培養實例2和對比培養例2的培養結果比較:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長培養基和1/2ms生長培養基上的萌發率均為100%;在相同條件下培養28d時,與1/2ms生長培養基相比,1/2cs生長培養基中的幼苗長勢更佳,在平均株高、蓮座葉大小、根長、花朵數量等方面均優于1/2ms生長培養基;并且,采用上述培養方法,不論是1/2cs生長培養基還是1/2ms生長培養基,均能獲得形態完整的花粉,且花粉活力高達%,其特點在于選擇了蘭茲貝格型擬南芥作為培養對象,且選擇了高度適中的培養盒進行培養,克服了傳統培養方法無法獲得擬南芥整個生育期無菌苗的缺點,所獲無菌花***可直接用于花*離體培養等研究內容。如圖2所示。培養實例3:油菜無菌苗培養與培養實例1不同的地方在于:步驟(1)所用種子為中雙11號油菜種子,其余完全同培養實例1。1/2cs生長培養基的培養結果為:中雙11號油菜種子在1/2cs生長培養基上的萌發率為100%,培養9d的幼苗,表現為植株健壯、平均株高為,葉色濃綠,莖稈粗壯、平均莖中粗為,根系發達、平均根數為(>)、平均主根長為。如圖3所示。對比培養例3:將1/2cs基本培養基替換為1/2ms基本培養基,其余完全同培養實例3,1/2ms基本培養基的成分及用量如表1所示。無酚紅培養基適用于對酚紅敏感的實驗設置。吉林培養基牌子
已發現當培養基中的血清濃度減少時,這些成分都是必需的。既使在使用血清的情況下,這些成分也可幫助細胞的克隆化培養及維持某些特殊細胞系的生長。***和生長因子在大多數常規培養基的配方中都沒有注明,但在無血清培養基中通常要加入它們,用其來代替血清中的***能增加多種不同類型細胞的貼瓶率;生長因子包括FGF家族、EGF、PDGF、IGF-1和IGF-2及白介素等,生長因子和細胞因子有著***的特異性,一般與***或其它物質起相互協同或加成作用。另一種常見的添加物就是血清替代物,目前已有許多可完全或部分替代傳統培養液中血清成分的商業產品,其穩定性較好,但批次間仍有差別,產品的成分也不很確定。干粉培養基原倍液的配制1)配制過濾**的細胞培養基(1)閱讀培養基使用說明,確定需要添加何種添加劑(如NaHCO3、L-谷氨酰胺、**酸鈉、HEPES等)。(2)根據所需將培養基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)將袋內殘留培養基洗下,并入容器。加注射用水至總體積的95%,輕微攪拌溶解。(3)加入規定量的碳酸氫鈉及所要添加的物質。(4)輕微攪拌溶解,加注射用水至規定體積。(5)用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調pH至所需值。(6)用μm濾膜正壓過濾**。。新疆Ham's F12培養基供應商家MEM培養基含有多種必需氨基酸和維生素,適合細胞培養。
愈傷**誘導率為100%。如圖6所示。對比培養例6:將cs基本培養基替換為ms基本培養基,其余完全同培養實例6,ms基本培養基的成分及用量如表1所示。ms誘導培養基的誘導結果為:本氏***葉片愈傷**誘導時,培養15-18d的葉片略微增厚,在葉片四周產生較少的淡綠色愈傷**,愈傷**誘導率為90%,在愈傷**團塊上產生的嫩綠色不定芽數量較少;本氏***根愈傷**誘導時,培養9-11d在切口處產生大量淡黃色致密的愈傷**,愈傷**誘導率為100%。如圖6所示。培養實例6和對比培養例6的誘導結果比較:用上述方法進行本氏***葉片愈傷**誘導時,cs誘導培養基愈傷**誘導率為100%,而ms誘導培養基的誘導率*為90%,在所述相同培養條件下,與ms誘導培養基相比,cs誘導培養基可更快誘導出大量致密的葉片愈傷**、產生更多的不定芽;用上述方法進行本氏***根愈傷**誘導時,cs誘導培養基與ms誘導培養基誘導出的根愈傷**形態相近,兩種培養基的根愈傷**誘導率均為100%。如圖6所示。培養實例7:水稻成熟胚愈傷**誘導(1)水稻種子消毒及篩選:a、選種:以秈稻縉恢10號為例,將水稻種子晾曬干燥后于4℃下長期保存,挑選籽粒飽滿、大小基本一致的水稻種子,用剪刀從種子中部剪開,去除谷殼。
