實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀(qPCR 儀)憑借其能夠在 PCR 擴(kuò)增過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)變化,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目的基因精細(xì)定量的特點(diǎn),在多個(gè)領(lǐng)域都有較廣且重要的應(yīng)用。qPCR的高靈敏度使其能對(duì)微量生物樣本(如血液、毛發(fā)、唾液、精斑等)進(jìn)行檢測(cè),在個(gè)體識(shí)別、親子鑒定等方面發(fā)揮重要作用。個(gè)體識(shí)別:通過擴(kuò)增樣本中特異性的短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)并定量分析,與已知樣本比對(duì),實(shí)現(xiàn)個(gè)體的精細(xì)識(shí)別,廣泛應(yīng)用于刑事案件偵破和災(zāi)難事故中的身份確認(rèn)。親子鑒定:基于親代與子代基因序列的遺傳規(guī)律,通過定量分析特定基因標(biāo)記的匹配程度,確定親子關(guān)系,結(jié)果準(zhǔn)確性可達(dá)99.99%以上。RePure-(D)B梯度功能的應(yīng)用為實(shí)驗(yàn)提供...
放入 PCR 儀:將配置好的反應(yīng)管放入基因擴(kuò)增儀 PCR 儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。設(shè)置擴(kuò)增程序:一般包括預(yù)變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預(yù)變性步驟通常在 94℃-95℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時(shí)間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據(jù)引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時(shí)間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結(jié)合;延伸溫度通常為 72℃,時(shí)間根據(jù)擴(kuò)增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,確保所有擴(kuò)增產(chǎn)物延伸完整。循環(huán)次數(shù)一般...
啟動(dòng)反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無誤后,啟動(dòng) qPCR 程序,儀器自動(dòng)運(yùn)行并實(shí)時(shí)顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對(duì)表達(dá)量(相對(duì)定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說明擴(kuò)增特異性良好;若有雜峰,需排查引物或反應(yīng)條件問題。 污染防控(重點(diǎn))核酸污染:嚴(yán)格分區(qū)操作:將試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR 擴(kuò)增區(qū)分開,避免交叉污染。使用濾芯吸頭,每次加樣后更換吸頭,避免移液器接觸樣本或試劑瓶口。定期用 10% 次氯酸鈉或 DNA 酶清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器和儀器樣品槽,紫外燈照射消毒操作區(qū)(30 分鐘以上)。試劑污染:試劑...
快速檢測(cè)沙門氏菌:沙門氏菌是常見的食源性致病菌,可引發(fā)食物中毒等疾病。利用 PCR 儀,針對(duì)沙門氏菌的特定基因序列設(shè)計(jì)引物,能快速從食品樣本中擴(kuò)增出相關(guān)基因片段,從而判斷食品中是否存在沙門氏菌。相比傳統(tǒng)檢測(cè)方法,縮短了檢測(cè)時(shí)間,提高了檢測(cè)效率。檢測(cè)大腸桿菌 O157:H7:大腸桿菌 O157:H7 是一種具有強(qiáng)致病性的菌株,能產(chǎn)生志賀樣,對(duì)人體健康危害極大。通過 PCR 技術(shù)檢測(cè)其特異性基因,如 stx1、stx2 等基因和 eaeA 毒力島基因等,可準(zhǔn)確判斷食品中是否含有該病菌,有效保障食品安全。檢測(cè)李斯特菌:李斯特菌在環(huán)境中廣存在,能在低溫下生長繁殖,常污染乳制品、肉類等食品。運(yùn)用 PCR...
反應(yīng)體系配制與加樣體系配制:按比例在離心管中混合各組分(先加非模板試劑,***加模板,避免污染),輕輕混勻(勿劇烈震蕩),短暫離心(1000-2000 rpm,10-20 秒)使液體沉底。示例(20μL 體系):qPCR Mix 10μL + 上游引物(10μM)0.8μL + 下游引物(10μM)0.8μL + 模板 2μL + 無菌水 6.4μL(探針法需額外加探針)。加樣:將配制好的體系逐一加入 96 孔板的對(duì)應(yīng)孔中,避免產(chǎn)生氣泡(若有氣泡,用吸頭刺破)。加樣后用封板膜密封(確保無褶皺、無漏液),短暫離心(500-1000 rpm,30 秒),使液體聚集在孔底,避免掛壁。RePure-A...
