Taq DNA Polymerase:科研中的關鍵工具Taq DNA Polymerase 是一種應用于分子生物學研究中的熱穩定DNA聚合酶,其獨特的性能和特點使其成為PCR技術的重要工具。產品特點Taq DNA Polymerase 的特點是其出色的耐熱性。該酶來源于嗜熱菌Thermus aquaticus,能夠在高溫條件下保持活性,適催化溫度為75-80℃,即使在95℃下保溫半小時,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5'→3'聚合酶活性,能夠在PCR反應中高效地合成DNA鏈。然而,它缺乏3'→5'校正活性,這意味著在擴增過程中可能會引入少量錯誤,但對于大多數常規PCR應用而言,這種特性并不影響其好的使用。Taq酶的另一個重要特性是其5'→3'外切酶活性,這一特性使其在探針法qPCR中具有獨特的優勢。此外,Taq酶在PCR產物的3'末端會添加一個A堿基,這使得PCR產物可以直接用于TA克隆。SpCas9-NLS的應用范圍廣泛,可用于細胞內的CRISPR/Cas9系統介導的基因編輯。Recombinant Human THSD7A Protein,His Tag
產品特點高靈敏度與特異性SYBRGreen是一種熒光染料,能夠特異性地結合到雙鏈DNA的小溝區域。在qPCR過程中,隨著DNA鏈的延伸,SYBRGreen的熒光信號不斷增強,從而實現對目標基因的實時定量。這種染料的結合特異性極高,確保了實驗結果的準確性。即使在低濃度的模板條件下,也能檢測到目標基因的存在,靈敏度可達單拷貝水平。2×預混體系,操作簡便該產品采用2×預混體系,預先將Taq酶、dNTPs、MgCl?等關鍵組分混合均勻,實驗人員需加入引物和模板即可進行反應。這種預混體系簡化了實驗操作步驟,減少了人為誤差,同時保證了反應體系的均一性和穩定性。無論是初學者還是經驗豐富的研究人員,都能輕松上手,快速開展實驗。低ROX參比染料,減少背景干擾ROX染料作為qPCR反應中的參比染料,用于校正孔間熒光信號的差異。然而,過高的ROX濃度可能會引入背景熒光,影響實驗結果的準確性。SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX)采用了低濃度的ROX染料,有效降低了背景干擾,提高了熒光信號的信噪比,使得定量結果更加精確可靠。Arg-Gly-Glu-Ser與Taq DNA Polymerase不同,Pfu DNA Polymerase產生的PCR產物為平滑末端,無3'端"A"突出。
在現代分子生物學研究中,聚合酶鏈式反應(PCR)技術已成為不可或缺的工具,廣泛應用于基因擴增、突變檢測、基因表達分析等多個領域。而一款PCR Master Mix則是確保實驗成功的關鍵因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)憑借其性能和獨特的產品特點,為科研工作者提供了高效、可靠的實驗解決方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,這是一種具有高保真性的熱穩定酶。它能夠以極高的準確性復制DNA模板,錯誤率極低,為普通Taq酶的1/500,這使得它在擴增長片段DNA或對序列準確性要求極高的實驗中表現出色。例如,在進行基因克隆或構建基因文庫時,Phusion酶能夠確保擴增產物的序列與原始模板高度一致,從而提高了后續實驗的成功率。二、快速擴增能力盡管Phusion酶具有高保真性,但其擴增速度并未受到影響。它能夠在短時間內完成長片段DNA的擴增,提高了實驗效率。對于長度在5kb以內的DNA片段,Phusion Master Mix可以在幾分鐘內完成擴增,這對于需要快速獲得實驗結果的研究人員來說是一個巨大的優勢。例如,在進行高通量基因篩查或大規模樣本分析時,Phusion Master Mix能夠縮短實驗周期,提高工作效率。
