合肥正規外泌體提取試劑生產廠家

來源: 發布時間:2023-04-04

外泌體(exosome)是所有細胞釋放出的細菌大小的顆粒。它們天然地存在于血液中。根據來自美國德州大學MD安德森一些疾病中心的一項新的研究,對外泌體進行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學系研究員RaghuKalluri博士。在這項新的研究中,經過基因修飾的外泌體(被稱作iExosome)能夠運送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,從而導致胰腺病模式小鼠病情緩解,增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾(RNAi)的靶向方法:利用這些天然的納米顆粒(即外泌體)運送小干擾RNA(siRNA)或短發夾RNA(shRNA)分子來靶向胰腺病細胞中的KRAS突變基因,從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負荷和存活。他們證實外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發揮作用,這是因為這些納米大小的囊泡(即外泌體)輕松地在體內遷移和進入靶細胞(包括病細胞)中。形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統,影響細胞的生理狀態并與多種疾病的發生與進程密切相關。合肥正規外泌體提取試劑生產廠家

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外泌體是細胞間進行物質運輸和信息交流的重要工具,可以通過調節免疫功能促進一些病癥的增殖,血管新生和一些病癥轉移。與細菌傳染,幫助細菌逃避免疫關系很大,并與心血管疾病,老年癡呆等疾病具有密切關系。外泌體可通過流式、WB(檢測指標有CD9,CD63,CD81)、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測,普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker、精細醫療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小,樣本含量低,提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等。但到目前為止,仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性。北京正規外泌體提取試劑進貨價外泌體提取:在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續分布的密度階層。

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外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項:1.對于待測樣品粘度過大時,可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白(CD63,CD9,CD81等)進行Westernblot檢測,可以鑒定所提的外泌體。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。

外泌體的提取分離:1、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質,利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法。2、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。外泌體提取的方法:過濾。

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外泌體的提取方法:1、色譜法。色譜法是利用根據凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質進行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先被流動相洗脫出來;小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強地滯留,更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質,利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法。外泌體提取:超離法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行。南京正規外泌體提取試劑

外泌體提取:尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子。合肥正規外泌體提取試劑生產廠家

外泌體的提取方法:1.超速離心法(差速離心)。超離法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行,可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎,但過程比較費時,且回收率不穩定(可能與轉子類型有關),純度也受到質疑;此外,重復離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質量。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續分布的密度階層,是一種區帶分離法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時,對離心時間極為敏感。合肥正規外泌體提取試劑生產廠家

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