無血清細胞凍存液與傳統細胞凍存液比較及優勢:1.傳統細胞凍存液只適用于含血清細胞的凍存,但并不適用于無血清培養的細胞,例如一些CIK細胞等,而無血清細胞凍存液即適用于含血清細胞的凍存,又適用于無血清細胞的凍存,是一種通用型細胞凍存液,通用于各種動物細胞株;2.傳統細胞凍存液含10%胎牛血清,因血清是動物源性成份,因此病毒、霉菌和支原體等污染的風險很高,而無血清細胞凍存液因不含血清,只含DMSO、葡萄糖等營養成份,較大降低了動物血清來源病毒、霉菌和支原體等污染的風險,確保凍存細胞的安全;3.傳統細胞凍存液含血清,但動物血清成分復雜,個體差異大,且生產來源不穩定,因此批次間質量常常不穩定,這導致培養細胞的狀態也會受到影響,而無血清細胞凍存液成分和配比明確,批次間差異很小,能夠保證生長細胞狀態的穩定性,細胞存活率高。無血清凍存液用途:無血清細胞凍存液用于醫院樣本庫細胞樣本保存。蕪湖無血清細胞凍存液廠家推薦
無血清細胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1)按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2)按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3)取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4)加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5)將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6)直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,長期冷凍保存。杭州無血清細胞凍存液供應商同時另一些保護劑不能穿透細胞。
細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內冰晶的產生,從而使細胞產生內源性的機械損傷,引起細胞內環境滲透壓,PH,電解質等的改變,進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中,科研工作者將培養基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉移使其達到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲存時間一般比較短,不能滿足時間跨度大的實驗項目的需求。且這樣人力和時間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實驗結果帶來了不穩定性。
干細胞無血清凍存液操作事項:使用說明:1. 細胞消化和計數,用胰酶對待凍存的細胞進行消化,并對細胞進行計數。2. 1000轉/min離心5分鐘(4℃),去掉上清。3. 根據細胞計數的情況,加入適量的干細胞無血清凍存液,使細胞密度在1×106左右(或根據自己希望達到的細胞密度)。4. 輕輕地重懸細胞(務必重懸均勻)。5. 將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管(需提前做好標記或者貼上標簽)中,旋緊凍存管蓋。6. 將凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒直接放入-80℃。7. 第二天將細胞從-80℃轉移到液氮中。注意事項:1.用處于對數生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間,切記消化過度,會影響復蘇效果。3.重懸細胞的過程中,請務必要輕柔,以免損傷細胞,但同時也一定要充分重懸,這樣細胞在復蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。無血清細胞凍存液產品性能:2-8℃即可穩定保存,無需冷凍,即取即用。
含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1. 凍存細胞時需現配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)。2. 需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力。3. 含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。4. 血清批次、品質間差異導致凍存液的批次間差異。5. 需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。Cellregen無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。Cellregen無血清細胞凍存液的凍存方法是:將細胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱長期保存。無血清凍存液使用方法:儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。南昌正規無血清細胞凍存液平均價格
待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合。蕪湖無血清細胞凍存液廠家推薦
新常態下細胞凍存指南:細胞凍存技術其重要意義無論怎么估計也不為過。有了高效的凍存復蘇技術,我們能把珍貴的樣本保存起來建立各種生物樣本庫,能夠建立骨髓庫、臍血庫挽救生命,當然也能在**發生的時候把樣本凍存。細胞凍存技術和我們的日常生活也息息相關。例如IVF 體外受精技術,精子庫與胚胎的冷凍,以及臍帶血的凍存,都離不細胞開凍存技術。缺點是血清批間差不穩定,導致的每次凍存復蘇的效果無法保證,同時也無法應用于多種細胞類型,尤其是嬌貴的干細胞,血清成分復雜可能會導致干細胞的分化,不利于后期的實驗。因此大多數研究者喜歡商品化的無血清細胞凍存液,商品化的無血清凍存液經過了廠家對多種細胞品系的優化,效果可靠,操作簡便。不同的細胞,適合的凍存液也不同,需要根據細胞的類型進行選擇。蕪湖無血清細胞凍存液廠家推薦