EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結果,而且小分子化學反應檢測方法反應快,效率高,反應時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態,更簡單、更靈敏、更快速、更準確。EdU細胞增殖檢測試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。山東哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢
EdU細胞增殖檢測試劑盒穩定:適用于對細胞增殖狀況的連續觀察●經濟:無需裂解細胞,細胞可繼續培養或用于其他實驗●可靠:文獻引用率高,Pubmed有上千篇文獻的引用AlamarBlue®的應用●監測細胞的生長增殖狀態、研究細胞周期、細胞凋亡●監測生長因子活性,評估生長因子對細胞增殖的影響●物尤其是藥物的開發●環境污染物質的評估,細胞毒分析●效價評估細胞增殖過程中,細胞體內的環境由氧化環境變化成還原環境,呼吸鏈中的NADPH/NADP,FADH/FAD,FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin(刃天青)是一種無毒、可透膜的藍色染料,有微弱的熒光性山東哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒如何去使用呢?
避免反復凍融。如短時間內需多次重復使用,請于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養板或培養皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板,HK2貼壁細胞為例)細胞培養取對數生長期細胞,以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中,培養至正常狀態。EU標記1、將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標記培養基;2、提前將2×EU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養基孵育細胞2小時,棄培養基。
該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。你知道EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點嗎?
上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點是需要變性DNA后才能與抗體結合,導致了DNA雙鏈結構的破壞,影響了其他染料的結合染色,導致染色彌散,準確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優點:安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學反應的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。浙江咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒
EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題?山東哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢
EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發生共價反應,形成穩定的三唑環,終使細胞DNA標記上生物素等探針。本試劑盒反應簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應,無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。山東哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒優勢