濟南熒光染料脂溶

所需的CY3-NHS酯的量取決于待標記蛋白的量，以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例：假設所需的標記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000)，用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯，得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL，詳細計算過程如下：1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150，000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg/μL=5.05μL(CY3-NHS酯)4.運行偶聯反應1)將室溫新鮮制備的10mg/mLCY3-NHS酯緩慢加入到0.5mL蛋白質樣品中于溶液中，輕輕搖動混勻，然后短暫離心，將樣品收集于反應管底部。請勿混勻，否則2)將反應管安置避光處，在接下來的間隔輕輕蛋白水解60分鐘。10-15分鐘，輕輕翻轉幾次以充分混合5.偶聯偶聯物以下方案是使用SepHadexG-25柱封閉染料-偶聯偶聯物的范例。1)根據制造說明準備SepHadexG-25柱。2)將反應混合物(來自“Runconjugationreaction”)加載到SepHadexG-25柱的頂部。3)一旦樣品在頂部樹脂表面下方運行，立即添加PBS(pH7.2-7.4)。4)向所需樣品添加更多PBS(pH7.2-7.4)即可完成柱密封。DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）和 DiR （深紅色熒光）對活細胞進行多色成像和流式分析。濟南熒光染料脂溶

1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備（1）配置DMSO或EtOH儲存液：儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5mM。注意：未使用的儲存液保存在-20°C，避免反復凍融。（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5μM的工作液。注意：工作液的**終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找比較好條件。

2.懸浮細胞染色（1）懸浮細胞密度為1×106/mL加入到工作液中。（2）在37℃培養細胞2～20分鐘，不同的細胞比較好培養時間不同。（3）染色細胞試管在1000～1500轉離心5分鐘。（4）傾倒上清液，再次緩慢加入預溫37℃的培養液。（5）重復（3），（4）步驟兩次以上。 安徽熒光染料DIR5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一種胺活性衍生物的熒光染料.

熒光標記技術是指運用熒光染料與待研究對象結合，利用它的熒光特性，提供待研究對象相關信息。熒光標記具有操作簡便、高穩定性、高靈敏度等優勢，使熒光染料在生命科學研究中應用，包括：標記活細胞或固定細胞中的蛋白質、多肽；作為功能性指示劑表征細胞健康狀況；設計各種熒光探針，尋找特定蛋白或藥物靶點。應用分類：多肽、蛋白、抗體標記：氨基標記、巰基標記、羧基標記；***成像：水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區/II區熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料，了解更多（包括但不限于）

蛋白熒光標記技術是目前**為常見的蛋白體外標記技術，利用級聯放大反應原理，將極度敏感性且易于檢測的熒光素通過某個基團吸附或共價結合后，標記到特異性抗原或抗體分子上，應用熒光顯微鏡觀察熒光標記物因增強放大效應而產生顏色、光譜等變化，以分析示蹤相應抗體或抗原性質與含量的方法。該技術在具有高度精確性的熒光顯微鏡下，借助高度靈敏性的熒光檢測，在各種生物過程中對目的蛋白進行可視化，從而通過抗原抗體高度特異性免疫定量表達或在細胞研究中定位。蛋白熒光標記已成為研究蛋白質互作、酶活性、***示蹤以及細胞分選重要工具。蛋白標記常用熒光染料隨著蛋白熒光標記技術不斷發展，各類熒光素廣泛應用于生物實驗中，目前常用標記蛋白/抗體的熒光素主要有BODIPY類、香豆素類、羅丹明類、近紅外類、NBD胺類以及菁染料等。南京星葉生物科技有限公司提供多種性價比高的各類活化熒光素，其熒光染料覆蓋波長范圍從350nm到790nm，例如Cy系列、SuperFluor系列（效果同AlexaFluor系列）等，用于標記抗體、多肽以及蛋白功能基團，繼而生成分子探針，通過熒光成像進行相應檢測。花青類熒光染料屬于共振染料，其特征在于具有離域電荷的氮原子（兩個氮原子）之間的聚甲炔染料。

CY5熒光染料是一種被廣泛應用于生物分子檢測和熒光成像等領域的高效、穩定的熒光標記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料，其*大發射波長為670nm，其標記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細胞儀，檢測通道一般是FL4通道。除流式細胞術外，Cy5同樣適用于傳統的熒光顯微鏡技術。需注意的是，Cy5與單核細胞和粒細胞的非特異性結合多，實驗結果容易出現假陽性。Cy5.5含有一個游離胺基,可與多種官能團共軛,包括NHS酯和環氧化合物。激發和發射的最大值分別為678nm和694nm。Cy5.5已應用于各種基于熒光的實驗中。Cy5.5是一種遠紅色(和近紅外)發射染料,是熒光測量的理想選擇。Cy5.5具有成本效益,且其標記化學操作簡單,適合于潛在的***藥物開發Cy5.5標記因子VIIa是用來想象**的。用這些靶向蛋白標記的Cy5.5在**異種移植物上特異定位至少14天,但未結合的Cy5.5不能定位于任何異種移植或***。這種**血管內皮細胞中抗組織因子的成像方法可用于檢測原發性**和轉移以及監測體內***反應[1]。pH/溫度敏感磁性納米凝膠結合Cy5.5標記乳鐵蛋白(Cy5.5-Lf-MPNA納米凝膠)是一種有前途的膠質瘤術前MRI和術中熒光成像的對比劑[2]FITC熒光染料標記方法。浙江微泡熒光染料

南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列（效果同Alexa Fluor 系列）。濟南熒光染料脂溶

南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料

多肽、蛋白、抗體標記：5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像：脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY5COOHCY5alkyneCY5hydrazideCY5ThiolCY7amineCY7maleimideCY7azideCY7COOHCY7alkyneCY7hydrazideCY7Thiol水溶性熒光染料Sulfo-Cyanine3NHSesterSulfo-Cyanine3amineSulfo-CY3azideSulfo-CY3carboxylicacidSulfo-CY3alkyneSulfo-CY3hydrazideSulfo-CY3ThiolSulfo-Cyanine5NHSesterSulfo-Cyanine5amineSulfo-CY5azideSulfo-CY5carboxylicacidSulfo-CY5alkyneSulfo-CY5hydrazideSulfo-CY5ThiolCY7NHSesterSulfo-Cyanine7NHSesterSulfo-Cyanine7amineSulfo-CY7azideSulfo-CY7carboxylicacidSulfo-CY7alkyneSulfo-CY7hydrazideSulfo-CY7Thiol近紅外I區/II區熒光染料ICG-NHSesterICG-amineICG-maleimideICG-azideICG-COOHICG-alkyneICG-hydrazideICG-ThiolICG-TzICG-DBCO 濟南熒光染料脂溶

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