脂質體成功降低了綠色熒光蛋白(GFP)的表達,并在H4II-E和HepG2細胞中顯示出較低的細胞毒性。在其他研究中,精氨酸衍生物N,N-distearyl-N-methyl-N-2-(N’-arginyl)aminoethylammoniumchloride被...
超聲聯合納米微泡遞送RNA。YinT.等利用異源組裝方法制備了攜帶siRNA的**納米微泡,利用超聲照射靶向SIRT2基因抗細胞凋亡。該制劑改善了siRNA-納米微泡對基因組的沉默作用,從而***改善了*細胞的凋亡。因此,在裸嚙齒動物的膠質瘤變體中觀察到顯著增...
所需的CY3-NHS酯的量取決于待標記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設所需的標記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL...
1.DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細胞膜染色液制備(1)配置DMSO或EtOH儲存液:儲存液用DMSO或EtOH配置濃度1~5mM。注意:未使用的儲存液保存在-20°C,避免反復凍融。(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS或P...
目前,有3家微泡廠家生產的產品可用于心臟病學應用,分別是Optison(GE Healthcare,Milwaukee,WI,),Definity(Lantheus Medical Imaging,Billerica,MA,E)和SonoVue(BraccoS...
遞送核酸的脂質體中的脂質成分脂質體的脂質組成可以影響陽離子脂質的結構性質及其轉染效率。由3β[N(N',N'Dimethylaminoethane)carbamoyl]cholesterol,(DC-Chol)和DOPE組成的陽離子脂質體被認為是高效基因傳遞的...
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度**增強,這類染料有著很高的淬滅常數和激發態壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它...
商業脂質體產品,包括Visudyne和AmBisome,使?這種?法制造。MLV懸浮液在?壓下通過?個狹窄的間隙,通過剪切?、湍流和速度梯度產?的流體空化?被分解,然后重新排列成更?的脂質體。顆粒??和粒度分布由均質過程的參數決定,如壓?、處理周期、閥?和沖擊...
熒光標記的靶向微泡在非心臟病血管的應用。使用熒光微泡可以通過***顯微鏡實現超聲造影劑靶向的驗證。特異性配體包括抗p選擇素的抗體,該抗體可通過局部給藥腫瘤壞死因子(TNF)-進行化學誘導。通過顯微鏡和超聲觀察到***后小靜脈內抗p選擇靶向氣泡和白細胞的聚集。缺...
超聲聯合納米微泡遞送RNA。YinT.等利用異源組裝方法制備了攜帶siRNA的**納米微泡,利用超聲照射靶向SIRT2基因抗細胞凋亡。該制劑改善了siRNA-納米微泡對基因組的沉默作用,從而***改善了*細胞的凋亡。因此,在裸嚙齒動物的膠質瘤變體中觀察到顯著增...
**近的另一項研究表明,全身遞送攜帶**抑制因子miRNA的陽離子脂質體具有*****的潛力。MiRNA-34a是p53轉錄網絡的一個組成部分,可調節**干細胞存活,因此被選為**抑制因子,而miR-143/145簇已知可抑制KRAS2及其下游效應物ras- ...
4PEG2000在脂質體中的作用 PEG2000是一種聚乙二醇(PEG)衍生物,常用于脂質體的表面修飾。它在脂質體中具有多種作用:1.穩定性增強:PEG2000可以在脂質體表面形成一層穩定的水合層,防止脂質體的聚集和沉淀,從而提高其在溶液中的穩定性。...
脂質體的粒徑和粒徑分布脂質體的整個藥代動?學過程,如全?循環和MPS***、外滲到組織間質、細胞外基質間質運輸以及細胞攝取和細胞內運輸,都是依賴于尺?的。粒徑<200nm的顆粒可降低?清蛋?的調理作?,降低MPS的***率。在????病模型中,對于Myocet...
轉染試劑的凍融被認為是另一個可能影響轉染效率的潛在因素。Lipofectamine2000試劑與非冷凍對照相比,至少經歷一次凍融循環后,HEK293、Neuro2α、C2C12成肌細胞和肌管、hTERTMSC、SMA和HepG2細胞系的轉染效率更高,且細胞活力...
脂質體的穩定性和儲存是確保其在制備后能夠長期保持其結構完整性和功能性的重要方面。以下是確保脂質體穩定性和適當儲存的一些關鍵考慮因素:1.溫度控制:脂質體通常對溫度敏感,因此在儲存和運輸過程中需要嚴格控制溫度。通常,脂質體應存儲在冰箱或冷凍條件下,避免高溫和凍結...
脂質體共價連接藥物-脂質偶聯載***式通過連接劑將藥物分?與脂質共價連接是另?種在脂質體內裝載藥物的有效策略,例如Mepact。MDP是主要?蘭?陽性菌細胞壁的組成部分,具有****應答的作?。由于MDP是?溶性低分?量分?,其脂質體在儲存過程中存在包封效率低...
