1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備（1）配置DMSO或EtOH儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5mM。注意：未使用的儲(chǔ)存液保存在-20°C，避免反復(fù)凍融。（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為1～5μM的工作液。注意：工作液的**終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來(lái)配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找比較好條件。 2.懸浮細(xì)胞染色（1）懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。（2）在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2～20分鐘，不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。（3）染色細(xì)胞試管在1000～1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。...

DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度**增強(qiáng)，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色，這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散，比較好濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯：DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）和 DiR （深紅色熒光）這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā)，有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)，在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 D...

DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度**增強(qiáng)，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色，這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散，比較好濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯：DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）和 DiR （深紅色熒光）這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā)，有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)，在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 D...

與花青和羅丹明染料一樣，熒光素也是一種有機(jī)染料。熒光素的比較大吸收波長(zhǎng)為494nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)為521nm（通常吸收藍(lán)色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光），熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測(cè)到它，并且在與抗體結(jié)合時(shí)用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣，熒光素價(jià)格低廉且易于使用，使其成為生物學(xué)研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同，熒光素在水溶液中是無(wú)毒的。因此，它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)...

FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點(diǎn):活性熒光染料，如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料，可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團(tuán)，生成分子探針，并通過(guò)熒光成像進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化生物分子時(shí)，它們成為用于檢測(cè)靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針，用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。由于熒光標(biāo)記物具有無(wú)放射物污染、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，在蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。 南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列（效果同Alexa Fl...

Cy7DiC18（DiR）是一個(gè)親脂性、近紅外熒光花青染料。這個(gè)染料常用于標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)膜。Cy7DiC18（DiR）的兩個(gè)18-碳鏈插入到細(xì)胞膜，從而進(jìn)行特定的、穩(wěn)定的細(xì)胞染色，幾乎不會(huì)發(fā)生細(xì)胞間的染料轉(zhuǎn)移。Cy7DiC18（DiR）（近紅外熒光）和其他細(xì)胞膜熒光染料如DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）配合使用，為多色成像和流式細(xì)胞分析提供了有效的工具。Cy7DiC18（DiR）染色后可進(jìn)行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他試劑）的固定，但不建議在染色后進(jìn)行透化的過(guò)程。此外，在固定透化（室溫下用0.1%TritonX-100透化）后，也可以很好地進(jìn)行質(zhì)膜染色。 1、C...

異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機(jī)熒光染料，目前，這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。在495/517nm處，該染料會(huì)產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值，并可借助異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)與不同抗體結(jié)合，該基團(tuán)可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團(tuán)相結(jié)合。而它的基本成分——熒光素，其摩爾質(zhì)量為332g/mol，常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料，且其被當(dāng)成AlexaFluor?488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng)，而該系統(tǒng)受藍(lán)色光譜中的光所激發(fā)。經(jīng)常與FITC同時(shí)使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-...

如何選擇的染料？ 考慮到熒光染料種類繁多，您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料？以下是您需要考慮的一些因素。※與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性：雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性，但每種染料都是***的，并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功，請(qǐng)選擇與您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相輔相成的一種。與設(shè)備的兼容性：選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時(shí)，請(qǐng)考慮儀器的靈敏度、動(dòng)態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果，請(qǐng)確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測(cè)方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性：在雙重或三重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中，您選擇的染料的發(fā)射和激...

藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復(fù)合物，屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到，它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學(xué)中，熒光團(tuán)可以與蛋白質(zhì)結(jié)合，例如用于抗原檢測(cè)的抗體等，因?yàn)樗軌虬l(fā)出明亮的熒光。由于熒光團(tuán)往往會(huì)很快發(fā)生光漂白，因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經(jīng)常用于流式細(xì)胞術(shù)?！鶆e藻藍(lán)蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣，別藻藍(lán)蛋白也屬于藻膽蛋白家族，是從紅藻中分離出來(lái)的。在594和633nm的激光線激發(fā)下，熒光團(tuán)的比較大吸光度在650nm處，而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比，熒光團(tuán)的靈敏度已顯示高5至10倍，并具有許多其他有益特性，包括大斯托克斯位移、高水溶性、長(zhǎng)波長(zhǎng)...

