單細胞測序實驗的第一步是單細胞懸液的制備，而懸液制備中細胞計數的準確性直接影響單細胞測序的數據質量，但是關于細胞計數您真的了解嗎？
目前細胞計數主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1）臺盼藍染色原理：臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色。而死細胞的細胞膜透性增高，可使染料進入細胞內而使細胞著色（藍色）。
2）雙熒光AO/PI染色原理：吖啶橙（AO）可以通過完整的細胞膜，嵌入所有細胞（活細胞和死細胞）的細胞核，呈現綠色熒光；碘化丙啶（PI）只能通過不完整的細胞膜，即死細胞的細胞膜，嵌入所有死細胞的細胞核，呈現紅色熒光。
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如何讓細胞計數更加的準確
優化細胞計數的設備配置
無論是手動計數還是依靠TANK-CA0008全自動細胞計數儀自帶軟件算法計數，調整焦距和曝光設置都很重要，以確保細胞盡可能有比較好的可見性/能見度，終獲得準確的細胞計數結果。比較好的聚焦和曝光將在細胞膜和背景之間，有非常非常非常鮮明的對比。
血球計數板的腔室需要調整到合適的高度
血球計數板有多種型號規格可供選擇。不同型號的腔室高度和深度在設計上都差異巨大。實驗人員在計算細胞數量時要注意一些細節以避免錯誤。 北京通用細胞計數儀全自動細胞計數儀的成本。
眾所周知，活細胞密度(VCD)和活率(viability)是評估哺乳動物細胞系生長狀態的重要指標。生物制藥研發人員進行懸浮細胞培養，每天所不能避免的工作，就是取樣計數。使用細胞計數板進行人工計數無疑是金標準方法。
但這個傳統方法其勞動強度十分驚人，樣品量少的時候還能吃得消，樣品量大一些，甚至于要做大規模的DOE實驗時，估計很多實驗人員想死的心都會有。而且人工計數有較強的主觀性，對操作人員的經驗及操作熟練度有一定要求，導致有時候數據的重現性和可比性會受到質疑。
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原代細胞培養后細胞會因生存空間不足或密度過大，營養障礙，影響細胞生長。細胞由原培養瓶內分離稀釋后傳到新的培養瓶中培養的過程稱之為傳代培養。傳代細胞使得培養的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的比較大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。
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如何獲取高質量的細胞懸液，下面就帶您一步步***從組織到細胞懸液的旅程，讓細胞懸液制備不再成為困擾您的難題。
樣本準備
新鮮組織樣本是制備細胞懸液的首要條件，新鮮組織從***取下后，去除周圍的脂肪、結締組織或者壞死組織，用預冷的PBS或者生理鹽水沖洗干凈，快速轉移到解離實驗室進行細胞懸液制備，一般1個黃豆大小的組織量（200 mg）即可滿足一次組織解離。如果收集到新鮮樣本后無法立即進行懸液制備，可暫時用組織保存液4℃保存，盡快完成細胞懸液制備。 全自動細胞計數儀的耗材貴嗎？江蘇多功能細胞計數儀
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可否使用與原先不同的血清種類?
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞為何生長不均勻?
細胞傳代后放入培養箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養瓶，頻繁開關培養箱引起的振動或者培養瓶中培養液過少，培養箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。 標準細胞計數儀比較價格
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