細胞培養實驗室之凈化工作臺
凈化工作臺:操作簡單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養室使用的凈化工作臺主要有兩種:a)側流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。
凈化工作臺工作原理(大致相同)——通常是將室內空氣經粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,再經高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區,從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環境。
側流式工作臺—空氣凈化后的氣流由左或右側通過工作臺面流向對側,也有從上向下或從下向上流向對側,形成氣流屏障保持工作區無菌。工作臺結構為封閉式。
外流式(水平式)工作臺—凈化后的空氣面向操作者流動,因而外方氣流不致混入操作,但進行有害物質實驗操作則對操作者不利。工作臺結構為開放式(已少用)。 細胞計數儀的體積有多大?湖北應用細胞計數儀價目表
細胞離心下來的離心速率應為多少?
細胞傳代或凍存時欲回收細胞,其離心速度一般為800-1000 rpm/min,室溫離心5-8分鐘,轉速過高,將造成細胞破裂死亡。
如何用臺盼蘭計數活細胞?
用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200~2000 個/毫升,在0.1 毫升的細胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,用血球計數板計數細胞?;罴毎懦馀_盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞,注意計數需在加入臺盼藍10min內完成。有細胞計數儀的,可直接用計數儀進行。 安徽通用細胞計數儀咨詢報價細胞計數儀對比血球計數板。
細胞抱團怎么處理?
一些懸浮細胞抱團生長是正?,F象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現部分細胞抱團生長的現象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15 ml離心管中,靜置20 min左右,小心取上層細胞上清培養(該方法只能去除部分較大的細胞團,需要大家酌情而定)。
細胞內有空泡,是否是正常現象?
部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F象。如果只有少數細胞有內出現極少空泡,則很可能是細胞狀態不佳,可以通過調整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態;如果大部分細胞出現空泡,且單個細胞內空泡數目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因
很可能是培養體系不適合細胞(未使用推薦的培養體系);或者消化過度,對細胞有嚴重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細胞,傳代太稀;或者生長較快的細胞,傳代較密,細胞嚴重堆疊生長)。 細胞計數儀起到什么作用?
如何控制胰酶消化時間?
胰酶消化的程度是細胞培養中的一個關鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關。消化對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄比較好消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。 TANK細胞計數儀價格。北京通用細胞計數儀收費
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細胞活力鑒定——臺盼藍染色法
臺盼藍(Trypan Blue),也稱二胺藍(Diamine Blue)和加拉藍(Niagra Blue),是一種用于選擇性著色死細胞和即將死亡的細胞的重要染料。這種染料不能進入細胞膜完整的細胞,而能在細胞膜受損的死細胞或即將死亡的細胞內迅速積累,從而在顯微鏡下顯出藍色。若染色時間過長,臺盼藍可能通過胞吞或胞飲作用進入細胞。
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