在s3中,將s2中消毒的外植體接入誘導培養基中培養,誘導培養基的配方為ms+,誘導培養基的ph值為,在s4中,將s3中的無菌外植體轉接到增殖培養基中,增殖培養基的配方為ms+~~,增殖培養基的ph值為,在s5中,將s4中的繡球組培苗放入生根培養基中,生根培養基的配方為1/2ms+~~,生根培養基ph值為。通過采用上述技術方案,通過液體**培養技術,以芽為原材料,獲取方便,增殖倍率高達8~10倍,生根率達到95%以上,苗木規格整齊,性狀保持穩定,同時節省成本,適合工廠化大規模生產質量繡球種苗。誘導培養基萌芽率能達到90%,可以成功建立無菌再生體系。使用本增殖培養基,繡球組培苗增殖倍率能夠達到8~10倍,組培苗高度一致,生長健壯。使用本生根培養基,繡球組培苗生根率能夠達到95%,根系發達,健壯,可以成功用于移栽大棚。本發明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s3中,將s2中消毒的外植體接入誘導培養基中后的培養環境為在光照強度1500lux條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養6~8周。通過采用上述技術方案,在該培養條件下能夠有效避免誘導培養階段植物材料出現應激反應,植物材料能夠快速適應誘導培養基。使用減血清培養基能減少實驗的誤差和干擾。吉林MEM a培養基進口
在工作臺上把已經沖洗干凈的外植體浸入75%酒精中消毒30s,用無菌水沖洗3~4次,使用白貓漂白水和無菌水按1:4的體積比配制消毒液,將外植體放入消毒液浸泡40min。通過采用上述技術方案,這種方式對外植體消毒方法簡單,能夠**降低外植體的死亡率,消毒成活率較高。本發明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s1中,外植體選擇為**繡球的枝芽飽滿的半木質化枝條莖尖部分。綜上所述,本發明包括以下至少一種有益技術效果:本發明通過液體**培養技術,以芽為原材料,獲取方便,增殖倍率高達8~10倍,生根率達到95%以上,苗木規格整齊,性狀保持穩定,同時節省成本,適合工廠化大規模生產質量繡球種苗。附圖說明圖1是繡球的液體培養基組培快繁方法的流程示意圖。具體實施方式以下結合附圖對本發明作進一步詳細說明。實施例:參照圖1,為本發明公開的一種繡球的液體培養基組培快繁方法,具體步驟如下:(一)、試驗材料:供試材料采自江蘇東郁植物科技有限公司苗圃的**繡球,品種為無盡夏(endlesssummer“bloomstruck”),外植體選用當年生枝芽飽滿的半木質化枝條莖尖部分。(二)、試驗方法:繡球**培養過程按以下步驟進行:初代培養、繼代培養、生根培養。。青海RPMI1640培養基報價無血清培養基為細胞培養提供了更清晰的背景。
若應用于植物培養中的液體培養基制作,可不用調節ph,用超純水(ph為)充分溶解后定容,便可直接應用于大多數植物水培。培養實例1:哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(1)種子保存及消毒方法:a、擬南芥種子保存方法:哥倫比亞(col,columbia)型擬南芥種子成熟后,收取種子于,加入3-8顆變色**干燥劑,用封口膜密封后置于4℃長期保存;b、擬南芥種子**消毒方法:取出經低溫干燥保存的種子,于無菌環境下,將適量種子置于無菌,加入適量體積的無菌水,將離心管顛倒幾次后用低速離心機離心10s,小心倒掉上清,重復3次;加入75%酒精,將離心管顛倒幾次后用低速離心機離心10s,小心倒掉上清;用無菌水清洗3次,低速離心10s后去除上清;加入適量體積的5%naclo溶液,將離心管上下顛倒10-20次,低速離心10s后倒掉上清,重復2次;用無菌水清洗3次,低速離心10s后去除上清;加入無菌水,使種子完全浸泡在無菌水中,于4℃放置48h后播種。在種子質量良好的情況下,利用上述方法保存及消毒的無菌擬南芥種子,萌發率極高且幾乎同時出苗。(2)生長培養基配制:1/2cs基本培養基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l,用超純水溶解,。1/2cs基本培養基的成分及用量如表1所示。。
