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利用斑馬魚模型評價多藥耐藥逆轉作用【評價原理】大型疾病療愈中一個普遍存在的問題就是多藥耐藥。在化療引起的耐藥機制中，腫瘤細胞的P-糖蛋白（P-gp）表達水平升高是主要機制之一。P-gp是一種細胞外轉運子，P-gp表達水平升高會導致進入腫瘤細胞會很快被轉運到細胞外，導致腫瘤細胞內的化療藥濃度達不到殺死腫瘤細胞的濃度，進而產生耐藥性。讓正常斑馬魚攝入熒光底物（呈紅色），由于P-gp的存在，正常斑馬魚將熒光底物泵出體外，殘留在體內的熒光底物很少；而用P-gp抑制劑環孢菌素A處理后，P-gp的活性受到抑制，P-gp熒光底物不能被排出，殘留在斑馬魚體內的熒光底物增多。若某種藥物能夠增加熒光底物在斑馬魚體內的存留，則其可能是潛在的P-gp抑制劑。利用斑馬魚模型評價腸道消化功能。體外藥效評價服務

基于斑馬魚模型實驗，可進行活性化合物發現、高通量藥物篩選、藥效評價、安全性評價、生物學質量控制等臨床前研究，實驗周期短、成本低，結果直觀，助力醫藥企業的藥物研發、品控及宣傳推廣。利用斑馬魚模型評價抗腫瘤作用【評價原理】近三十年來，世界**發病率以年均3-5%的速度遞增，*類已成為人類**死因。1.**生長、轉移將熒光標記的人腫瘤細胞（呈紅色）移植到野生型斑馬魚體內，腫瘤細胞在斑馬魚體內的生長和轉移情況可以被觀察到。2.腫瘤部位新生血管將熒光標記的人腫瘤細胞（呈紅色）移植到轉基因血管熒光斑馬魚（呈綠色）體內，腫瘤細胞刺激斑馬魚新生血管情況可以被觀察到。3.腫瘤細胞凋亡將人腫瘤細胞移植到野生型斑馬魚體內，通過特異性熒光染色（凋亡細胞呈綠色），細胞凋亡情況可以被觀察到。4.腫瘤部位炎癥將人腫瘤細胞移植到轉基因中性粒細胞熒光斑馬魚（呈綠色）體內，腫瘤部位炎癥反應可以被觀察到。5.**病理將人腫瘤細胞移植到野生型斑馬魚體內，制作成病理切片，觀察腫瘤細胞的形態變化。6.生存期將人腫瘤細胞移植到野生型斑馬魚體內，統計斑馬魚每日存活率、計算其生存期。藥品功效評價檢測新一輪基本藥物目錄調整在即。

我們將受測試斑馬魚分成二組，分別是正常對照和服用供試品組（供試品通過溶解到養魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內），加入相應的胰脂肪酶和胰蛋白酶特異性檢測試劑。服用供試品后，我們使用酶標儀對斑馬魚進行OD值的檢測。可以看到，服用供試品組的胰脂肪酶和胰蛋白酶的OD值與正常對照組比較，有明顯性提高。1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用供試品組與正常對照組比較胰脂肪酶和胰蛋白酶含量均有明顯的升高。2.本實驗證實了供試品具有促進腸道消化功能的作用，主要表現為增加胰脂肪酶和胰蛋白酶的含量。

斑馬魚胃腸道粘膜屏障系統由較完整的機械屏障、化學屏障和免疫屏障構成，與哺乳動物高度相似，可作為胃腸道粘膜屏障研究的動物模型。三******磺酸（TNBS）可破壞腸道粘膜屏障，與腸組織蛋白結合形成抗原，發生變化反應，誘發結腸炎。杯狀細胞主要分泌黏蛋白，形成黏膜屏障以保護上皮細胞，腸黏膜損傷時杯狀細胞數量減少。我們可以應用特異性的染料（呈藍色），觀察腸道杯狀細胞數目，評價腸道粘液分泌功能。  我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和服用腸道粘膜輔助保護劑組。其中正常對照組未經任何處理，模型對照組與服用腸道粘膜輔助保護劑組都攝入了等量的TNBS（TNBS通過溶解到養魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內）。服用腸道粘膜輔助保護劑組在TNBS誘導腸道粘膜損傷之后攝入類似的腸道粘膜輔助保護劑。服用一段時間腸道粘膜輔助保護劑后，我們觀察和分析腸道杯狀細胞數目。利用斑馬魚模型評價改善貧血功效。

斑馬魚消化道的解剖結構和細胞結構與人類消化道相似，具有同心圓層的內上皮、結締組織、環狀肌肉和外縱肌層。三硝基苯磺酸（TNBS）的乙醇溶液造模法屬于正常免疫系統下的半抗原誘導性模型，當TNBS的乙醇溶液灌腸時，乙醇作為有機溶劑溶解腸粘膜表面的黏液，暫時性破壞腸粘膜屏障，使TNBS和腸組織蛋白結合形成完全抗原，導致腸黏膜免疫系統針對該抗原的遲發性變化反應，并造成腸黏膜的損傷。杯狀細胞是黏蛋白的主要來源，其數量和形態反應腸粘膜的健康狀況，是腸粘膜異常的敏感指標。由于斑馬魚通體透明的特點，有兩種方法檢測結腸炎的防治作用。1.觀察腸腔面積的變化，2.通過特異性染料（呈藍色）對腸道的杯狀細胞染色，通過觀察杯狀細胞數量來判斷腸粘膜的損傷情況。藥物如何進行正確分類？進行藥效評價的cro公司

利用斑馬魚模型評價軟骨修復功效。體外藥效評價服務

細胞色素P450酶是許多同工酶組成的超大家族，主要位于肝臟微粒體中，參與生物體許多內源性和外源性物質的生物轉化。許多臨床相關藥物間的相互作用與抑制和/或誘導CYP酶有關，改變CYP酶的活性對藥效有重要影響，有時甚至會威脅生命。在眾多肝臟細胞色素P450酶家族中，CYP3A4和CYP2D6與70%以上的藥物代謝有關，其中CYP3A4占50%以上，而CYP2D6占20%左右，因此目前藥物代謝研究集中于評價藥物對CYP3A4和CYP2D6的影響。我們評價斑馬魚對細胞色素P450的影響作用有2個指標：1.對CYP3A4的影響作用；2.對CYP2D6的影響作用。體外藥效評價服務

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