細胞抱團怎么處理?
一些懸浮細胞抱團生長是正常現象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現部分細胞抱團生長的現象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15 ml離心管中,靜置20 min左右,小心取上層細胞上清培養(該方法只能去除部分較大的細胞團,需要大家酌情而定)。 TANK細胞計數儀價格。四川應用細胞計數儀比較價格
細胞接種密度多少合適?
依照細胞株基本數據上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經驗:一般倍增時間24 h內的細胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時間24-48 h的細胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
如何預防細胞培養中黑點的產生?
掌握細胞傳代的比較好時機,不要細胞長老了再傳代;掌握好消化時間,防止消化過度產生細胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數;將培養液的PH調到比較好;嚴格控制水質和器皿的清潔。 重慶自動化細胞計數儀廠家現貨全自動細胞計數儀的對比數據。
培養細胞時應使用5%或10%CO2?
一般培養基中大都使用HCO3 - / CO32- / H+作為pH的緩沖系統,而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養時應使用10%CO2;當培養基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養細胞。
CO2培養箱之水盤如何保持清潔?
定期(每周一次)更換水盤里面的水,水盤的水必須使用無菌蒸餾水或無菌去離子,水盤中可添加1%硫酸銅以預防霉菌污染。
希望能幫到大家。
熒光素雙醋酸酯(FDA)是一種常用的培養動植物細胞以及植物細胞原生質體的生活力鑒定染料,其染色機理也利用了死活細胞在代謝上的差異:FDA本身不產生熒光,也無極性,能自由滲透出入完整的細胞膜。
當FDA進入活細胞后,被細胞內的脂酶分解,生成有極性的、能產生熒光的物質——熒光素,該物質不能自由透過活的細胞膜,積累在細胞膜內,因而使有活力的細胞產生綠色熒光;而無活力的細胞因不能使FDA分解,而無法產生熒光。
除此之外,還有一些細胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細胞液泡著紅色,而細胞質和細胞核不被著色;死細胞的液泡不被著色或淺染,染料彌散于整個細胞中,細胞核和細胞質被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用,如甲基藍-中性紅混合染色法。 細胞計數儀對比血球計數板。
培養中常出現一些黑點,是污染嗎?
首先肉眼觀察培養液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規則,做布朗運動,黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復凍融產生的蛋白沉淀引起的,也可能是細胞的代謝產物。如果黑點大小一致,快速移動,很可能是細菌污染。 全自動細胞計數儀品牌。北京多功能細胞計數儀
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可否使用與原先不同的血清種類?
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞為何生長不均勻?
細胞傳代后放入培養箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養瓶,頻繁開關培養箱引起的振動或者培養瓶中培養液過少,培養箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。 四川應用細胞計數儀比較價格
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