5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料，具有廣泛的應(yīng)用，作為抗體和其他探針標(biāo)記，用熒光顯微鏡，流式細(xì)胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實(shí)驗(yàn)。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性，是流式細(xì)胞儀和免疫熒光中生物檢測(cè)**常用的熒光標(biāo)記之一。**常用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)（特別是抗體）的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)]，5-FITC和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素（5-FAM和5(6)-FAM）。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物，以及一系列具有針對(duì)細(xì)胞標(biāo)記...

熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外，目標(biāo)蛋白還可以通過(guò)熒光染料標(biāo)記直接進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)操作，如***跟蹤、細(xì)胞分選等。 FITC熒光標(biāo)記的原理是什么？ 熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。當(dāng)受到紫外線或藍(lán)紫光的照射時(shí)，它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當(dāng)激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時(shí)，它會(huì)發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光材料的共價(jià)結(jié)合在目標(biāo)分子的基團(tuán)上，利用其熒光特性提供研究對(duì)象的信息。 羰花青染料用作 Di 來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。黑龍江鄭州熒光染料三、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)D-熒光素鉀鹽...

5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料，具有廣泛的應(yīng)用，作為抗體和其他探針標(biāo)記，用熒光顯微鏡，流式細(xì)胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實(shí)驗(yàn)。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性，是流式細(xì)胞儀和免疫熒光中生物檢測(cè)**常用的熒光標(biāo)記之一。**常用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)（特別是抗體）的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)]，5-FITC和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素（5-FAM和5(6)-FAM）。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物，以及一系列具有針對(duì)細(xì)胞標(biāo)記...

管可用于實(shí)驗(yàn)室的熒光團(tuán)數(shù)量眾多，但這些染料通常屬于以下三組之一：熒光染料:這些是用于在體外標(biāo)記生物相關(guān)分子的小型有機(jī)天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì)，由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點(diǎn):這些高熒光合成納米晶體由半導(dǎo)體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應(yīng)用和該領(lǐng)域的顯著進(jìn)步，已經(jīng)針對(duì)特定應(yīng)用和儀器開(kāi)發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣，多年來(lái)，大量復(fù)雜的熒光技術(shù)（例如，F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS）也在不斷發(fā)展。小動(dòng)物成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù)可以在小動(dòng)...

羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比，羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作：分子開(kāi)關(guān)，病毒表面修飾，化學(xué)傳感器，硫醇。不同類型的染料通過(guò)它們各自的取代基（R1、R2、R3、R4和G）來(lái)區(qū)分。由于它們的差異，這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性（例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值）。氨基被剛性化的羅丹明染料無(wú)論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率，而在每個(gè)氮處具有兩個(gè)烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...

為什么要使用熒光染料？雖然不同的染色技術(shù)（即考馬斯染色、銀染色、熒光染色）可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì)，但使用熒光染料具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。他們提供：高靈敏度：對(duì)于大多數(shù)分析物，熒光測(cè)量的靈敏度比吸光度測(cè)量高1000倍，即使在使用小樣本時(shí)也可以令人滿意地達(dá)到ppt（萬(wàn)億分之一）的檢測(cè)限。寬線性動(dòng)態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾：由于吸收光的材料數(shù)量眾多，分光光度測(cè)量通常會(huì)遇到干擾問(wèn)題。在進(jìn)行熒光測(cè)量時(shí)不會(huì)遇到這個(gè)問(wèn)題，因?yàn)橹挥猩贁?shù)材料具有熒光能力。高通量：熒光測(cè)量具有簡(jiǎn)單而強(qiáng)大的協(xié)議，并且可以自動(dòng)化用于高通量應(yīng)用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。遼寧熒光染料Fluor 5...

熒光染料，由于靈敏度高，操作方便，逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記，其廣泛應(yīng)用于熒光免疫，熒光探針，細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色，用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑，可作為背景對(duì)照，標(biāo)記細(xì)胞核使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。熒光標(biāo)記的單克隆抗體技術(shù)為流式細(xì)胞儀在研究細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領(lǐng)域擴(kuò)展了無(wú)限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過(guò)蛋白質(zhì)交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合在單克隆抗體上。免疫熒光標(biāo)記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFl...

羰花青染料***用作Di來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長(zhǎng)鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR，以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們?cè)谥|(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們?cè)谑覝叵率怯蜖钗?，在水中發(fā)出微弱熒光，但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時(shí)，它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞，這些染料就會(huì)在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散，導(dǎo)致...

南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記：5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像：脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY...