在分子生物學研究中,核酸染色是檢測DNA和RNA的關鍵步驟,而溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)作為一種經典的熒光染料,因其高效性和靈敏性被廣泛應用于核酸電泳、熒光分析等領域。產品特點高靈敏度與特異性EB是一種多環芳烴熒光小分子,能夠特異性地嵌入雙鏈DNA和RNA中。結合后,其熒光強度增強,雙鏈RNA和雙鏈DNA的熒光強度分別可增強21倍和25倍。這種特性使得EB能夠檢測到低至10ng的DNA條帶,非常適合用于微量核酸的檢測。多種應用EB不僅用于瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的核酸染色,還可以作為DNA聚合酶抑制劑,用于核酸的熒光分析實驗。此外,EB還可與吖啶橙聯合使用,用于區分活細胞、凋亡細胞和壞死細胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一種預制的儲存液,使用時只需稀釋至工作濃度(通常為0.5μg/ml),即可用于電泳前或電泳后的染色。例如,在瓊脂糖凝膠制備時,每100mL膠液中加入2-5μL的10mg/mlEB溶液即可。穩定的儲存條件10mg/ml的EB溶液在室溫下避光保存即可,有效期可達1-2年。這種儲存條件使得EB溶液在實驗室中易于保存和管理。Pfu DNA Polymerase的突變體研究:通過研究Pfu DNA Polymerase的突變體,可進一步優化其性能和應用范圍。
CUT&RUN和ChIC是兩種用于研究蛋白質-DNA相互作用的技術,它們有一些關鍵的區別:1.**技術原理**:-**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:ChIC技術利用抗體將感興趣的蛋白與ProteinA-MNase相結合來進行DNA切割。ChIC的優勢在于使用TF特異性抗體系住MNase,并只在結合位點裂解。-**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:CUT&RUN技術則是在核的輕微MNase處理后釋放單核小體和TF-DNA復合物,留下寡核小體。CUT&RUN通過在冰上進行簡短的消化反應,在TF結合的MNase擴散到周邊的基因組和裂解可接近的染色質之前在上清中恢復TF-DNA復合物。2.**操作步驟和簡便性**:-**ChIC**:ChIC可能需要甲醛固定操作,這可能重新引入了ChIP-seq的一些問題,如交聯導致的DNA和蛋白質的化學修飾。-**CUT&RUN**:CUT&RUN簡化了操作步驟,使用磁珠固定細胞核,適用于新鮮和冷凍組織樣本,縮短了生成DNA測序文庫的時間(1-2天)。3.**背景信號和信噪比**:-**ChIC**:ChIC產生的背景信號可能較高,因為它可能涉及到非特異性的DNA切割。
泛素蛋白的C末端通常通過酰胺鍵與靶蛋白的氨基團連接在一起,最常見的是與靶蛋白賴氨酸的ε氨基團相連。Recombinant Human THSD7A Protein,His Tag
一、靈敏度與特異性該試劑采用 SYBR Green I 熒光染料,這種染料能夠特異性地結合到雙鏈 DNA 上,當 DNA 在 PCR 過程中被擴增時,熒光信號也隨之增強。其靈敏度極高,即使在樣本中目標基因的初始拷貝數極低的情況下,也能準確地檢測到其擴增信號。同時,通過優化的反應體系,有效減少了非特異性擴增的產生,確保了實驗結果的特異性。例如,在對微量的病毒核酸進行檢測時,SYBR Green qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus) 能夠識別并擴增目標病毒基因,避免了其他非病毒核酸的干擾,為病原體的早期診斷提供了有力支持。二、高濃度 ROX 參考染料,穩定可靠qPCR 實驗中,ROX 參考染料的作用不容小覷。SYBR Green qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus) 中的高濃度 ROX 參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號的差異,提高實驗結果的重復性和穩定性。在多孔板實驗中,不同孔之間的熒光信號可能會因儀器的微小差異、加樣量的不均勻等因素而產生波動。高濃度的 ROX 參考染料如同一把標尺,對這些波動進行校正,使得實驗數據更加準確可靠。無論是單次實驗還是大規模的樣本檢測,都能保證結果的一致性,為科研數據的統計分析提供了堅實基礎。Recombinant Human THSD7A Protein,His Tag