梯度 PCR 儀是一種具備多溫度梯度功能的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀器,其**優(yōu)勢(shì)在于可在同一反應(yīng)板上設(shè)置不同的溫度梯度(如橫向或縱向溫度梯度),允許用戶同時(shí)優(yōu)化多個(gè)退火溫度或其他循環(huán)參數(shù),***提升實(shí)驗(yàn)效率。這類儀器廣泛應(yīng)用于引物優(yōu)化、條件摸索和復(fù)雜擴(kuò)增反應(yīng),是科研與方法開發(fā)的關(guān)鍵工具。. 溫度梯度功能實(shí)現(xiàn)方式:通過半導(dǎo)體加熱模塊或金屬導(dǎo)熱板的分區(qū)控溫,在反應(yīng)板的不同孔位間形成線性溫度梯度(如 30℃~70℃,梯度范圍可達(dá) 40℃)。例:橫向梯度模式下,第 1 列孔為 50℃,第 12 列孔為 60℃,中間列按 0.5℃/ 列遞增,一次性測(cè)試 12 個(gè)不同退火溫度。優(yōu)勢(shì):無需重復(fù)實(shí)驗(yàn)即可篩選比較好溫度...
功能拓展與兼容性:適配實(shí)驗(yàn)流程:1. 附加功能熒光檢測(cè)模塊:若需定量分析(如基因表達(dá)量、病原體載量),需選擇 qPCR 儀,內(nèi)置熒光通道(如 FAM、VIC、ROX 等),支持實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增曲線。自動(dòng)化接口:**機(jī)型可對(duì)接機(jī)器人工作站,實(shí)現(xiàn) “樣本提取 - 體系配置 - PCR - 產(chǎn)物分析” 全流程自動(dòng)化,適合高通量測(cè)序前處理。2. 試劑與耗材兼容性支持不同品牌試劑(如 Taq 酶、高保真酶、PCR Mix)及耗材(0.2mL 管、半裙邊 / 全裙邊 96 孔板),避免因耗材不匹配導(dǎo)致密封性差或加熱效率低。支持多重?zé)晒鈾z測(cè),能夠同時(shí)監(jiān)測(cè)多個(gè)靶標(biāo),提升實(shí)驗(yàn)的通量和效率。南京32孔基因擴(kuò)增儀PCR...
轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)應(yīng)用:擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因(如抗蟲基因Bt、抗除草劑基因EPSPS),用于安全性評(píng)估和監(jiān)管篩查。案例:歐盟法規(guī)要求對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行 PCR 定性檢測(cè)。2. 作物育種與品種鑒定應(yīng)用:利用 SSR(簡單序列重復(fù))、AFLP(擴(kuò)增片段長度多態(tài)性)等分子標(biāo)記技術(shù),輔助選育抗病、抗逆品種,或鑒定種子純度。案例:通過 PCR 擴(kuò)增特定品種的特征性 DN**段,區(qū)分雜交種與常規(guī)種。3. 畜禽疫病檢測(cè)應(yīng)用:檢測(cè)動(dòng)物病原體(如非洲豬瘟病毒、禽流感病毒)的核酸,用于疫病防控和檢疫。RePure-A的應(yīng)用場景極為廣闊,適用于基因表達(dá)分析、遺傳病檢測(cè)、微生物學(xué)研究等多個(gè)領(lǐng)域。江蘇雙槽基因擴(kuò)...
