胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內的瓶中。采的血瓶采的血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。莆田優(yōu)等血清哪里有賣
如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術指標,1、內的毒性,標準為不高于5EU/ml。內的毒性是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內的毒性含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍。可見,內的毒性含量偏高不影響質量,除非含量極高,預示著已經污染。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。上海優(yōu)等胎牛血清銷售公司胎牛血清參與細胞培養(yǎng),是細胞生長天然的培養(yǎng)基。
如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?未拆封的血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,在產品規(guī)定的效期內均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內,再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。完全溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
胎牛血清:胎牛血清初次解凍后,應按單次習慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應在一周內用完。為保證細胞培養(yǎng)的較佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應于一周內用完。血清避免反復凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質。胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中。
如何區(qū)別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。2、pH,國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。3、微生物。包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性的病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1um過濾,大多也能清理。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清理,但對血清質量影響不大。病原性的病毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。胎牛血清能結合或調變它們所結合的物質活力。武漢賽業(yè)血清報價
血清應保存在-5℃至-20℃,然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。莆田優(yōu)等血清哪里有賣
胎牛血清的處理方法有:熱滅活,F(xiàn)BS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。目的是滅活FBS中存在的補體系統(tǒng)的任何成分,以及其他潛在的未知細胞生長抑制劑。以前熱滅活也是為了去除支原體污染,這不再是一個問題,因為現(xiàn)在所有的血清產品都通過小到足以去除支原體的孔徑進行過濾。必須注意的是,熱滅活也可能產生不良影響,例如降低培養(yǎng)細胞附著在表面上的能力。熱滅活過程必須小心進行,因為溫度過高或長時間加熱會使生長因子失活,并產生沉淀物。莆田優(yōu)等血清哪里有賣
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