羰花青染料***用作Di來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長(zhǎng)鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR，以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們?cè)谥|(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們?cè)谑覝叵率怯蜖钗铮谒邪l(fā)出微弱熒光，但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時(shí)，它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞，這些染料就會(huì)在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散，導(dǎo)致...

綠色熒光染料ICG的主要作用吲哚菁綠（IndocyanineGreen，簡(jiǎn)稱ICG）是一種廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物領(lǐng)域的熒光染料。它具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，因此被***用于熒光顯像、光熱***、生物識(shí)別和藥物輸送等領(lǐng)域。吲哚菁綠的綠色溶解度是其在水中的溶解度，它是衡量該染料在溶液中的溶解能力的重要指標(biāo)。吲哚菁綠具有較好的水溶性，可以在水中迅速溶解，形成穩(wěn)定的溶液。這一特性使得吲哚菁綠在醫(yī)學(xué)診斷和***中得到廣泛應(yīng)用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫(yī)學(xué)影像學(xué)中作為造影劑。由于其具有強(qiáng)烈的熒光特性，能夠在近紅外光譜范圍內(nèi)吸收和發(fā)射光線，因此被***用于近紅外熒光顯像技術(shù)中。在臨床中，醫(yī)生可以通過(guò)注射吲哚...

SuperFluor活化酯（與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同）SuperFlour系列熒光探針，具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，更廣的pH應(yīng)用范圍（pH4～10）,更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1．標(biāo)記效率低——計(jì)算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)少于4mol有以下原因：1）緩沖液中含有痕量伯銨成分，與染料反應(yīng)降低了標(biāo)記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液（如Tris或氨基乙酸），標(biāo)記前用PBS透析。2）蛋白含量較低(≤1mg/mL)會(huì)影響標(biāo)記效率。3）標(biāo)記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的...

小動(dòng)物***熒光成像技術(shù)是現(xiàn)***物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù)，因其具有操作簡(jiǎn)單、實(shí)時(shí)直觀、靈敏度高、實(shí)驗(yàn)成本低等特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開(kāi)發(fā)等方面。納米材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，旨在解決傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)面臨的各種醫(yī)學(xué)挑戰(zhàn)，包括生物利用度差，靶向特異性受損，全身和***毒性等。納米材料具有很多與眾不同的優(yōu)點(diǎn)，比如多功能性、大的負(fù)載量、靶向性、血液循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)等。納米材料在生物醫(yī)學(xué)中起著關(guān)鍵作用，可以有效攜帶成像探針、***劑或生物材料并傳遞至靶點(diǎn)，如特定的***、組織甚至細(xì)胞。光學(xué)成像主要包括生物發(fā)光（ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ，ＢＬＩ）和焚光成像（...

如何選擇的染料？ 考慮到熒光染料種類繁多，您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料？以下是您需要考慮的一些因素?！c實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性：雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性，但每種染料都是***的，并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功，請(qǐng)選擇與您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相輔相成的一種。與設(shè)備的兼容性：選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時(shí)，請(qǐng)考慮儀器的靈敏度、動(dòng)態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果，請(qǐng)確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測(cè)方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性：在雙重或三重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中，您選擇的染料的發(fā)射和激...

為什么要使用熒光染料？雖然不同的染色技術(shù)（即考馬斯染色、銀染色、熒光染色）可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì)，但使用熒光染料具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。他們提供：高靈敏度：對(duì)于大多數(shù)分析物，熒光測(cè)量的靈敏度比吸光度測(cè)量高1000倍，即使在使用小樣本時(shí)也可以令人滿意地達(dá)到ppt（萬(wàn)億分之一）的檢測(cè)限。寬線性動(dòng)態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾：由于吸收光的材料數(shù)量眾多，分光光度測(cè)量通常會(huì)遇到干擾問(wèn)題。在進(jìn)行熒光測(cè)量時(shí)不會(huì)遇到這個(gè)問(wèn)題，因?yàn)橹挥猩贁?shù)材料具有熒光能力。高通量：熒光測(cè)量具有簡(jiǎn)單而強(qiáng)大的協(xié)議，并且可以自動(dòng)化用于高通量應(yīng)用。D-熒光素鉀鹽小動(dòng)物成像。黑龍江熒光染料熒光素鉀鹽異硫氰酸熒光素（fluor...

