合肥鼠尾膠原

膠原蛋白的提取方法：酶法提取：酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解，水解條件溫和，反應速率快，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構，蛋白純度高，理化性質穩定，且無環境污染。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法，即利用酶液直接提取；二步法，即先用酸或者堿進行初步提取，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預處理革屑，然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產物。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白，探討了酶和酶的加入量對提取結果的影響，給出了酶對膠原提取較佳工藝配比，酶與牛腱的質量比為0.1時效果較佳，而使用無花果蛋白酶時，0.01的配比較佳。探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果。合肥鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養液，轉移到培養箱中培養。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。廈門鼠尾膠原價格鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便。

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優點：1、本發明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產效率，同時避開了使用其他設備帶來的成本上升問題。2、本發明專利生產的止血材料(止血海綿)，其動物實驗表明其具有非常好的止血效果。也可應用于內臟出血。具有廣闊的應用前景。3、本發明制備的止血材料具有可完全被人體吸收，與出血創面一接觸，其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血創面上，外面則形成連續的壓迫干層。啟動凝血因子。同時，聚乙烯醇為成膜材料，兩種的協同效應形成了一種理想的止血狀態和結構。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養器皿，培養一些在普通細胞培養器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠，模擬真實的生長環境，使細胞在三維環境中生長。1，在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長。1mg/ml濃度以上，pH左右時可形成具有一定強度的三維膠，檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內正常生長、PC-12細胞在三維膠表面正常生長。使用方法：1、細胞培養器皿的表面包被推薦濃度：1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應的培養器皿中。制備鼠尾膠原：將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡。

利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白，并重構成膠原纖維。然后，將重構后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d，通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構成膠原纖維，并且具有特征性的D-Band結構。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維，膠原纖維部分礦化；礦化6d后，膠原纖維內部完全礦化，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構成膠原纖維，經礦化可形成與人類自體骨組織化學成分和分子結構一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。成都鼠尾膠原供應商

鼠尾膠原醋酸溶解：在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。合肥鼠尾膠原

鼠尾膠原簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備，純度達到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養皿的包被，特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養；也可用于制備三維膠原凝膠，使細胞在模擬的三維環境中生長。質量標準：1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細胞培養皿后培養PC-12細胞，貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL，pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠，NIH-3T3細胞在三維凝膠內生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。合肥鼠尾膠原