磁珠法核酸提取一般可以分為四步：裂解——結合——洗滌——洗脫洗滌：核酸的高電荷磷酸骨架使其比蛋白質、多糖、脂肪等其他生物大分子物質更具親水性，根據它們理化性質的差異，用選擇性沉淀、層析、密度梯度離心等方法可將核酸分離、純化。用無水乙醇沉淀DNA，這是實驗中蕞常...

南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的支原體檢測試劑盒在PCR試劑配制及加樣上機環節有哪些注意事項？①實驗時應注意防止外源DNA對試劑的污染，先加樣品DNA，然后進行陽性質控品的操作。在制備反應試劑和添加DNA模板時，使用帶濾芯的搶頭，添加不同的試劑和不同的樣...

宿主細胞殘留DNA檢測：南京正揚生科科技有限公司自主研發的CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒的優點有哪些？①試劑盒經過獨特的設計開發，可以防止PCR產物污染；②產品檢測靈敏度高，定量限可低至1fg/μL；③試劑盒檢測準確度高，試劑盒配套定量參考品，且定量參考品...

南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的rcAAV復制型腺相關病毒檢測試劑盒有哪些優點？①試劑盒經過獨特的設計開發，可以防止PCR產物污染；②產品檢測靈敏度高；③重復性好，同一樣品重復檢測20次，CV＜15%；④檢測時間短，從樣品提取純化到出結果只需2.5h...

RCL復制型慢病毒檢測的背景：CAR-T（chimericantigenreceptorT-cellimmunotherapy），即嵌合抗原受體T細胞免疫療法。它是一種醫治種瘤的新型精確靶向療法，能夠精確、高效，且有希望治好ai癥的免疫醫治方法。目前，主要有兩...

復制性慢病毒/復制性逆轉錄病毒檢測的背景：慢病毒載體來源于病原體HIV-1，為了保證產品的安全性，目前基因醫治產品所用的慢病毒載體/逆轉錄病毒載體均為非復制性。通過將基因組中的輔助蛋白刪除，并將結構基因分別通過3-4個質粒系統進行分別包裝，形成三質粒系統或者四...

為什么要做宿主細胞殘留DNA檢測？近年來熱度驟增的生物制品藥物對諸多疾病療效斐然，在藥品市場中所占比重也是節節攀升。于是生物制品與之俱來的生物安全性問題被漸漸提上日程，其中宿主細胞殘留DNA由于可能會傳遞仲瘤或病毒相關基因，存在潛在的危險性，各國藥品監督管理機...

南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的Vero宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定量檢測各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中殘留的Vero宿主細胞DNA，產品具備檢測快速、操作簡單、特異性強、檢測靈敏度高、穩定性好、能防止PCR產...

美國藥典（USP）對宿主細胞殘留DNA檢測的規定：美國食品藥品監督管理局(FDA)發布的指導原則中指出生物制品宿主細胞DNA殘余限度不得超過100pg/劑量，對于大劑量的如單克隆抗體的生物制品，根據其殘余DNA來源及給藥途徑，DNA殘留量可放寬至10ng/...

基于細胞培養法和qPCR快檢法都能實現對重組腺相關病毒載體(rAAV)中復制型腺相關病毒(rcAAV)的污染率的檢測，但兩者在實際檢測中都存在檢測值不夠準確的風險（基于細胞培養法存在低于實際值的風險qPCR快檢法存在高于實際值的風險）。南京正揚生物科技有限公司...

宿主細胞殘留DNA是影響生物制品安全性的關鍵因素之一，它不僅會降低生物藥的有效性，還可能帶來傳染性或致瘤性等安全問題。因此建立合適的宿主細胞殘留DNA檢測方法有助于監測生產工藝，確保生物制品的安全性和質量。各國藥品監督管理機構對宿主細胞殘留DNA的殘留量有著嚴...

用qPCR法進行宿主細胞殘留DNA檢測時，出現擴增曲線異常的可能原因是什么？①如出現非特異性擴增現象：反應管未蓋緊或密閉性差引起溶液蒸發而造成。上機前確保管蓋密閉，反應結束后查看八聯管或96孔板各管液面是否一致。與設備硬件相關，需咨詢硬件供應商解決...

qPCR法宿主細胞殘留DNA檢測的原理：PCR反應過程中可通過熒光標記的特異性探針檢測PCR產物量。帶有一對熒光分子的探針與樣品中DNA通過堿基互補配對的原則結合，隨著PCR反應的進行，Taq聚合酶合成DNA，同時沿5’-3’方向水解DNA探針，一對熒光分子隨...

實時熒光定量PCR（qPCR）技術在生物制品質量控制方面應用非常普遍，如宿主細胞殘留DNA檢測，鼠源、禽源等外源病毒檢測，微生物快檢（支原體、分枝桿菌、細菌、***等），復制型病毒檢測（RCL、RCR、rcAAV等）、質粒拷貝數檢測及其它工藝雜質檢測等。qP...

基于細胞培養法的rcAAV復制型腺相關病毒檢測方法，該方法的原理是通過不斷的細胞傳代使得rcAAV實現擴增，之后再利用qPCR或Southern-blot的方法對rcAAV進行檢測，能保證檢測到的rcAAV都具有復制能力，是目前常用的檢測方法。然而，其檢測敏感...

宿主細胞殘留DNA檢測過程中，qPCR反應體系配制環節有哪些注意事項？①qPCR的整個操作要低溫環境進行，防止模板的降解，試劑避免反復凍融。②配制反應體系前試劑要充分混勻，除了模板外的反應體系要統一配制，然后再分配至qPCR管中，配制的時候考慮到操作或耗材帶來...

用qPCR進行宿主細胞殘留DNA檢測時，哪些因素會對檢測結果準確性和方法靈敏度存在較大影響？參考品DNA量值溯源及質量保證：參考品DNA的量值準確與否，直接關系到樣品檢測結果的準確性，因此需制定完善的參考品量值溯源程序，確保結果準確可靠。參考品DNA的質量要求...