黑點已經產生了,如何進行處理?
如果判定黑點是污染,請及時將細胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進行:如果是懸浮細胞:收集細胞上清慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細胞:將細胞用PBS洗2-3遍,洗的時候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去PBS,消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,讓細胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細胞,將收集的細胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶,并可以嘗試適當增加血清濃度進行培養(yǎng)。 細胞計數儀的型號對比。海南應用細胞計數儀
眾所周知,活細胞密度(VCD)和活率(viability)是評估哺乳動物細胞系生長狀態(tài)的重要指標。生物制藥研發(fā)人員進行懸浮細胞培養(yǎng),每天所不能避免的工作,就是取樣計數。使用細胞計數板進行人工計數無疑是金標準方法。
但這個傳統(tǒng)方法其勞動強度十分驚人,樣品量少的時候還能吃得消,樣品量大一些,甚至于要做大規(guī)模的DOE實驗時,估計很多實驗人員想死的心都會有。而且人工計數有較強的主觀性,對操作人員的經驗及操作熟練度有一定要求,導致有時候數據的重現性和可比性會受到質疑。
拓開細胞計數儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實驗室里高效率,高標準的完成細胞計數和細胞檢測等工作,是您細胞科研領域的強力伙伴。 衢州特點細胞計數儀細胞計數儀的實用性強嗎?
實驗中操作和分析軟件的合規(guī)性
合規(guī)性還是針對于質控(QC)部門、GMP實驗室和生產車間。因為生產的藥物,各個國家對藥物生產都有嚴格的法規(guī)要求,包括GMP和FDA等,要求所測試的數據是可追蹤的,使用儀器的分析軟件有多級用戶權限管理和審計追蹤、電子簽名功能(,以保證測試數據的完整性、安全性和可靠性。
除此之外,大家還需要結合自己的預算,每天要測試的樣品數量,實驗室可放置儀器的空間大小等其他各個方面綜合起來考慮,終選擇一款合適的細胞計數和活率分析儀。
實驗中儀器之間數據的一致性
對于生物制藥公司的工藝開發(fā)和生產質控部門,一般會選擇使用相同的分析儀器,這樣采用相同的分析方法,可以保持上下游測試條件的一致性。另外,不同地區(qū)的生產車間要保持生產質量的一致性,很多時候也會使用同型號的分析儀器,但所使用儀器之間檢測結果的可比性就成了一個考察因素,并且檢測過程中人工操作的影響越小越好,以減少人為操作帶來的誤差。
這樣得到的生物藥質量才可以有保證,這也是為何GMP和FDA等法規(guī)會有這方面的要求。所以,對于生產質控部門采購細胞活率分析儀,這點就特別需要考慮。 全自動細胞計數儀是實驗室必備。
自動化細胞計數和活率分析儀就可以替代傳統(tǒng)的手動計數法,滿足藥物研發(fā)和生產質控的需求。但對于這些自動化的細胞計數和活率分析儀,目前門類也很繁多,如何從中找到適合自己所需的那款呢,
準確性無疑是重要的,我們購買的任何分析儀器,如果不能保證準確性,那就無法正常使用,還不如回到光學顯微鏡+血球計數板純手動的方法。
計數結果的重復性好壞,對全自動細胞計數儀而言,除了取樣要有代表性外,剩下考察的是儀器的穩(wěn)定性和軟件對細胞識別的一致性。目前各家的細胞計數和活率分析儀對細胞的識別都問題不大,除了某些容易團聚的細胞,需要增加一個團聚度參數。 細胞計數儀適用于什么領域?四川推廣細胞計數儀定制價格
全自動細胞計數儀的成本。海南應用細胞計數儀
細胞接種密度多少合適?
依照細胞株基本數據上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經驗:一般倍增時間24 h內的細胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時間24-48 h的細胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
如何預防細胞培養(yǎng)中黑點的產生?
掌握細胞傳代的比較好時機,不要細胞長老了再傳代;掌握好消化時間,防止消化過度產生細胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數;將培養(yǎng)液的PH調到比較好;嚴格控制水質和器皿的清潔。 海南應用細胞計數儀
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