PEIMAX——高產工業化轉染試劑-高度濃縮,可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產品,因其較高的轉染效果,已廣泛應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEIMAX,在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來,經過眾多業內人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO和Sf9系統中可獲得很高的轉染效率,在重組抗體和病毒載體生產中穩定性高,可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續的高基因表達細胞體系,實現從新藥研發到工業化生產的輕松過度。而且與大多數細胞轉染方案相比,使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本(部分案例可降低90%轉染成本)。更多PEI MAX相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!PEI轉染試劑在使用時出現沉淀的原因是什么?293細胞PEI轉染試劑作用原理
穩定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養基。若想咨詢更多關于PEI轉染試劑相關信息,歡迎咨詢上海曼博生物!MirusPEI轉染試劑品牌比較有人知道PEI轉染試劑的價格嗎?
線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優點:優越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質量控制每批次線性PEI轉染試劑均經過轉染測試。將eGFP表達質粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態的HEK-293細胞,轉染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,歡迎咨詢上海曼博生物。也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio
產品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性;3.含更長連續性乙烯亞胺片段,其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應用領域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉染試劑,適用于基礎學術研究和藥物研發早期階段,以固體粉末形式提供,需用戶自行配置(詳情見使用方法)。歡迎關注曼博生物公眾號:Mine-bioMAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉染試劑。
對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio,查看更多技術文章!PEI轉染試劑和脂質體轉染試劑的區別?江蘇PEI轉染試劑哪個品牌好
PEI轉染試劑是粉末的還是液體的?293細胞PEI轉染試劑作用原理
產品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產品。相比于PEI25K,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙酰化);2.鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性;3.含更長連續性乙烯亞胺片段,其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應用領域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉染試劑,適用于基礎學術研究和藥物研發早期階段,以固體粉末形式提供,需用戶自行配置(詳情見使用方法)。或者關注我們的公眾號:Mine-bio293細胞PEI轉染試劑作用原理