1. DNA 指紋分析應(yīng)用:擴(kuò)增人類基因組中的短串聯(lián)重復(fù)序列(STR),如 D21S11、TH01 等位點(diǎn),用于個(gè)體識(shí)別、親子鑒定和犯罪現(xiàn)場證據(jù)分析。案例:通過 PCR - 毛細(xì)管電泳技術(shù)構(gòu)建 DNA 圖譜,比對(duì)嫌疑人和現(xiàn)場生物樣本(如血跡、毛發(fā))。2. 物種鑒定應(yīng)用:擴(kuò)增動(dòng)物或植物的特定基因(如細(xì)胞色素 C 氧化酶亞基 I 基因,COI),鑒別瀕危物種或非法貿(mào)易中的生物來源。案例:檢測(cè)**象牙中的大象 DNA,打擊野生動(dòng)物非法交易。1. 食品微生物檢測(cè)應(yīng)用:檢測(cè)食品中的致病菌(如沙門氏菌、大腸桿菌 O157:H7)或過敏原基因(如花生、大豆過敏原蛋白基因),保障食品安全。案例:通過實(shí)時(shí)熒光定...
放入 PCR 儀:將配置好的反應(yīng)管放入基因擴(kuò)增儀 PCR 儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。設(shè)置擴(kuò)增程序:一般包括預(yù)變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預(yù)變性步驟通常在 94℃-95℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時(shí)間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據(jù)引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時(shí)間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結(jié)合;延伸溫度通常為 72℃,時(shí)間根據(jù)擴(kuò)增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,確保所有擴(kuò)增產(chǎn)物延伸完整。循環(huán)次數(shù)一般...
精細(xì)識(shí)別:PCR 技術(shù)可針對(duì)轉(zhuǎn)基因成分中特定的基因序列設(shè)計(jì)引物,如啟動(dòng)子、終止子、目的基因等獨(dú)特的 DNA 碎片。這些引物能夠精細(xì)地與目標(biāo)基因序列結(jié)合,只對(duì)轉(zhuǎn)基因成分中的特定片段進(jìn)行擴(kuò)增,而不會(huì)對(duì)其他非目標(biāo)基因或生物體的 DNA 產(chǎn)生作用,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)轉(zhuǎn)基因成分的精細(xì)檢測(cè),有效區(qū)分轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因樣本。避免誤判:引物與目標(biāo)基因之間的特異性結(jié)合是基于堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,具有高度的精確性。只要引物設(shè)計(jì)合理,就能準(zhǔn)確地識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)轉(zhuǎn)基因序列,極大地降低了誤判的可能性,提高了檢測(cè)結(jié)果的可靠性。靈活的溫度設(shè)置,使得RePure-A特別適合于復(fù)雜樣本的檢測(cè)與多重靶標(biāo)的擴(kuò)增。無錫單槽基因擴(kuò)增儀PCR儀價(jià)格多少...
放入 PCR 儀:將配置好的反應(yīng)管放入基因擴(kuò)增儀 PCR 儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。設(shè)置擴(kuò)增程序:一般包括預(yù)變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預(yù)變性步驟通常在 94℃-95℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時(shí)間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據(jù)引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時(shí)間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結(jié)合;延伸溫度通常為 72℃,時(shí)間根據(jù)擴(kuò)增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,確保所有擴(kuò)增產(chǎn)物延伸完整。循環(huán)次數(shù)一般...
定性基因擴(kuò)增儀(PCR 儀)是分子生物學(xué)領(lǐng)域用于實(shí)現(xiàn)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的設(shè)備,其通過精確控制溫度循環(huán),使 DN段在體外實(shí)現(xiàn)指數(shù)級(jí)擴(kuò)增,為基因檢測(cè)、疾病診斷、科研等提供關(guān)鍵技術(shù)支持。PCR的原理是利用DNA的熱變性、復(fù)性及延伸特性,通過循環(huán)控溫實(shí)現(xiàn)DNA擴(kuò)增,具體過程如下:變性階段:將反應(yīng)體系加熱至94-96℃,使雙鏈DNA解旋為單鏈。退火階段:降溫至50-65℃,讓引物與單鏈DNA的特定區(qū)域互補(bǔ)結(jié)合。延伸階段:升溫至72℃左右,DNA聚合酶以引物為起點(diǎn),沿模板鏈合成新的DNA鏈。循環(huán)重復(fù):上述三步為一個(gè)循環(huán),通常進(jìn)行25-40次,使目標(biāo)DNA片段以2?的倍數(shù)擴(kuò)增(n為循環(huán)數(shù))。RePur...