第三節**的代謝與培養基新陳代謝(metabolism)足生物有機體基本的特征之一,是生命活動中一切生化反應的總稱。它包括物質的分解和物質的合成過程。**吸收了外界的營養,在酶的作用下將其分解,再在酶的作用下臺成**菌體的成分。分解與合成兩個過程伴同發生,緊密相關,維持了**細胞的生命,進行**的生長。通過檢測**系統及代謝產物的生理,來鑒定**的試驗稱生化試驗。生化試驗可分為糖代謝試驗、蛋白質代謝試驗、鹽利用試驗和呼吸酶類斌驗4種。l.代謝試驗①氧化發酵試驗O-F;②糖(醇)類發酵試驗;③VP和甲基紅試驗2.蛋白質代謝試驗①蛋白水解試驗;②硫化氫試驗;③吲哚試驗;④脫羧酶試驗;③脫氨試驗;⑥尿素酶試驗。3.鹽類代謝試驗①枸櫞酸鹽試驗;②丙二酸鹽利用試驗;③硝酸鹽還原試驗4.呼吸酶類試驗①氧化酶試驗;②細胞色素氧化酶試驗表IMVIC試驗對腸桿菌屬的鑒別作用菌名吲哚(I)甲基紅(M)VP(Vi)枸櫞酸鹽。RPMI1640培養基在抗體生產和免疫研究中有重要作用。
參與細胞的代謝活動。此外,通過提供鈉,K+和Ca2+,幫助細胞調節細胞膜功能。Na+是細胞外液中**主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用,還與Cl-共同參與生物電活動、維持水平衡和酸堿平衡等。K+主要分布在細胞內液,對于***某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+和Mg2+主要參與信號傳導、能量代謝、脂肪酸合成、核糖體穩定和蛋白質合成等多種生理作用。PO43-、SO42-、HCO3-是基質所需陰離子,同時是細胞內電荷的調節者。磷對于細胞的生長、代謝和調控都有重要的作用,含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白質是構成細胞的主要成分,ATP、ADP是能量生成、存儲和利用的不可或缺的化合物。上述離子對于細胞的作用各有不同,它們共同構成了細胞賴以生存的滲透壓、pH和電化學平衡的微環境,細胞對于某種元素的吸收利用會受到其它元素的干擾,例如培養基中過高的鈣離子濃度會使鎂和鋅的吸收利用受到干擾。因此,在保證培養基中上述離子濃度滿足要求以外,還需保證上述離子之間種類和比例的平衡。此外,微量元素如鐵、鈷、鎳、硒、碘、銅、鋅、錳、鉻、鉬、氟等對于細胞生長代謝和產物合成都有促進作用。減血清培養基減少了血清對細胞的影響。新疆Ham's F12培養基供應商家
無酚紅培養基確保了實驗結果的準確性。吉林培養基牌子
生產上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,輸送到預先已經**過的罐內。(四)、間歇**與連續**的比較1、歇**的***和缺點***是設備要求低,不需另外設置加熱、冷卻裝置;操作要求低,適于手動操作,適合于小批量生產規模;適合于含有大量固體物質的培養基的**。缺點是培養基的營養物質損失較多,**后培養基的質量下降;需進行反復的加熱和冷卻,能耗較高;不適合于大規模生產過程的**;發酵罐的利用率較低。2、連續**的***和缺點***是**溫度高,可減少培養基中營養物質的損失;操作條件恒定,**質量穩定;易于實現管道化和自控操作;避免了復的加熱和冷卻,提高了熱的利用率;發酵設備利用率高。缺點是對設備的要求高,需另外設置加熱、冷卻裝置;操作較麻煩;染菌的機會較多;不適合于含大量固體物料的**;對蒸汽的要求高。由此可見,無論在理論上或者在實踐上,與間歇**過程相比,連續**的***十分明顯。因此,連續**越來越多地被用培養基的**。吉林培養基牌子