中國臺灣南京熒光染料

來源: 發布時間:2024-06-03

所需的CY3-NHS酯的量取決于待標記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設所需的標記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL,詳細計算過程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg/μL=5.05μL(CY3-NHS酯)4.運行偶聯反應1)將室溫新鮮制備的10mg/mLCY3-NHS酯緩慢加入到0.5mL蛋白質樣品中于溶液中,輕輕搖動混勻,然后短暫離心,將樣品收集于反應管底部。請勿混勻,否則2)將反應管安置避光處,在接下來的間隔輕輕蛋白水解60分鐘。10-15分鐘,輕輕翻轉幾次以充分混合5.偶聯偶聯物以下方案是使用SepHadexG-25柱封閉染料-偶聯偶聯物的范例。1)根據制造說明準備SepHadexG-25柱。2)將反應混合物(來自“Runconjugationreaction”)加載到SepHadexG-25柱的頂部。3)一旦樣品在頂部樹脂表面下方運行,立即添加PBS(pH7.2-7.4)。4)向所需樣品添加更多PBS(pH7.2-7.4)即可完成柱密封。羅丹明123一種可對活細胞線粒體染色的細胞染色試劑。中國臺灣南京熒光染料

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注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定比較高信號檢測時間和信號平臺期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復凍融。如果有條件,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),穩定性和保存時間更長。 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定比較好信號平臺期和比較好的檢測時間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發表的文獻來看,鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽,尤其是體內實驗。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。免疫組化熒光染料APC吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應用。

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FITC熒光標記蛋白的應用及特點:活性熒光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于標記抗體或蛋白質功能基團,生成分子探針,并通過熒光成像進行檢測。當用熒光染料化學標記特異性抗體或其他純化生物分子時,它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針,用于細胞成像、流式細胞手術、蛋白質痕跡和酶聯免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標記物具有無放射物污染、操作簡單等優點,在蛋白質功能研究、藥物篩選等許多研究領域得到了越來越廣泛的應用。

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且Super Fluor活化酯(與Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同)

在熒光顯微術中,不僅蛋白質結構感興趣,而且對核酸也感興趣。有時有必要通過檢測細胞核來確定細胞的確切位置或數量。最常見的DNA染色劑之一是DAPI(4',6-二氨基-2-苯基吲哚),主要與DNA雙螺旋富含A-T的區域結合。與未結合態相比,DAPI在DNA上的熒光強度增加。染料被UV(紫外線)光激發,比較大激發波長為358nm。發射光譜較寬,峰值在461nm。弱熒光也可以檢測到RNA結合。在這種情況下,發射轉移到500nm。有趣的是,DAPI能夠滲透完整的細胞膜。因此,該染料既可用于固定細胞也可用于活細胞。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。

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一、體外生物發光試驗熒光素試劑的制備:D-熒光素,鉀鹽,無菌純水,完全培養基(自行配置)1、用無菌水制備100X熒光素原液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動至熒光素完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin,potassiumsalt溶解于預熱好的組織培養基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養基1∶100稀釋儲存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養細胞的培養基圖像分析前,向細胞培養板中添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析-注射器濾膜過濾除菌,0.2μm注:成像前在37℃下對細胞進行短時間孵育可增強信號。熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其應用于熒光探針,細胞染色等。新疆熒光染料Fluor 680

D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化螢火蟲產生典型的黃綠色光。中國臺灣南京熒光染料

熒光染料在細胞實驗中具有廣泛的應用1、細胞膜標記:可以使用熒光染料標記細胞膜,以觀察和研究細胞膜的動態和結構變化。2、染色體和DNA標記:用熒光染料標記染色體或DNA,可以觀察和分析DNA復制、轉錄、修復等過程3、蛋白質標記:通過熒光染料標記蛋白質,可以研究蛋白質的相互作用、定位和運動等特性。4、細胞器標記:使用特定波長的熒光染料可以標記和可視化細胞中的線粒體、溶酶體等細胞器。5、神經科學應用:熒光染料在神經科學中也有廣泛應用,如標記神經元和突觸,觀察神經信號的傳遞等。6、基因表達分析:通過熒光染料標記基因表達產物,可以定量分析基因的表達水平和細胞中的分布情況。中國臺灣南京熒光染料

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