染色的一般原則:因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導處理的細胞做單陽對照,進行熒光補償的調節。標記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發光:488nm發射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發光488nm發射光575nm,此熒光的激發效率較佳,故此熒光得到的信號較強;檢測某些弱表達的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發光633nm,發射光660nm,在配有雙激光的流式細胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細胞儀相關試劑盒。細胞核、染色體以及基因表達的研究。山東口碑好的糖原染色試劑盒單價
糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內容十分普遍,主要包括。①細胞核、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究。③細胞骨架體系的研究。④細胞增殖及其調控。⑤細胞分化及其調控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化。⑧細胞工程。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質,因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質和某些酸性物質,以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強氧化劑。浙江哪家提供糖原染色試劑盒生產廠家加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結合,紅色,定位于胞漿上。3、應用隨著醫學實驗技術的發展,糖原染色應用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等
醫院檢驗中心糖原染色操作規程:1.雪夫氏試劑:400m1蒸餾水煮沸除去C02,逐漸加堿性品紅2.08溶解后,待冷卻至60℃,加1mm01兒HCl40ml,再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后過濾。配好后液體為無色透明,保存于4℃冰箱中。2.過碘酸作用液:過碘酸1g溶于蒸餾水100ml中,或取過碘酸鉀(1tI04)0。698加蒸餾水100ml,微加熱使溶解,再加濃硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml與甲醛10m1混勻。4.20g/l甲基綠:甲基綠2g溶于100m1蒸餾水。[操作]_x005f_x005f_x005f_x000c_(1)新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內10分鐘。(2)水洗數次后,對照片先用唾液消化30分鐘,也可在同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對照,另一半做測定。(3)水洗后,滴加過碘酸數滴于涂片上,作用10分鐘后,再水洗數次。切取材料時刀要銳利,避免因擠壓細胞使其受到損傷。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。可以觀察腎小球基底膜、結腸杯狀細胞中性黏液物質、阿米巴滋養體和霉菌的著色。福建哪家提供糖原染色試劑盒廠家現貨
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糖原染色(過碘酸-雪夫反應)原理多糖中乙二醇基經過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結果:胞漿中出現彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x005f_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細胞的染色反應粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細胞-血小板系統:PAS反應呈粗大的紫色顆粒或團塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應,以彌散性為主;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應山東口碑好的糖原染色試劑盒單價