使用BloodGenomicDNAIsolationKitwithMagneticBeads(血液基因組DNA提取試劑盒,磁珠法)進行血液樣本中基因組DNA的提取,主要步驟如下:1.**實驗準備**:準備抗凝全血樣本(如EDTA抗凝血),移液器及無菌,15ml離心管,無水乙醇,70%乙醇,干凈的吸水紙,渦旋振蕩器,金屬浴/水浴,臺式離心機等。2.**樣本處理**:取適量血液樣本,根據試劑盒要求,可能需要將血液體積調整至特定量,例如200μl,并可能需要加入PBS緩沖液。3.**裂解血液細胞**:向血液樣本中加入蛋白酶K和細胞裂解液,渦旋混勻后,置于金屬浴或水浴中進行裂解,通常在65°C孵育10-15分鐘,并在此期間定期混勻。4.**DNA與磁珠結合**:向裂解后的樣本中加入異丙醇和磁珠懸浮液,渦旋混勻后,室溫放置一段時間,以便于基因組DNA與磁珠結合。5.**磁珠分離**:將樣本置于磁力架上,待磁珠聚集后,小心移除上清液,去除雜質。6.**洗滌磁珠**:向磁珠中加入漂洗液和洗滌液,進行洗滌以去除殘留的蛋白質和鹽分,然后再次使用磁力架分離磁珠,移除洗滌液。
T5核酸外切酶(T5Exonuclease)具有以下特點和技術應用:1.**降解方向**:T5核酸外切酶按照5'→3'方向降解雙鏈或單鏈DNA。2.**起始消化位置**:T5核酸外切酶既能從單鏈或雙鏈DNA的5'末端起始消化,也可以從線性或環狀雙鏈DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)處起始消化。3.**對超螺旋雙鏈DNA的作用**:T5核酸外切酶無法降解超螺旋雙鏈DNA。4.**單鏈DNA核酸內切酶活性**:T5核酸外切酶還具有單鏈DNA核酸內切酶活性。5.**應用領域**:-用于Gibson組裝,這是一種在恒溫條件下有效連接帶有多個重疊序列片段的技術。-從完全連接的環狀雙鏈DNA中去除不完全連接產物。-降解堿裂解質粒提取方法中產生的變性DNA,增加超螺旋DNA比例,提高DNA克隆和轉染效率。-降解質粒樣品中污染的線性化和切刻DNA。6.**操作條件**:推薦在37℃溫育30分鐘,之后加入EDTA至終濃度為20mM終止反應。7.**儲存條件**:-25~-15℃保存,有效期3年。8.**注意事項**:避免起泡或劇烈攪拌、渦旋等操作,以防止本品失活。這些特點和技術應用使得T5核酸外切酶在分子生物學實驗中,尤其是在DNA克隆和基因片段組裝中,具有重要的應用價值。Rat TARC/CCL17Pfu DNA Polymerase在分子進化研究中的應用:Pfu DNA Polymerase用于分子進化研究,確保DNA序列的準確復制。
Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye):擴增的得力助手在現代分子生物學研究中,聚合酶鏈式反應(PCR)技術是不可或缺的工具,廣泛應用于基因克隆、基因表達分析、遺傳病診斷、病原體檢測等諸多領域。而一款PCR反應體系則是實驗成功的關鍵。Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye)憑借其獨特的配方和性能,成為了眾多科研工作者的主要。一、熱啟動機制:開啟擴增之門Hot-Start技術是該Master Mix的亮點之一。在常規PCR反應中,由于Taq酶在室溫下就具有活性,容易導致引物非特異性結合和延伸,從而產生非特異性擴增產物,影響實驗結果的準確性和重復性。而Hot-Start Taq Master Mix通過特殊的化學修飾或抗體封閉技術,在反應初期將Taq酶的活性暫時抑制,只有當反應體系升溫至一定溫度時,修飾或抗體才會被破壞,Taq酶活性得以釋放。這一機制有效避免了低溫下的非特異性擴增,顯著提高了PCR反應的特異性和準確性,尤其適用于復雜模板、低豐度靶基因以及對特異性要求極高的實驗場景。
高靈敏度與特異性該試劑采用了優化的反應緩沖體系和抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,能夠顯著提高擴增效率和特異性。即使在低拷貝數的模板條件下,也能實現穩定檢測,例如某些產品可在3 copies/反應的水平下實現穩定檢出。此外,該試劑還通過添加抑制非特異性擴增的因子,進一步提升了多重反應的準確性。2. 高效的多重檢測能力Multiplex Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 支持在同一反應體系中進行多達四重的靶基因檢測。這種多重檢測能力極大地提高了實驗效率,減少了樣本用量和檢測時間,特別適用于需要同時檢測多個基因或病原體的場景。3. 強大的防污染系統試劑中包含的dUTP/UDG系統能夠有效防止PCR產物的氣溶膠污染,從而避免假陽性結果的出現。UDG酶在室溫下即可發揮作用,確保實驗數據的準確性和可靠性。4. 快速擴增與操作簡便該試劑支持快速擴增程序,可在短時間內完成qPCR反應,例如某些產品可在35分鐘內完成45個循環。同時,2×預混液的設計使得實驗操作更加簡便,只需加入模板、引物和探針即可進行反應。Endo H,糖苷內切酶 H 具有高度特異性的催化活性,它能夠特異性地水解 N - 連接寡糖鏈中兩個糖苷鍵。
dUTP,100mMSolution:分子生物學實驗中的高效工具dUTP(2'-脫氧尿苷5'-三磷酸)是一種重要的核苷酸,應用于分子生物學實驗中。其100mM溶液形式為研究人員提供了便捷、高效的實驗材料,尤其在PCR、qPCR、RT-PCR等技術中表現出色。產品特點高純度與穩定性dUTP溶液的純度≥99%(HPLC檢測),且不含DNase、RNase等雜質,確保實驗結果的可靠性。其以鈉鹽形式存在,用超純水配制,pH值調節至7.0左右,具有良好的化學穩定性。即用型設計該產品為即用型溶液,濃度為100mM,無需額外稀釋或處理,可直接用于多種分子生物學反應。防污染機制dUTP常用于替代dTTP,使擴增產物中包含尿嘧啶。結合尿嘧啶-N-糖基酶(UNG)使用時,可有效去除殘留的PCR產物污染,避免假陽性結果。性能與應用實驗應用dUTP適用于多種DNA合成反應,包括PCR、qPCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸、DNA測序和標記等。其在PCR中的應用尤為突出,通過引入尿嘧啶,可降低交叉污染的風險。優化實驗條件dUTP溶液的pH值和濃度經過優化,適合與多種酶(如TaqDNA聚合酶)配合使用,確保反應體系的高效性和特異性。Pfu DNA Polymerase 適合擴增較長的DNA片段,有助于在基因編輯中處理大的基因區域或復雜的基因結構。Recombinant Human Syndecan-1 Protein,hFc Tag
Ultra-Long DNA Polymerase是一種專為擴增超長DNA片段設計的聚合酶能夠擴增長達數十kb上百kb的DNA片段。Recombinant Human Latent TGF beta 2/TGFB2 Protein,His Tag
一步法操作,簡化實驗流程該試劑盒將逆轉錄和qPCR反應集成在同一管中,無需額外的開蓋或移液操作,減少了實驗步驟和操作時間,同時降低了污染風險。這種一體化設計特別適合高通量檢測,能夠顯著提高實驗效率。高效的dUTP/UDG防污染系統OneStepRT-qPCRProbeKit(UDGPlus)引入了dUTP/UDG防污染體系,能夠有效降解含有尿嘧啶的污染物,防止氣溶膠污染導致的假陽性結果。熱敏感UDG在逆轉錄過程中迅速失活,不會影響后續的RT-qPCR效率。高靈敏度與特異性試劑盒采用高質量的逆轉錄酶和熱啟動TaqDNA聚合酶,結合優化的緩沖體系,能夠實現低至10拷貝的RNA模板檢測。此外,其多重檢測能力可同時擴增多個靶標,適用于復雜的樣本分析。適用性該試劑盒適用于多種樣本類型,包括動物、植物和微生物的總RNA或mRNA,能夠滿足不同研究領域的多樣化需求。Recombinant Human Latent TGF beta 2/TGFB2 Protein,His Tag