鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。3.稀釋一定數量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養瓶。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜。I型膠原蛋白分布非常普遍,是主纖維束的主要成分。長沙鼠尾膠原服務電話
含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul 10xPBS或10x培養液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。長沙鼠尾膠原單價利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。
膠原蛋白(Collagen)是結締組織和內臟部位外基質的主要成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布*為普遍。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型,I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體,在37℃中性條件下可形成3股螺旋結構,被普遍用于多種細胞的培養基質,如肝細胞、纖維細胞、脊髓神經節、雪旺氏細胞等。另外,I型膠原蛋白在細胞生長、分化、遷移和組織態的發生等方面也具有重要應用。注意事項:1) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。2) 整個操作請于冰上進行,因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。3) 整個操作請在無菌環境下無菌操作,避免污染以影響細胞生長。
一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無菌的環境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料。成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,并且制作簡便,成本低廉。
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養皿(實驗組)和普通培養皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態,應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態,流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。結果與結論:兩組培養皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態明顯加重,細胞存活率及細胞內過氧化氫活力明顯下降,細胞凋亡率及細胞內丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對初步處理的鼠尾腱進行酶解。寧波昆明鼠尾膠原
結論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁。長沙鼠尾膠原服務電話
由于精細化學品的難以替代性,其應用范圍不斷向縱深擴張,原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養基,動物疾病模型飛速發展已成為化工行業發展必然趨勢。近十多年來,我國重視精細化學品行業的發展,把精細化學品作為化學工業發展的戰略重點之一。精細化工中間體產品**性強,需要建立特定銷售渠道,能否與客戶保持長期業務合作,將對生產型企業日常經營和長遠發展構成重大影響。精細化工中間體的質量和純度直接影響到終端產品的性能和品質。精細化工產品一般用于工業生產過程的特定領域或實現下游產品的特定功能,因此用戶對產品的質量和穩定性要求較高,對銷售企業甄選過程和標準較為嚴苛,一旦進入供應商名錄將不會輕易更換。與基礎化工行業相比,精細化工行業主要生產精細化學品,是在基礎化學品的基礎上深加工的產物,行業內產品覆蓋了社會生活的各個方面,從涂料、電子、油墨、醫藥、造紙、食品添加劑等,到航空航天、汽車、機械、建筑新材料、新能源技術等高新技術方面均得到非常普遍的應用,在國民經濟的發展中起到了不可替代的作用。由于精細化工產業在國民經濟、地區產業中的重要作用,其發展程度也被視為地區戰略發展的重要部分。長沙鼠尾膠原服務電話
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