在該自適應光學雙光子熒光顯微鏡中,她們將空間光位相調制器光學共軛到顯微物鏡的后焦平面,通過位相調制器將入射光分成若干子區域,每一塊子區域的波前都可以被控制。同時,她們用數字微陣列光處理器,以不同的頻率同時調制其中一半子區域的入射光強度,以另一半子區域作為“參考波前”。來自所有子區域光束會在焦點處會聚干涉,通過監測焦點激發的雙光子信號隨時間的變化情況,并進行傅里葉變換分析,可以“分解”得到被調制的每一塊子區域的“光線”的貢獻信息,從而可以實現對一半子區域波前的并行測量。對另一半子區域重復這一測量過程,從而獲得整個入射波前的信息并進行校正。該方法耗時很短,通常約1~3分鐘左右即可完成像差的測量和校正,無需復雜的計算,適用于任何標記密度和標記類型的樣品。更重要的是,得到的像差校正圖案可以用于提高較大視場范圍內的成像質量。該方法無疑為在體研究小鼠大腦皮層深層區域的生物、醫學問題提供了可行性方案。雙光子顯微鏡明日之星--FemtoFiber ultra 920 。ultima雙光子顯微鏡廠家有哪些
后續實驗使用碘化丙啶(PI)來指示細胞在7、8、9和10分鐘的延時觀察后的損傷情況,來驗證該光學系統對活細胞長期觀察的適用性。在觀察期間,88個焦點以100毫秒的曝光時間,曝光間隔1s照射樣品,激發強度為3.21×104W/cm2,激發波長為525nm,使用前文提到的60×物鏡及1.0AU孔徑,圖5(a)-(d)為引入PI的成像圖,(e)-(h)為相應的相應襯度圖。改變激發條件為每照射500ms間隔5s,得到相應的(i)-(p)。由圖像可知,延時觀察小于8分鐘的情況下不造成可見細胞損傷,對于實際3D延時成像,由于焦平面是移動的,所以預期細胞存活時間會更長,可見這是一種在3D在體延時成像中具有很大優勢的成像方案。國內investigator雙光子顯微鏡成像原理是什么雙光子顯微鏡使用的是可見光或近紅外光作為光源。
在2020年12月22日,臨研所、病理科和科研處邀請北京大學王愛民副教授做了題目為“新一代微型雙光子顯微成像系統介紹及其在臨床醫療診斷”的學術報告。學術報告由臨研所醫學實驗研究平臺潘琳老師主持。王愛民,北京大學信息科學技術學院副教授,畢業于北京大學物理系,獲學士、碩士學位,后于英國巴斯大學物理系獲博士學位。該研究組研發的微型雙光子顯微鏡,第1次在國際上獲得了小鼠大腦神經元和神經突觸清晰穩定的動態信號,該成果獲得了2017年度“中國光學進展”和“中國科學進展”,并被Nature Methods評為2018年度“年度方法--無限制行為動物成像”。目前,該研究組正在研究新一代雙光子顯微成像技術在臨床診斷中的應用,為未來即時病理、離體組織檢測、術中診斷等提供新的影像手段和分析方法。
王愛民副教授結合工作實例,展示了雙光子顯微鏡的研發與應用。歷經3年多的協同奮戰,成功研制新一代高速分辨微型化雙光子熒光顯微鏡,重量只為2.2克,這一微型顯微鏡獲取了小鼠在自由行為過程中大腦神經元和神經突觸活動清晰、穩定的圖像,該顯微鏡適于佩戴在小動物頭部,可實時記錄數十個神經元、上千個神經突觸的動態信號,在大型動物上,還可望實現多探頭佩戴、多顱窗不同腦區的長時程觀測。雙光子顯微成像的在生物醫學研究和醫療領域應用有較大的應用前景,首先雙光子顯微鏡能夠進行細胞和組織結構成像,在亞微米級成像,此功能與目前市場上的共聚焦類顯微鏡性能類似;雙光子顯微成像能夠實時、在體、原位、無創地,根據不同物質組份的光譜特性,區分成像;雙光子顯微鏡能夠進行生化指標成像,在無造影劑的前提下,利用自發熒光、二次諧波、熒光獲得活細胞生化信息。雙光子顯微鏡能夠進行指標成像;
實驗從理論和實驗上評估了多焦點v2PE顯微鏡的空間分辨率,并與單光子熒光顯微鏡進行了對比,實驗中v2PE的激發波長為521 nm,使用放大倍率為100倍的物鏡,尺寸為0.6AU,對直徑100nm的熒光顆粒進行了測試性成像,共獲得40幅不同采樣深度的圖像合成為三維圖像。圖像在橫向和縱向的半高全寬分別是177 nm和297 nm,這些值接近顯微鏡的理論分辨率。后續還利用軟件模擬從理論上研究了多焦點v2PE顯微技術的空間分辨率,模擬計算顯示v2PE點擴散函數(PSF)的橫向半高寬與單光子激發熒光(1PE)相似,軸向的半高寬較1PE減少,可以提高空間分辨率。雙光子顯微鏡可以精確穿透較厚標本進行定點、有生命體的觀察!美國ultima2PPLUS雙光子顯微鏡熒光探測
雙光子顯微鏡有這么多優點,那么雙光子顯微鏡有哪些應用呢?ultima雙光子顯微鏡廠家有哪些
是專業制造nVista,nVoke,3D bioplotte,invivo公司,目前儀器儀表行業內有較大成績的制造商,在國內有多家銷售和服務型代理商。在nVista,nVoke,3D bioplotte,invivo行業內聞名,如今還提供生物科技,醫藥科技領域內的技術開發、技術咨詢、技術服務、技術轉讓,實驗室設備、儀器儀表、醫療器械、計算機、軟件及輔助設備銷售,計算機數據處理,貨物及技術進出口業務。 成像平臺: 1. Inscopix自由活動超微顯微成像系統 2. DiveScope多通道內窺鏡系統 3. 雙光子顯微鏡 動物行為學平臺: 1. PiezoSleep無創睡眠檢測系統 2. 自身給藥、條件恐懼、斯金納、睡眠剝奪、跑步機、各類經典迷宮等 神經電生理: 1.NeuroNexus神經電極 2.多通道電生理信號采集系統 3.膜片鉗系統 4.AO功能神經外科臨床電生理平臺 顯微細胞: 1. UnipicK單細胞挑選及顯微切割系統 科研/臨床級3D打印 1. 德國envisionTEC 3D Bioplotter生物打印機 2. 韓國Invivo醫療級生物打印機等。等領域內的業務。nVista,nVoke,3D bioplotte,invivo可分為通用型和專業型,通用型儀表主要包括工業自動控制系統裝置制造、電工儀器儀表、繪圖、計算及測量儀器、實驗分析儀器、試驗機制造、供應用儀器儀表、其他通用儀器;其次,我國的新型工業化進程,帶動了各個工業領域對自動化的需求,從而也帶來了儀器儀表產業的繁榮。我國對于各大行業落實節能減排指標、關停落后產能等一系列強制性措施都在一定程度上擴大了儀器儀表行業的市場規模。經濟的快速發展推動了我國儀器儀表市場的持續增長,很多第三方檢測機構都面臨著實驗室擴增、新建實驗室和老舊儀器淘汰問題。通過靈活應對現金流的問題,做到平衡資金和發展以取得更高的企業競爭優勢。ultima雙光子顯微鏡廠家有哪些
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