免疫組化實驗所用的抗體
免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。
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免疫組化常用的染色方法
根據(jù)標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。 做免疫組化意味什么?河北組織免疫組化哪家好
免疫組化臨床應用中,可以對傳染性疾病診斷。應用抗病毒、細菌、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進行免疫組化染色,可以檢測和診斷許多傳染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細胞病毒(CMV)、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、細小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS)等等,由于免疫組化在傳染性疾病診斷中具有及時性、低風險性、高敏感性、特異性、有效性等特點,可以用于(1)用于人類新病原微生物的識別;(2)提供快速的形態(tài)學診斷,使嚴重傳染性疾病得以早期醫(yī)療;(3)在無法取得新鮮組織或尚無培養(yǎng)方法的情況下,提供診斷并對發(fā)病機制進行研究和認識。英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務,一站式醫(yī)學科研平臺。福建靠譜免疫組化多少錢免疫組化的那些小知識,都在這里!
免疫組化的顯色系統(tǒng)
免疫組化的顯色系統(tǒng)是將抗原-抗體反應轉化為可見信號的關鍵步驟。常用的免疫組化顯色系統(tǒng)有DAB(3,3'-二氨基聯(lián)苯胺)和AEC(3-氨基-9-乙基咔唑)。DAB顯色產(chǎn)生棕色沉淀,適用于光學顯微鏡觀察。AEC顯色產(chǎn)生紅色沉淀,適用于光學顯微鏡觀察,但不適合長期保存。此外,還有熒光顯色系統(tǒng),如FITC(異硫氰酸熒光素)和TRITC(四甲基羅丹明異硫氰酸酯),適用于熒光顯微鏡觀察。選擇合適的顯色系統(tǒng)需要考慮實驗目的和檢測設備。
醫(yī)療和預后有關的免疫組化。與醫(yī)療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預后,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價,表達指數(shù)越高,表明其增殖指數(shù)越活躍,惡性度增高,預后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、EGFR陽性者,淋巴結轉移率高,并與ji素受體的表達呈負相關。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療,并能判斷預后,ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化實驗原理,操作步驟盡在英瀚斯實驗外包。
免疫組化的抗體選擇
抗體是免疫組化實驗成功的關鍵因素之一。選擇合適的一抗需要考慮其特異性、靈敏度和適用性。特異性是指抗體只與目標蛋白結合,而不與其他蛋白發(fā)生交叉反應。靈敏度是指抗體能夠檢測低豐度的目標蛋白。適用性是指抗體適用于免疫組化實驗,而不是其他實驗(如Western blot)。此外,免疫組化實驗中還需要考慮抗體的宿主物種、克隆性和濃度。免疫組化二抗的選擇則需要考慮其與一抗的匹配性,以及是否帶有顯色或熒光標記。 在南京英瀚斯做的免疫組化,效果不錯!青海什么是免疫組化哪家好
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臨床應用中,藥物靶點免疫組化,英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務,一站式醫(yī)學科研平臺。免疫組化及分子病理學方法在疾病診斷中只只起輔助醫(yī)療的作用,而藥物病理學是用病理學的方法確定藥物醫(yī)療的靶點、評價藥物醫(yī)療的療效、預測藥物醫(yī)療的反應,因此藥物靶點免疫組化屬“單獨的診斷”。因此對于對照的設置、質(zhì)量的控制均需要更高的要求,如對試劑的要求,不同于一般的診斷試劑,應按對藥物管理的要求操作。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫(yī)生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物醫(yī)療的依據(jù)。河北組織免疫組化哪家好