通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,發現兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時,分化成脂細胞的百分比明顯降低。同樣的,通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來源的MSCs中,UFH肝素高濃度對成脂和成骨分化誘導的負面影響較為明顯。基于上述結果,我們現在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴增的必要性,在購買血小板裂解液后,用戶應結合自己的實驗條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應該在有效防止含血小板裂解液培養基凝膠形成的基礎上盡量降低,以減少肝素對于MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。 更多Sexton血清替代相關產品信息,歡迎關注我們的公眾號查看更多技術文章:Mine-bio在國內哪里可以買到血清替代?灝洋血小板裂解液授權代理商
細胞培養基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎培養基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細胞培養基。3.應在完全細胞培養基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養基可在4°C下儲存,并穩定約4周儲存和穩定性ELAREMPrime在標簽上注明的失效日期之前是穩定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應避免ELAREMPrime的重復凍融循環,因為這會導不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預熱一份完整的細胞培養基,并將剩余的培養基冷藏在4-8°C。更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢官方代理商上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號查看更多技術文章:Mine-bioAB血清替代品血小板裂解液來源哪家公司代理的血清替代品質好?
間充質間質細胞(MSCs)體外擴增的培養基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應的風險,監管機構并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應或牛病原體ganran的風險,有助于增強間充質干細胞的擴增,也相對容易地根據良好的生產規范程序生產,并已用于臨床應用,因此現如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。 血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細胞培養中涉及的含鈣培養基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。 更多關于Sexton血小板裂解液相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
血小板裂解液解凍后請立即進行培養基的配制,配置好的培養基在2-8°C環境下保存并盡快使用,不建議超過21天。如解凍后的原瓶無法全部使用,建議按需分裝成合適的小瓶中進行-20°C保存一旦產品瓶或袋經過初始解凍過程,建議盡快將產品置于基礎培養基中。盡管對于儲存在2-8°C的準備好的含有hPL的培養基,Sexton的內部測試有效期為21天,但建議客戶進行內部驗證研究,以確定其基于血小板裂解液的完整培養基的有效期。使用的基礎培養基和添加劑等變量可能會縮短或延長完整培養基產品的有效期。 更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術文章!血小板裂解液的制血方法是什么?
在已有的上百篇文獻中,報道了Sexton公司的Stemulate和nliven已經被確定為間充質干細胞MSC的良好生長補充劑,并且支持各種組織來源包括脂肪、骨髓、軟骨、牙髓和臍帶中的MSCs的擴增培養。Sexton公司標準型和PR處理的血小板裂解液始終優于輻照胎牛血清,幫助用戶優化MSCs的生產。用戶通過使用Sexton公司的血小板裂解液培養基生長劑,降低時間和花費的成本,可帶來更快的倍增時間。既可以減少潔凈室生產時間,也可以減少試劑的使用量,實現總成本的降低。更多Sexton血小板裂解液相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術文章。血清替代物里有哪些有效成分?灝洋血小板裂解液授權代理商
血清替代和血清有什么不同呢?灝洋血小板裂解液授權代理商
MSCs是異質性的細胞群,其組成可能受培養條件的影響。血小板裂解液中肝素及其濃度高低對細胞形態和生長模式并未有明顯的影響。通過免疫熒光顯微鏡分析未發現波形蛋白(一種通常在中胚層起源的細胞中表達的中間絲)和α-SMA表達的差異,肝素濃度對于α-SMA(綠色)和波形蛋白(紅色)的分布并無影響。脂肪組織源性間充質干細胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質干細胞(BM-MSC)本身免疫表型就是相似的,經添加不同濃度肝素的血小板裂解液培養擴增的AT-MSC和BM-MSC的流式細胞分析結果顯示出CD29、CD73、CD90和CD105表達,而表面標記CD14、CD31、CD34和CD45的缺失,可見肝素濃度對MSC免疫表型的表達水平幾乎是沒有影響的。更多關于Sexton血小板裂解液相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!灝洋血小板裂解液授權代理商