精確含量測(cè)定:熒光定量 PCR 技術(shù)作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉(zhuǎn)基因成分,還可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或相對(duì)定量法等手段,對(duì)轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行精確的定量分析,準(zhǔn)確測(cè)定樣本中轉(zhuǎn)基因成分的含量,為轉(zhuǎn)基因生物的監(jiān)管、標(biāo)識(shí)管理以及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等提供更詳細(xì)、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。滿足法規(guī)要求:在食品安全管理和國際貿(mào)易中,許多法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)轉(zhuǎn)基因成分的含量有明確的規(guī)定和限量要求。PCR 儀的定量分析功能能夠幫助檢測(cè)機(jī)構(gòu)和企業(yè)準(zhǔn)確判斷產(chǎn)品是否符合相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn),確保產(chǎn)品的合規(guī)性。RePure系列PCR儀采用了梯度溫控技術(shù),能夠在實(shí)驗(yàn)中準(zhǔn)確調(diào)節(jié)溫度梯度,可以輕松地優(yōu)化PCR反應(yīng)條件。江蘇單槽基因擴(kuò)增...
梯度基因擴(kuò)增儀(PCR 儀):精細(xì)控溫與均勻性孔間溫差:梯度模式下相鄰孔位溫差≥0.5℃(具體取決于儀器型號(hào)),非梯度模式下孔間溫度均勻性≤±0.1℃,保證常規(guī)擴(kuò)增的一致性。升降溫速率:主流機(jī)型可達(dá) 3-5℃/ 秒,快速機(jī)型支持 6-8℃/ 秒,縮短單循環(huán)時(shí)間。 兼容性與擴(kuò)展性樣本容量:支持 96 孔板、48 孔板、0.2ml 單管 / 八聯(lián)管,部分機(jī)型兼容 384 孔板(適合超微量高通量實(shí)驗(yàn))。技術(shù)適配:除普通 PCR 外,可用于巢式 PCR、長片段 PCR、多重 PCR等對(duì)溫度敏感的反應(yīng)。Q9604還具備數(shù)據(jù)管理和分析軟件,可以快速生成實(shí)驗(yàn)報(bào)告,方便進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析與共享,促進(jìn)合作研究的開展...
農(nóng)業(yè)與種業(yè):精細(xì)育種與作物保護(hù):1. 轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)場景:檢測(cè)作物中是否含外源基因(如抗蟲 Bt 基因、抗除草劑 EPSPS 基因),用于監(jiān)管合規(guī)性篩查(如進(jìn)出口農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè))。技術(shù)價(jià)值:通過 PCR 擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因載體的啟動(dòng)子(如 CaMV 35S)、終止子(如 NOS)或目的基因,區(qū)分轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因品種。設(shè)備需求:便攜式 PCR 儀(田間快速檢測(cè))+ 常規(guī)實(shí)驗(yàn)室高通量機(jī)型(批量樣本篩查)。2. 作物品種鑒定與抗病育種場景:種子純度檢測(cè)(如水稻品種 SSR 標(biāo)記分析)、抗病基因篩選(如小麥抗銹病基因 Lr34 的分子標(biāo)記輔助育種)。技術(shù)價(jià)值:利用 PCR 擴(kuò)增特異性分子標(biāo)記(如 SSR、SNP)...
96 孔 PCR 儀是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的儀器,通過 96 孔反應(yīng)板實(shí)現(xiàn)一次性處理 96 個(gè)樣本的基因擴(kuò)增,適用于高通量檢測(cè)場景。其設(shè)計(jì)**是通過精確控溫(加熱、冷卻、恒溫)實(shí)現(xiàn) DNA 的變性、退火、延伸循環(huán),廣泛應(yīng)用于科研、臨床、農(nóng)業(yè)、司法等領(lǐng)域。臨床與醫(yī)學(xué)檢測(cè)大規(guī)模病原體篩查應(yīng)用:、流感病毒、HPV 等傳染病的批量檢測(cè)(如醫(yī)院檢驗(yàn)科、疾控中心)。案例:**期間,96 孔 PCR 儀配合自動(dòng)化移液工作站,單日可完成數(shù)千份樣本的核酸提取與擴(kuò)增。遺傳疾病批量診斷應(yīng)用:同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣本的致病基因突變(如地中海貧血、脊髓性肌萎縮癥)。RePure-(D)B梯度功能的應(yīng)用可有效減少...
定性基因擴(kuò)增儀(PCR 儀)憑借其高靈敏度和特異性的基因檢測(cè)能力,在多個(gè)行業(yè)中承擔(dān)著關(guān)鍵角色。1. 基因克隆與功能研究場景:目的基因的擴(kuò)增、載體構(gòu)建(如將目標(biāo)基因插入質(zhì)粒)、基因突變(點(diǎn)突變、缺失突變)驗(yàn)證。技術(shù)價(jià)值:通過 PCR 擴(kuò)增目的基因片段,結(jié)合酶切、連接等操作,實(shí)現(xiàn)基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)研究(如蛋白功能分析)。設(shè)備需求:梯度 PCR 儀(優(yōu)化引物退火溫度)+ 低通量模塊(8 聯(lián)管),便于多條件實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。2. 分子進(jìn)化與群體遺傳學(xué)場景:物種親緣關(guān)系分析(如擴(kuò)增 16S rRNA 基因研究微生物進(jìn)化)、種群基因頻率檢測(cè)(如人類 HLA 基因多態(tài)性分析)。技術(shù)價(jià)值:通過 PCR 產(chǎn)物測(cè)序,...
溫度與反應(yīng)體系控制溫度準(zhǔn)確性:定期校準(zhǔn)儀器(由專業(yè)人員進(jìn)行),確保變性、退火溫度精細(xì)(偏差超過 ±0.5℃會(huì)影響結(jié)果)。體系一致性:加樣時(shí)確保各孔反應(yīng)體積一致(誤差≤1μL),避免因體積差異導(dǎo)致 Ct 值偏差。避免氣泡:加樣后若有氣泡,需輕輕敲擊板壁或離心去除,否則氣泡會(huì)干擾熒光信號(hào)采集。3. 試劑與樣本處理酶的保存:qPCR Mix 需 - 20℃冷凍保存,使用時(shí)冰上融化,輕輕混勻(勿震蕩,防止酶變性)。模板質(zhì)量:避免模板中含 EDTA、SDS 等抑制劑,若樣本濃度過低,可適當(dāng)增加模板量(但需注意體積占比,避免影響反應(yīng)體系)。RePure系列PCR儀能快速找到合適的退火溫度,顯著提高了實(shí)驗(yàn)的...
篩選轉(zhuǎn)基因作物:在食品生產(chǎn)中,許多原料來自轉(zhuǎn)基因作物。PCR 儀可對(duì)食品中的植物成分進(jìn)行檢測(cè),通過擴(kuò)增特定的轉(zhuǎn)基因元件,如啟動(dòng)子、終止子、目的基因等,判斷食品是否含有轉(zhuǎn)基因成分。例如,檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆中的 CP4-EPSPS 基因,確定大豆制品是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,為消費(fèi)者提供知情權(quán)和選擇權(quán)。監(jiān)控轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)識(shí):PCR 技術(shù)能夠準(zhǔn)確檢測(cè)食品中的微量轉(zhuǎn)基因成分,有助于監(jiān)管部門對(duì)市場上的食品進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控,確保轉(zhuǎn)基因食品按照相關(guān)法規(guī)進(jìn)行正確標(biāo)識(shí),防止誤導(dǎo)消費(fèi)者。RePure-(D)B在同一次實(shí)驗(yàn)中測(cè)試多個(gè)不同溫度下的反應(yīng)效果,提高實(shí)驗(yàn)的成功率。無錫梯度基因擴(kuò)增儀PCR儀功能微量檢測(cè):PCR 儀具有強(qiáng)大的信...
