血漿外泌體蛋白質組學

人體內多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體，包括干細胞、免疫細胞、內皮細胞、血小板及平滑肌細胞等。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中。雙層膜保護外泌體的內容物，使外泌體能夠在組織中長距離移動。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用，有望成為“無細胞的細胞治理”工具。干細胞來源的外泌體可通過囊泡，將干細胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質等生物活性物質，打包運出干細胞體外。通過“細胞間高速公路”來“快遞”到人體各個組織內。高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α，可使類風濕關節炎惡化。血漿外泌體蛋白質組學

外泌體能攜帶多種生物活性分子循環于血液／體液中并介導長距離的細胞間通訊，中流來源外泌體富含的蛋白質、核苷酸、脂質等分子能夠反映其來源細胞的生理及病理狀態，外泌體特殊的脂質雙分子層結構能保護其內RNA等分子免于降解，因此，檢測中流外泌體成為液體活檢一個明顯優勢。臨床試驗研究表明，外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預后監測等方面都具備較好的應用價值，正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術的進步，組學時代的到來，大規模蛋白質組學已經被聯合應用于篩選和揭示多種ai癥細胞外囊泡的標志物。江蘇外泌體label free不同肝臟疾病中，細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。

外泌體mirRNA和蛋白質被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發現，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發現，NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統分析了28位NSCLC患者體內的365種miRNA，其中let-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調，進一步研究發現，let-7f和miR-30e-3p水平可以區分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關。

臨床上，干細胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍、再生健康皮膚。在護膚方面，主要是對外傷受損、衰老進行修復，比較全的調理皮膚、改善膚質，令肌膚恢復年輕、健康的狀態。干細胞外泌體可以再生皮膚和強化皮膚屏障，具有比較好的再生效果，且沒有其它副作用。干細胞外泌體或將成為治、特異性皮炎等寬泛炎癥性皮膚疾病的一種有效且安全可靠的治理方法。如今，干細胞外泌體已在幾種不同類型的疾病中顯示出令人鼓舞的治理效果，包括腎損傷、心臟損傷、腦損傷和肝肺損傷等。主要機制可能是外泌體介導了MSC的旁分泌/自分泌機制。實際上，用PS親和法提取的人白血病細胞釋放的外泌體。

Vlassov等人發表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻中介紹，通過終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后，10000xg離心1h，可將直徑在30-150nm之間，且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體，為了進一步純化胎盤相關外泌體，將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后，加入非線性蔗糖密度梯度層，10000xg超速離心5h，將分層液采用PEG6000進行2次沉淀。經過多次實驗反復驗證，確定同時表達外泌體標志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來源外泌體所在密度層。超速離心是從生物體液或細胞上清分離外泌體的金標準方法。植物外泌體提取試劑盒價格

抗體親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體，但不能提取完整外泌體。血漿外泌體蛋白質組學

外泌體的提取方法：超速離心法，這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多，但是純度不足，電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡而不是外泌體。過濾離心法，這種操作簡單、省時，不會影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期的準備工作繁雜，比較耗時，量少。血漿外泌體蛋白質組學