集成在同一管中,無需額外的開蓋或移液操作,減少了實驗步驟和操作時間,同時降低了污染風險。這種一體化設計特別適合高通量檢測,能夠顯著提高實驗效率。高效的dUTP/UDG防污染系統OneStepRT-qPCRProbeKit(UDGPlus)引入了dUTP/UDG防污染體系,能夠有效降解含有尿嘧啶的污染物,防止氣溶膠污染導致的假陽性結果。熱敏感UDG在逆轉錄過程中迅速失活,不會影響后續的RT-qPCR效率。高靈敏度與特異性試劑盒采用高質量的逆轉錄酶和熱啟動TaqDNA聚合酶,結合優化的緩沖體系,能夠實現低至10拷貝的RNA模板檢測。此外,其多重檢測能力可同時擴增多個靶標,適用于復雜的樣本分析。適用性該試劑盒適用于多種樣本類型,包括動物、植物和微生物的總RNA或mRNA,能夠滿足不同研究領域的多樣化需求。Recombinant Human A2AR Protein-VLPCas9 NLS可用于體外實驗中篩選能夠高效引導Cas9蛋白進行DNA剪切的gRNA序列 。
ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端處理上的主要不同點如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脫氧核糖核酸酶活性,它從DNA鏈的3'-OH末端逐步切去單核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一種5'→3'核酸外切酶,能選擇性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。2.**底物特異性**:-**ExoIII**:適底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于雙鏈DNA切刻位點產生單鏈缺口。由于對單鏈DNA無活性,因此難以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:適底物是5'磷酸化的雙鏈DNA,對單鏈DNA和5'端未磷酸化修飾的DNA的酶切活性較低,不能從DNA的切刻或缺口處起始消化。3.**活性差異**:-**ExoIII**:對具有3'-突出末端(至少有4個堿基,且具有3'-末端C殘基)的DNA、單鏈DNA、硫代磷酸酯連接的核苷酸無活性。-**Lambda核酸外切酶**:對5'-OH端的切割速度比5'-P端慢約20倍;對單鏈DNA的酶切速度比雙鏈DNA慢約100倍。4.**應用場景**:-**ExoIII**:可以用于生產特定方向的單鏈DNA,將線性化DNA設計成為一端為不切割末端(3'突出端),另一端則設計為易切割末端(平端或5'突出端)。
pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實驗中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質-DNA相互作用的技術,pA-MNase在此技術中用于在免疫沉淀后切割染色質DNA,以分析特定蛋白質與DNA的結合位點。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質-基因組互作研究技術,pA-MNase在此技術中用于在目標蛋白質被抗體識別后,通過核酸酶活性切割附近的DNA,從而釋放與目標蛋白質相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術相比傳統的ChIP-Seq具有實驗周期短、信噪比高、可重復性好以及細胞投入量低的優勢,尤其適用于早期胚胎發育、干細胞、**以及表觀遺傳學等研究領域。3.**染色質免疫沉淀實驗**:pA-MNase在染色質免疫沉淀實驗中用于染色質片段化,它在核小體間DNAlinker上進行切割保持了核小體的完整性,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過程中染色質乳化所帶來的負面影響。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細胞裂解液中的核酸,以減少樣品的粘度,這對于后續的蛋白質分析實驗尤為重要。
5'-3'外切核酸酶活性是指DNA聚合酶能夠從DNA鏈的5'端向3'端切除核苷酸的能力。這種活性通常用于修復受損的DNA或去除錯誤配對的核苷酸。具體來說,5'-3'外切核酸酶活性可以在DNA合成過程中切除前方的核苷酸,幫助錯誤或不需要的序列,從而確保DNA的正確復制和修復。在DNA聚合酶中,5'-3'外切核酸酶活性與聚合酶活性相輔相成。聚合酶在合成新鏈時,5'-3'外切酶活性可以在發現錯誤時進行修正,確保合成的DNA鏈的準確性。例如,E.coliDNA聚合酶I具有這種外切酶活性,可以在合成過程中去除錯誤的核苷酸,從而提高DNA的保真度。需要注意的是,BstDNAPolymerase,LargeFragment不具有5'-3'外切核酸酶活性,這使得它在某些應用中更為穩定,特別是在等溫擴增反應中,如LAMP(環介導等溫擴增)和RCA(滾環擴增)等。泛素蛋白的C末端通常通過酰胺鍵與靶蛋白的氨基團連接在一起,最常見的是與靶蛋白賴氨酸的ε氨基團相連。Recombinant Human TNFR2/CD120b/TNFRSF1B Protein,hFc Tag
聚合酶鏈式反應(PCR)技術已成為不可或缺的工具,廣泛應用于基因擴增突變檢測基因表達分析等多個領域。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag
磁珠法DNA凝膠回收試劑盒是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中回收特定DNA片段的實驗室工具。與傳統的柱純化方法相比,磁珠法具有多個優勢:1.**操作簡便快捷**:磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的操作步驟通常包括凝膠的融化、DNA的結合、磁珠的洗滌和DNA的洗脫,整個過程可以在20分鐘內完成。2.**高純度和高回收率**:磁珠法能夠穩定、高效地從凝膠中回收DNA,純化所得的DNA可直接用于酶切、連接、轉化細菌、測序、PCR、雜交等后續操作。通常回收率達到60-80%,對于200bp以下小片段和10kb以上大片段的回收率有所下降。3.**適用性廣**:適用于100bp以上DNA片段的純化,對達到10kb片段DNA的純化也能保持較好的效果。4.**安全性高**:操作過程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,更加環保和安全。5.**靈活性**:可以根據實際狀況靈活調節磁珠用量,適應不同體積和濃度的樣品處理。6.**自動化和高通量**:磁珠法純化試劑盒適合手工操作,也可用于自動化工作站或核酸自動提取儀,實現高通量操作。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag