配制培養基需要哪些制備:(1)稱出規定數量的瓊脂和蔗糖,加水直到培養基較終容積的34,加熱溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養基(不加瓊脂)時無需加熱。(2)按需要加入一定量的各種貯存母液,包括生長調節物質和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要,培養基中所需的維生素,可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。(3)蒸餾水定容。充分混合后調節培養基的pH,一般以5.66.0為好。(4)培養基分裝,分裝量一般以占培養容器的1514為宜。之后在24h內完成高壓滅菌,也可以高壓滅菌后再進行培養基的無菌分裝,室溫下存放備用。暫時不用的培養基應放置于10攝氏度下保存,而含有生長調節物質的培養基在45攝氏度保存更佳。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養基的徹底滅菌。河南培養基制備器
培養基制備操作步驟:(一)準確稱量試劑根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。(二)校正pH值將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調節pH值到適宜范圍內。(三)過濾將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。(四)分裝將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。(五)滅菌培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到徹底滅菌的目的。培養基消毒 培養基制備器哪個品牌好培養基根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等。
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。
培養基制備基本方法:培養基配方的選定,同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養基pH的初步調整,培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正,因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的很終pH,保證培養基的質量。pH調正后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。
物理分類:液體培養基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。固體培養基,一類配制成的固體狀態的基質。根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。半固體培養基,指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。脫水培養基,又稱預制干燥培養基,指含有除水分外的一切成分的商品培養基。微生物分類;選擇性培養基:一類根據某微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能,較廣用于菌種篩選等領域。鑒別培養基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養基。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內。陜西培養基滅菌 培養基制備器
培養基制備器分裝好的培養基應立即進行滅菌。河南培養基制備器
Systec培養基準備器可以快速的準備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導),加入培養基原料,準備啟動滅菌程序。培養基可以直接在Sampleprep內懸浮溶解。強力磁力攪拌確保培養基在內腔里混合的均勻性,并防止凝結。培養基可以在滅菌前用WATERBATH(水浴)模式預先溶解。同時,直觀的圖形化界面使沒有經過專門培訓的人員也能方便的操作。用戶可以自定義設置多達50個滅菌程序,比如滅菌溫度、時間、分裝溫度等。它們可以被儲存起來并隨時調用。河南培養基制備器
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