CASA,即計算機輔助精子分析,是一種利用技術手段對精子活力、濃度和形態進行精確評估的方法。WHO第五版指南強調,相比人工檢測,CASA提供更準確的數據和精子動力學參數,如前向運動和超活化運動,以及獲能精子特征參數。研究顯示,CASA檢測的精子參數與體內外受精成功率和受孕時間有***關聯。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學分析。但要確??煽拷Y果,操作者需注意標本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內已有自主研發的精子分析儀,通常進行兩次分析,每次至少200個精子,結果通過統計學分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數板的精確性和計數一致性是關鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性。通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算,從而得出精子動靜態各項參數。廣州牛精子分析VAP
精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術與顯微鏡結合,**標本液化后吸入計數,通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統獲取精子動、靜態圖像后輸入計算機。根據設定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數,對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態分析,由計算機處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測[1]。優點:操作簡便,用量少,檢測速度快,重復性優于人工檢測,并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運動狀態的多種參數等。缺點:影響分析結果的因素較多,除**本身性質所含的固有誤差外,不同的精子計數池的相對準確性和精確性可產生明顯不一致的效果。南京兔子精子分析LINCASA系統通過計算機分析精子運動參數,能夠提供精確的量化數據,優于人工檢測方法。
人類精子冷凍保存和儲存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內容,更具可操作性。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲存;對使用的材料和留存標本建立定期核驗程序;所有儲罐都應有液位監控報警系統,以監測溫度和液氮液位,傳感器應連接警報器,可通過實驗室人員的終端進行提醒。新證據表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,也可以使用封閉系統,不需要無菌的液氮。
1.基本檢查:是確定精液變量穩定的常規方法,不僅是男科實驗室,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數板的方法,但計數的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數據表明,鑒別快速前向運動精子非常重要。因此,關于精子活力分級,第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調,精子形態學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結局的預后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?!毙螒B率的判斷,則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數20%的精液,應單獨計算并在報告中注明;精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率。
精子分析儀是計算機技術和圖像處理技術結合的**分析儀器設備,通過顯微鏡下攝像和計算機快速分析多個視野內精子的運行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項參數。計算機輔助**分析儀由硬件系統和軟件系統組成。硬件系統主要由顯微攝像系統、圖像采集系統、恒溫系統、計算機處理系統等四大系統構成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統:由顯微鏡及CCD組成??梢詫吮拘盘柾ㄟ^顯微放大由CCD傳輸到計算機2.圖像采集系統:由圖像卡構成,其功能是對CCD信號進行抓拍、識別、預處理后,將成熟信號輸送到計算機。3.恒溫系統:由加溫和保溫設備組成。加溫是通過熱吹風機不斷將適宜的溫度熱風鼓入封閉保溫罩內,提供穩定、可靠的檢查環境。4.計算機系統:對圖像信號進行***系統的加工處理,對獲得的數據進行輸出和存儲的設備。軟件系統采用**的精子質量分析軟件,利用現代化的計算機識別技術和圖像處理技術,對精子的動靜態特征進行***的量化分析,對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特征進行量的檢測分析精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優點。廣州快速運動精子分析
精子分析系統較傳統的分析法比較,具有速度快、量比性好、準確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據。廣州牛精子分析VAP
精液顯微鏡檢查精子計數:正常人精子計數為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當于一次排出的精子總數為400×106~600×106。當精子計數值<20×106/ml或一次排精總數<100×106為精子減少,超過致孕極限而導致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導致少精或無精的重要原因,也是導致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結扎術的效果觀察。結扎六周后,連續檢查無精子,說明手術成功,如果結扎兩個月后,精液中仍有精子,說明手術不成功。廣州牛精子分析VAP