三、流式細(xì)胞儀分析1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，接種到孔板，過(guò)夜培養(yǎng)。2、如果要進(jìn)行藥物刺激，在細(xì)胞中加入感興趣的藥物進(jìn)行干預(yù)，繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間后，收集細(xì)胞，PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重懸細(xì)胞，37℃避光孵育15min或更長(zhǎng)時(shí)間。【注意】：由于細(xì)胞種類和實(shí)驗(yàn)體系不同，Rhodamine123工作液濃度和孵育時(shí)間可以根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)或參考文獻(xiàn)自行調(diào)整。4、用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。 四、實(shí)驗(yàn)案例1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期A549細(xì)胞接于六孔板（1*106+2mlDMEM培養(yǎng)基）,37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-24h待其貼壁，以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作.2、棄掉培養(yǎng)液，PBS洗滌兩次.3、用培養(yǎng)基（無(wú)血清）稀...

其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用，除細(xì)胞膜研究外，我們經(jīng)常也會(huì)對(duì)一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索，例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等，而對(duì)于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液（DAPIStainingSolution）常用于細(xì)胞核染色，可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是細(xì)胞骨架的染色神器，羅丹明標(biāo)記的Phalloidin（TRITC-Phalloidin）可將細(xì)胞染成橙紅色，DAPI與Phalloidin染色液是研究細(xì)胞形態(tài)變化時(shí)經(jīng)常用到的兩種共染的試劑，染色效果可見(jiàn)A1-E1用TRIT...

熒光染料，由于靈敏度高，操作方便，逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記，其廣泛應(yīng)用于熒光免疫，熒光探針，細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色，用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑，可作為背景對(duì)照，標(biāo)記細(xì)胞核使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。熒光標(biāo)記的單克隆抗體技術(shù)為流式細(xì)胞儀在研究細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領(lǐng)域擴(kuò)展了無(wú)限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過(guò)蛋白質(zhì)交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合在單克隆抗體上。免疫熒光標(biāo)記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFl...

細(xì)胞培養(yǎng)后，需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜，若不借助適當(dāng)?shù)氖侄?，難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu)，更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前，已有多種研究細(xì)胞的技術(shù)，從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡，從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段，然而，對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō)，想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見(jiàn)的問(wèn)題。 細(xì)胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見(jiàn)的細(xì)胞膜染料（見(jiàn)表2），它們是一族親脂性的熒光染料，用于細(xì)胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。該系列染料進(jìn)入細(xì)胞膜后，會(huì)在整個(gè)...

熒光標(biāo)記技術(shù)是指運(yùn)用熒光染料與待研究對(duì)象結(jié)合，利用它的熒光特性，提供待研究對(duì)象相關(guān)信息。熒光標(biāo)記具有操作簡(jiǎn)便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢(shì)，使熒光染料在生命科學(xué)研究中應(yīng)用，包括：標(biāo)記活細(xì)胞或固定細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、多肽；作為功能性指示劑表征細(xì)胞健康狀況；設(shè)計(jì)各種熒光探針，尋找特定蛋白或藥物靶點(diǎn)。應(yīng)用分類：多肽、蛋白、抗體標(biāo)記：氨基標(biāo)記、巰基標(biāo)記、羧基標(biāo)記；***成像：水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料，了解更多（包括但不限于） DiR的紅外熒光可以穿透細(xì)胞和組織，在小動(dòng)物成像中用來(lái)示蹤。中國(guó)香港大連熒光染料一、體外生物發(fā)光試驗(yàn)熒...

在1990年代***使用的綠色熒光蛋白（從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍(lán)蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等）是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團(tuán)。雖然熒光團(tuán)可用于在細(xì)胞、細(xì)菌和各種***中表達(dá)質(zhì)粒，但它們的使用有一些缺點(diǎn)，即它可能很耗時(shí)，并且在融合時(shí)還能夠改變某些細(xì)胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外，與許多其他熒光團(tuán)相比，生物熒光團(tuán)的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團(tuán)之一，由238個(gè)氨基酸組成，其中三個(gè)負(fù)責(zé)發(fā)出可見(jiàn)綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中，熒光團(tuán)與水母發(fā)光蛋白（一種蛋白質(zhì)）相互作用，當(dāng)添加鈣時(shí)會(huì)發(fā)出藍(lán)光。通過(guò)DNA重組，研究人員可以使用負(fù)責(zé)...