金華正規鼠尾膠原產品介紹

鼠尾膠原類似物的建立：目的：探尋建立類似物的培養方法。方法：原代培養人皮膚成纖維細胞，制備鼠尾膠原，將鼠尾膠原溶液、濃縮培養基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細胞溶液在適當的比例下混合后形成凝膠構建類似物。結果：形成的類似物中成纖維細胞生長狀態良好，并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結論：①利用鼠尾膠原可以構建類似物，該模型是進行皮膚部位型培養和制作復合皮的關鍵與基礎；②成纖維細胞膠原凝膠復合物有著良好的生物學特性，它是研究成纖維細胞與細胞外基質之間以及細胞之間相互作用的良好模型。膠原蛋白是一種蛋白質，能幫助連接皮膚，骨頭和肌腱等身體組織。金華正規鼠尾膠原產品介紹

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul 10×PBS或10×培養液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。杭州鼠尾膠原直銷廠家加到相應的培養器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。

鼠尾膠原蛋白：膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內臟部位外基質的主要成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布較為普遍。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型，I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體，在37℃中性條件下可形成3股螺旋結構，被普遍用于多種細胞的培養基質，如肝細胞、纖維細胞、脊髓神經節、雪旺氏細胞等。另外，I型膠原蛋白在細胞生長、分化、遷移和組織形態的發生等方面也具有重要應用。膠原蛋白I（rat tail tendon collagen type I）根據Birkedal-Hansen方法，經過醋酸（HAc）抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得，可用于制備三維膠，模擬細胞真實的生長環境；也可以用于包被組織培養皿表面，提高細胞表面粘附性，比如培養角質形成細胞、肝細胞等原代細胞。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培養器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉移到培養箱內。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。 B．含細胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會由于 NaOH 不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養液，混勻(混勻后pH 左右，如果 PBS 或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用 pH 試紙測試)。加入 760ul 的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放 20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。 注意事項 型在室溫下pH 中性時可迅速成膠，在操作過程中要 盡量保持低溫。鼠尾肌腱膠原蛋白I（rat tail tendon collagen type I）根據Birkedal-Hansen方法，經過醋酸（HAc）抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得。鼠尾膠原醋酸溶解：不建議用過濾的方法無菌化。

鼠尾膠原包被培養板：胎干細胞在體外可誘導分化為血管內皮細胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細胞來源之一。目的:探討建立定向誘導人胚胎干細胞向血管內皮細胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細胞飼養層上培養人胚胎干細胞H1,將H1細胞團塊轉移到鼠尾膠原包被的培養板,貼壁24-48h后,培養基換為含不同輔助因子和內皮細胞生長添加劑的EGM-2內皮細胞培養基。結果與結論:①在EGM-2內皮細胞培養基誘導下,細胞逐步表達內皮細胞特異性標記基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化細胞表達內皮細胞特異性標記VE-cadherin、CD31。③分化細胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。說明將人胚胎干細胞接種在鼠尾膠原包被培養板上,通過EGM-2內皮培養體系誘導,可直接分化為功能性血管內皮細胞。為研究胞外基質對誘導胚胎干細胞血管內皮細胞分化的作用以及相關信號分子機制打下了基礎。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。鼠尾膠原醋酸溶解：稀釋一定數量的膠原溶液。蕪湖武漢鼠尾膠原

鼠尾膠原醋酸溶解：不要晃動或攪拌。金華正規鼠尾膠原產品介紹

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：膠原蛋白具有抗氧化作用，但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建，對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的：探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法：將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養皿（實驗組）和普通培養皿（對照組）中，并且均用0，10，100μmol/L H2O2誘導。24 h后，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態，應用MTT 比色法檢測心肌細胞存活率，TUNEL 法檢測心肌細胞凋亡形態，流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率，黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平，Western-Blot 檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。金華正規鼠尾膠原產品介紹