CHO細胞PEI轉染試劑protocol

方法：1．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養基。2.制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養皿用420μL反應總體積為例。準備兩支1.5mL離心管，一管將質粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養基中，輕輕搖動平皿混勻，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致。3.培養6-10h后更換為37℃預熱的含有血清的培養基，繼續培養，16h左右可以觀測到報告基因的表達。更多關于PEI轉染試劑相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！美國Polysciences PEI轉染試劑怎么樣？CHO細胞PEI轉染試劑protocol

PEIMAX——高產工業化轉染試劑-高度濃縮，可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產品，因其較高的轉染效果，已廣泛應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEIMAX，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來，經過眾多業內人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293、CHO和Sf9系統中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產中穩定性高，可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續的高基因表達細胞體系，實現從新藥研發到工業化生產的輕松過度。而且與大多數細胞轉染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本（部分案例可降低90%轉染成本）。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！40KPEI轉染試劑怎么樣用PEI轉染時，一般和DNA的比例是多少呢?

準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。更多關于Polysciences產品，歡迎咨詢上海曼博生物！

線性化聚乙烯亞胺pei25,000,一種高電荷陽離子聚合物,非常容易結合于高電荷陰離子基質。工業應用上線性化pei可改善負電荷染料的物理外觀以調整染料的化學特性和增強染料與固相基質的黏附能力,常用作黏附增強劑,作用同多聚賴氨酸(poly-lysine);科研應用上;線性化pei能與dna或其他負電荷生物大分子簡單結合,正是這一特性,使得成為一種非常行之有效的載體運輸介質(vectorcarrier),即轉染試劑。上海曼博生物醫藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體，生命科學領域一站式供應鏈體系，以及高風險生物危險材料進出口平臺的優勢.更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物。哪個品牌的PEI轉染試劑轉染效率更好？

上海曼博生物醫藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體，生命科學領域一站式供應鏈體系，以及高風險生物危險材料進出口平臺的優勢，曼博生物嚴格篩選國際創新且經過同行驗證過的產品和技術，引入中國市場，開發、孵育和推廣，致力于將全球創新產品和前沿技術帶入中國，集中在為細胞/基因領域、/免疫，抗體藥物研發客戶提供小眾創新產品，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養基質，轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發從R&D到Clinicaltrial以及后期商業化的無縫轉化。更多關于Polysciences PEI相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！也歡迎關注我們的公眾號：Mine-Bio哪個品牌的PEI轉染試劑性價比高？40KPEI轉染試劑運輸方式

有哪些品牌的PEI轉染試劑？CHO細胞PEI轉染試劑protocol

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號：Mine-BioCHO細胞PEI轉染試劑protocol