如今，實時熒光定量PCR(qPCR)是一種優先的支原體檢測方法，因為它準確、靈敏且省時。與常規PCR不同，qPCR允許實時觀察支原體DNA的DNA擴增，因為特異性引物在熒光探針存在的情況下與其靶序列結合，從而導致DNA擴增和熒光增強。此外，qPCR比常...

南京正揚CHO宿主細胞殘留DNA檢測原理：試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定量檢測各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中殘留的CHO宿主細胞DNA。PCR反應過程中通過熒光標記的特異性探針檢測PCR產物量，通過連續監測反應體系中熒光數值的變化，可即時反...

宿主細胞殘留DNA檢測：實時熒光定量PCR法宿主細胞殘留DNA檢測的原理和方法：實時熒光定量PCR是基于PCR擴增時，在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，產物的增加可以通過熒光信號指示，通過實時監控PCR體系中的熒光信號，對樣本中初始模板進行定量分析...

實時熒光定量PCR（qPCR）技術在生物制品質量控制方面應用非常普遍，如宿主細胞殘留DNA檢測，鼠源、禽源等外源病毒檢測，微生物快檢（支原體、分枝桿菌、細菌、zhen菌等），復制型病毒檢測（RCL、RCR、rcAAV等）、質粒拷貝數檢測及其它工藝雜質檢測等。q...

基于細胞培養法的rcAAV復制型腺相關病毒檢測方法，該方法的原理是通過不斷的細胞傳代使得rcAAV實現擴增，之后再利用qPCR或Southern-blot的方法對rcAAV進行檢測，能保證檢測到的rcAAV都具有復制能力，是目前常用的檢測方法。然而，其檢測敏感...

基于細胞培養法的rcAAV復制型腺相關病毒檢測方法，該方法的原理是通過不斷的細胞傳代使得rcAAV實現擴增，之后再利用qPCR或Southern-blot的方法對rcAAV進行檢測，能保證檢測到的rcAAV都具有復制能力，是目前常用的檢測方法。然而，其檢測敏感...

實時熒光定量PCR（qPCR）技術在生物制品質量控制方面應用非常普遍，如宿主細胞殘留DNA檢測，鼠源、禽源等外源病毒檢測，微生物快檢（支原體、分枝桿菌、細菌、zhen菌等），復制型病毒檢測（RCL、RCR、rcAAV等）、質粒拷貝數檢測及其它工藝雜質檢測等。q...

南京正揚CHO宿主細胞殘留DNA檢測原理：試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定量檢測各種生物制品及藥品的中間品、半成品和成品中殘留的CHO宿主細胞DNA。PCR反應過程中通過熒光標記的特異性探針檢測PCR產物量，通過連續監測反應體系中熒光數值的變化，可即時反...

各國藥品監督管理機構對生物制品中宿主細胞殘留DNA檢測的要求：各國藥品監督管理機構對生物制品中宿主細胞殘留DNA的態度謹慎且明確，要求各制藥企業建立詳細可行、靈敏度高的檢測方法，用于驗證藥品的純化過程可以去除殘留DNA，并對終產品的產品放行嚴格把關，避免攜帶外...

宿主細胞殘留DNA檢測過程中，qPCR反應體系配制環節有哪些注意事項？①qPCR的整個操作要低溫環境進行，防止模板的降解，試劑避免反復凍融。②配制反應體系前試劑要充分混勻，除了模板外的反應體系要統一配制，然后再分配至qPCR管中，配制的時候考慮到操作或耗材帶來...

美國藥典（USP）對宿主細胞殘留DNA檢測的規定：美國食品藥品監督管理局(FDA)發布的指導原則中指出生物制品宿主細胞DNA殘余限度不得超過100pg/劑量，對于大劑量的如單克隆抗體的生物制品，根據其殘余DNA來源及給藥途徑，DNA殘留量可放寬至10ng/劑量...

用qPCR法進行支原體檢測時，出現擴增曲線復孔間熒光信號值降低及復孔間擴增曲線重復性差的原因可能是什么？復孔間部分曲線熒光信號值降低的現象比較常見，通常與反應管內存在氣泡相關，隨反應溫度升高，氣泡破裂導致熒光信號值降低。上機前需仔細檢查反應管內是否有氣泡殘留。...

復制性慢病毒/復制性逆轉錄病毒檢測的必要性：RCL/RCR會同逆轉錄病毒載體一樣，整合在細胞基因組中，從而產生因整合導致的原ai基因***，抑ai基因破壞或者使促細胞生長的因子高度表達而造成二次仲瘤的風險。因其具有復制性，即產生具有復制能力的病毒，增加了因整...

用qPCR法進行宿主細胞殘留DNA檢測時，出現擴增效率超出標準要求（低于83.3%或高于110%）的原因有哪些？①設計的引物探針不適用：重新分析靶標序列進行設計。②標曲濃度設定太高，超出標曲線性范圍：對范圍進行驗證，選取合適標曲范圍。③人員操作問題，如稀釋錯誤...

慢病毒載體是以人類免疫缺陷Ⅰ型病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV-1）為基礎發展起來的基因醫治載體，屬于逆轉錄病毒家族，又區別于一般的逆轉錄病毒載體，比逆轉錄病毒載體具有更強的***能力，具有容納外源性目的基因片段大、穩定整...