脂質體靶向遞送中RGD配體修飾盡管陽離子脂質體具有在體內遞送核酸的潛力,但其遞送到特定靶點仍然是一個主要挑戰。為了增強攜帶核酸的陽離子脂質體在靶組織中的分布,研究人員用多肽和小分子修飾了脂質體表面。例如,研究了Arg-Gly-Asp(RGD)肽修飾的脂質體增強...
脂質體靶向遞送中RGD配體修飾盡管陽離子脂質體具有在體內遞送核酸的潛力,但其遞送到特定靶點仍然是一個主要挑戰。為了增強攜帶核酸的陽離子脂質體在靶組織中的分布,研究人員用多肽和小分子修飾了脂質體表面。例如,研究了Arg-Gly-Asp(RGD)肽修飾的脂質體增強...
固體脂質納米顆粒和納米結構脂質載體雖然脂質體作為藥物載體是有用的,但它們需要使用有機溶劑的復雜生產方法,在包裹藥物方面表現出低效率,并且難以大規模執行。固體脂質納米顆粒(SLN)和納米結構脂質載體(NLC)的開發是為了解決這些缺點。傳統的脂質體由液晶脂質雙層組...
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度**增強,這類染料有著很高的淬滅常數和激發態壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它...
基于病毒的轉染,或者更具體地稱為轉導,涉及使用病毒載體將特定的核酸序列帶入宿主細胞。逆轉錄病毒,如慢病毒,通常用于穩定轉染。相比之下,腺病毒、腺相關病毒(AAV)和皰疹病毒是不能保證穩定轉染的病毒載體。與非病毒轉染相比,病毒轉導被***認為是一種轉染難以轉染的...
在轉染中,DNA通常通過病毒或非病毒載體(如質粒)轉運到宿主細胞中。質粒的基本結構包括啟動子、復制起點、多個克隆位點、目標基因和選擇標記。質粒復制需要復制的起源,而多個克隆位點包含獨特的內切酶切割位點,用于插入外源基因。適當的真核啟動子(如CMV或EF-1a)...
遞送***水平的藥物或***性基因遞送尚未證明靜脈注射與臨床相關濃度的微泡。大鼠心臟基因轉染使用1毫升靜脈注射超聲造影劑,濃度約為1×109微泡/ml。將***性基因有效遞送到大鼠胰腺的方法是,在外殼內注射1毫升含有該基因的微泡,注射濃度為5×10...
PEI的分子量對細胞毒性和基因轉移活性有影響。由于PEI在細胞內不可降解,所以分子量越高,細胞毒性越強。此外,具有較高分子量的PEI形成更穩定的聚合物,使其更容易轉染,但更難在細胞內釋放核酸。另一方面,PEI產生的復合物分子量降低,更難以轉染;但它更容易釋放核...
脂質復合物又稱陽離子脂質-核酸復合物(CLNACs),是由非離子核酸與陽離子脂質體(CLs)表面結合,**終形成多層脂質-核酸復合物而形成的。帶負電荷的核酸被吸引到帶正電荷的囊泡表面,**初與停靠在陽離子囊泡表面的核酸分子形成復合物,然后發展到核酸分子持續粘在...
與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機染料。熒光素的比較大吸收波長為494nm,比較大發射波長為521nm(通常吸收藍色范圍內的光并發射綠色范圍內的光),熒光素是一種高熒光物質。即使在非常少量的情況下也可以檢測到它,并且在與抗體結合時用于顯微鏡檢查。熒光素...
基因和RNAi***在臨床上的應用需要安全高效的載體。迄今為止,核酸***的兩種主要方法是基于病毒和非病毒載體。與病毒載體相關的安全問題有很多:誘導免疫反應的風險、不必要的突變和**。因此,在開發基于脂質或聚合載體的非病毒載體是勢在必行的。1965年,Vahe...
人類原代干細胞是另一種公認的難以轉染的細胞類型,轉染這種細胞類型的比較大挑戰仍然是效率低和細胞活力低。2015年,王等報道了Lipofectamine 2000和XtremeGENE HP等轉染試劑在人牙周韌帶干細胞中的轉染效率非常低(<6%),而陽性對照慢病...
熒光標記的靶向微泡在非心臟病血管的應用。使用熒光微泡可以通過***顯微鏡實現超聲造影劑靶向的驗證。特異性配體包括抗p選擇素的抗體,該抗體可通過局部給藥腫瘤壞死因子(TNF)-進行化學誘導。通過顯微鏡和超聲觀察到***后小靜脈內抗p選擇靶向氣泡和白細胞的聚集。缺...
PEI的分子量對細胞毒性和基因轉移活性有影響。由于PEI在細胞內不可降解,所以分子量越高,細胞毒性越強。此外,具有較高分子量的PEI形成更穩定的聚合物,使其更容易轉染,但更難在細胞內釋放核酸。另一方面,PEI產生的復合物分子量降低,更難以轉染;但它更容易釋放核...