培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。平板培養基要除去冷凝水,否則將影響平板分離培養效果。廣西培養基制備器價格
制備培養基有什么要求:1、培養基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質而影響透明度。2、盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質玻璃容器為好。3、培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養價值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質的培養基如糖類、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。內蒙古培養基制備器售后培養基制備器都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預設的。
培養基配制:素:為防止培養時期細菌的污染,可在培養基中添加適當素,一般用量與組織細胞培養相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的細胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細胞,但在離體培養過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖,蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質起凝集作用。PHA的細胞數隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細胞均被為止,但PHA濃度過高會引起凝集,一般采用4%濃度為好。
過濾:配成的培養基,若無特殊要求,可省略此步。若有沉淀或渾濁,需要澄清的,液體培養基可用濾紙過濾。而固體培養基可用中間夾一薄層脫脂棉的雙層紗布過濾。如果過濾法還不能達到澄清的要求,則可用蛋清澄清法,即培養基加熱冷卻到50℃~60℃,裝入三角瓶內(不超過容量的二分之一),按1000ml加入1個~2個雞蛋的蛋清,用力搖晃3min~5min,高壓蒸汽滅菌121℃、20min,取出趁熱過濾即可。擺斜面:裝在試管中的瓊脂培養基,在滅菌完成后,趁熱立即擺放在木棒(或玻璃棒)上,并完成適時地斜度,冷卻后,瓊脂凝固即成斜面。斜面長度不要超過試管的二分之一。制備培養基的操作要點:成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,。
培養基制備程序:全自動培養基制備器可以快速的準備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導),加入培養基原料,準備啟動滅菌程序。培養基可以直接在培養基制備器內懸浮溶解。強力磁力攪拌培養基在內腔里混合的均勻性得到確保,并避免凝結。培養基還可以選擇使用水浴模式預先溶解。沒有經過專門培訓的人員由于直觀的圖形化界面也能夠簡單的進行操作。用戶對于多達50個滅菌參數可以自定義設置,它們可以被儲存起來并隨時調用。分裝瓊脂斜面培養基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。新疆培養基制備器哪家好
培養基通常采用高壓蒸汽滅菌。廣西培養基制備器價格
根據培養基的物理狀態來區分,可以分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。1)液體培養基所配制的培養基是液態的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養基營養成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態。2)固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。3)半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。廣西培養基制備器價格