南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的RCL基因拷貝數檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、RCR基因拷貝數檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、rcAAV-5/N檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）既適用于基于細胞培養法對復制型病毒的qPCR法的檢測，也適用于對...

南京正揚生科科技有限公司自主研發的支原體檢測試劑盒包括支原體DNA提取試劑盒（磁珠法）和支原體DNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法），支原體DNA檢測試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定性檢測主細胞庫、工作細胞庫、病毒種子批以及臨床***用細胞中是否有...

為什么要做支原體檢測？支原體是蕞小和蕞簡單的自我復制生命體。由于支原體體積小（100nm），缺乏剛性的細胞壁，因此肉眼無法檢測到支原體，它們可以透過0.2μm的標準過濾膜，并對很多***都具有抵抗力。支原體污染是細胞培養中的一個主要問題，不止影響實驗結果...

用qPCR法進行宿主細胞DNA殘留檢測時，哪些因素會對檢測結果的準確性和方法靈敏度存在較大影響？樣品核酸提取純化過程雜質干擾的去除對qPCR法宿主細胞殘留DNA檢測結果有著較大影響。樣品核酸提取純化操作步驟對DNA檢測結果的準確度影響較大，通常采用加樣回收試驗...

磁珠法核酸提取常見問題之磁珠殘留：導致磁珠殘留的可能原因：①磁珠原因：所使用的磁珠的粒徑過小、磁珠表面基團松散、磁珠的磁含量低；②自動化核酸提取設備原因：自動化核酸提取設備的磁分離方式設計有問題、設備的磁場弱；③操作原因：使用自動化設備進行核酸提取時所用的參數...

磁珠法核酸提取過程中的常見誤區--某一種磁珠好，就應該在所有試劑配方中使用效果都好磁珠的種類是多種多樣的，粒徑大小不同，分散性不同，磁響應時間不同，包被基礎基質不同，外層修飾官能團不同，包被密度不同，官能團臂長不同，會導致磁珠特性千差萬別。所以不同磁珠所適應的...

在進行支原體檢測之前，進行支原體核酸提取的目的是為了從樣品中純化和富集支原體的DNA，以便進行后續的檢測和分析。以下是進行支原體DNA提取的主要原因和目的：分離支原體DNA：樣品中可能存在多種細菌、***和病毒等其他生物體的DNA。通過提取支原體DNA，...

日本藥典JPXVⅢ〈G3-14-170〉對NAT法支原體檢測產品有關性能驗證的要求，包括檢測限（LOD）、專屬性、耐用性、可比性。其中對于耐用性的描述及要求如下：分析過程的耐用性是指方法參數有小的變動時，測定結果不受其影響的能力，同時為在正常使用中表明其可靠性...

CHO宿主細胞殘留DNA檢測產品廣泛應用于生物制藥行業中的質量控制和安全監測。其主要用途包括：①生物制品質量控制：通過檢測CHO細胞殘留DNA的存在和數量，可以評估生物制品的質量和純度，確保產品符合質量標準和法規要求。②安全性評估：CHO細胞殘留DNA可能攜帶...

宿主細胞殘留DNA是影響生物制品安全性的關鍵因素之一，它不僅會降低生物藥的有效性，還可能帶來傳染性或致瘤性等安全問題。因此建立合適的宿主細胞殘留DNA檢測方法有助于監測生產工藝，確保生物制品的安全性和質量。各國藥品監督管理機構對宿主細胞殘留DNA的殘留量有著嚴...

南京正揚生物科技有限公司自主研發生產的全自動核酸提取儀是針對生物制品核酸提取的技術平臺，內置專業優化的前處理程序，配套本公司的自動化前處理試劑盒和配套耗材，只需一鍵操作即可完成各類生物材料和制品中的宿主細胞、微生物、病毒因子等各類微量DNA/RNA的提取純化。...

磁珠法核酸提取過程中的常見誤區--洗滌次數越多，洗滌效果越好提取得到的核酸雜質過多時，使用者會考慮多進行幾次洗滌，以得到更為純凈的核酸。增加洗滌次數確實有利于提純核酸，但考慮到每次洗滌都會損失一定量的核酸，且增加了核酸斷裂水解的可能性，所以一般來說洗滌次數控制...

美國藥典（USP）對宿主細胞殘留DNA檢測的規定：美國食品藥品監督管理局(FDA)發布的指導原則中指出生物制品宿主細胞DNA殘余限度不得超過100pg/劑量，對于大劑量的如單克隆抗體的生物制品，根據其殘余DNA來源及給藥途徑，DNA殘留量可放寬至10ng/劑量...

宿主細胞殘留DNA檢測：《美國藥典》和《歐洲藥典》將高靈敏度、高特異性的qPCR法和非序列特異性的DNA結合蛋白法作為宿主細胞殘留DNA檢測的推薦方法；《中國藥典》則收錄了特異性高的定量熒光探針qPCR法和半定量的DNA探針雜交法以及非序列特異性的熒光染色法。...

磁珠法核酸提取常見問題之磁珠結塊：導致磁珠結塊的可能原因：①磁珠吸附了過多雜質，包括蛋白、脂質、多糖等；②磁珠粒徑太小；③洗滌完畢，乙醇干燥時間過長。④磁珠磁吸附時間過長；⑤操作中途含磁珠的樣品管離心速率過高、離心時間過長；磁珠結塊的解決辦法：①優化裂解液、結...