培養實例7和對比培養例7的誘導結果比較::用上述方法進行水稻成熟胚愈傷**誘導時,cs誘導培養基與ms誘導培養基誘導出的愈傷**形態大小均相近,出愈率均為100%。如圖7所示。培養實例8:液體培養基在植物水培中的應用(1)用不同ph的超純水配制的液體培養基ph值穩定性比較:a、用不同ph的超純水配制液體培養基:通常多種因素會導致相同超純水制水機產出的超純水ph變動較大,ph通常為。分別選取ph為、、、、、,分別配制ms液體培養基、cs液體培養基、1/2ms液體培養基、1/2cs液體培養基,制作方法為:ms液體培養基為取ms基本培養基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l;cs液體培養基為取cs基本培養基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l;1/2ms液體培養基為取1/2ms基本培養基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l;1/2cs液體培養基為取1/2cs基本培養基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l。b、結果為:用ph為,ms液體培養基ph為,cs液體培養基ph為,1/2ms液體培養基ph為,1/2cs液體培養基ph為。植物**適宜生長的ph一般為,觀察可知,ms液體培養基及1/2ms液體培養基的ph偏酸性且波動較大,其應用于液體培養基時通常需要調節ph,過程繁瑣,相比之下。無酚紅培養基在細胞實驗中減少了不必要的干擾。
1/2cs生長培養基的培養結果為:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養基上的存活率為100%,培養16d的幼苗,表現為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發達、平均根數為8個。如圖4所示。對比培養例4:將1/2cs基本培養基替換為1/2ms基本培養基,其余完全同培養實例4,1/2ms基本培養基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養基的培養結果為:馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養基上的存活率為100%,培養16d的幼苗,表現為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發達、平均根數為6個。如圖4所示。培養實例4和對比培養例4的培養結果比較:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養基和1/2ms生長培養基上的存活率均為100%;在相同條件下培養16d時,與1/2ms生長培養基相比,1/2cs生長培養基中的幼苗長勢更佳,其莖高、莖中粗、根的數量均優于1/2ms生長培養基。如圖4所示。培養實例5:哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(1)擬南芥葉片愈傷**誘導培養基:cs基本培養基+,用超純水溶解,。cs基本培養基的成分及用量如表1所示。(2)擬南芥根愈傷**誘導培養基:cs基本培養基+2,,用超純水溶解,。cs基本培養基的成分及用量如表1所示。。F12培養基適用于復雜細胞培養實驗。吉林MEM a培養基進口
MEM培養基在藥物篩選中有重要作用。吉林MEM a培養基進口
c、結果為:在用未調ph液體培養基進行培養時,整體長勢從優至弱分別為1/2cs未調ph液體培養基、cs未調ph液體培養基、1/2ms未調ph液體培養基、ms未調ph液體培養基;在用ph調至,整體長勢從優至弱分別為1/、、1/、;不論是否調ph至,cs液體培養基培養的馬鈴薯幼苗長勢均優于ms液體培養基;不論是否調ph至,1/2cs液體培養基培養的馬鈴薯幼苗長勢均優于1/2ms液體培養基。如圖9和圖10所示。說明,1/2cs液體培養基和cs液體培養基應用于植物水培時,不論是否調節ph至,均能獲得很好的培養效果,克服了傳統液體培養基必須調節ph后才適用于植物水培的缺點。**后說明的是,以上實施例*用以說明本發明的技術方案而非限制,盡管參照較佳實施例對本發明進行了詳細說明,本領域的普通技術人員應當理解,可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換,而其不脫離本發明技術方案的宗旨和范圍,則均應涵蓋在本發明的權利要求范圍當中。吉林MEM a培養基進口