PCR儀是利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),在體外對(duì)特定DNA片段進(jìn)行大量擴(kuò)增的儀器。其原理是通過高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。具體過程如下:高溫變性:將待擴(kuò)增的DNA雙鏈在高溫(90-95℃)下解鏈,形成單鏈DNA模板。低溫退火:降低溫度(一般為50-65℃),使引物與單鏈DNA模板特異性結(jié)合。適溫延伸:在DNA聚合酶的作用下,以引物為起始點(diǎn),在適宜溫度(一般為72℃左右)下,以dNTP為原料,沿著模板鏈合成新的DNA鏈。柏恒RePure系列PCR儀進(jìn)行PCR擴(kuò)增,能夠獲得高質(zhì)量的擴(kuò)增產(chǎn)物,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。江蘇QPCR基...
溫度校準(zhǔn):定期使用溫度驗(yàn)證儀檢測(cè)梯度準(zhǔn)確性(如每列孔實(shí)際溫度是否與設(shè)定值一致)。耗材適配:使用與儀器模塊匹配的 PCR 板(如薄型光學(xué)板用于熒光檢測(cè)),避免因板型差異導(dǎo)致溫度傳導(dǎo)不均。防污染措施:梯度優(yōu)化實(shí)驗(yàn)常涉及多引物組合,需嚴(yán)格遵循 PCR 實(shí)驗(yàn)室分區(qū)原則,避免交叉污染。梯度 PCR 儀通過多溫度并行測(cè)試的特性,成為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中方法開發(fā)與條件優(yōu)化的**工具,尤其適合科研實(shí)驗(yàn)室、檢測(cè)方法建立機(jī)構(gòu)及需要頻繁優(yōu)化反應(yīng)條件的場景。隨著技術(shù)升級(jí),未來機(jī)型可能集成 AI 算法,自動(dòng)分析梯度結(jié)果并推薦比較好參數(shù),進(jìn)一步提升實(shí)驗(yàn)效率。RePure-A配備的人性化操作界面和直觀的軟件系統(tǒng)使得用戶能夠輕松設(shè)...
定性基因擴(kuò)增儀(PCR 儀)憑借其高靈敏度和特異性的基因檢測(cè)能力,在多個(gè)行業(yè)中承擔(dān)著關(guān)鍵角色。1. 基因克隆與功能研究場景:目的基因的擴(kuò)增、載體構(gòu)建(如將目標(biāo)基因插入質(zhì)粒)、基因突變(點(diǎn)突變、缺失突變)驗(yàn)證。技術(shù)價(jià)值:通過 PCR 擴(kuò)增目的基因片段,結(jié)合酶切、連接等操作,實(shí)現(xiàn)基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)研究(如蛋白功能分析)。設(shè)備需求:梯度 PCR 儀(優(yōu)化引物退火溫度)+ 低通量模塊(8 聯(lián)管),便于多條件實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。2. 分子進(jìn)化與群體遺傳學(xué)場景:物種親緣關(guān)系分析(如擴(kuò)增 16S rRNA 基因研究微生物進(jìn)化)、種群基因頻率檢測(cè)(如人類 HLA 基因多態(tài)性分析)。技術(shù)價(jià)值:通過 PCR 產(chǎn)物測(cè)序,...
精確含量測(cè)定:熒光定量 PCR 技術(shù)作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉(zhuǎn)基因成分,還可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或相對(duì)定量法等手段,對(duì)轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行精確的定量分析,準(zhǔn)確測(cè)定樣本中轉(zhuǎn)基因成分的含量,為轉(zhuǎn)基因生物的監(jiān)管、標(biāo)識(shí)管理以及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等提供更詳細(xì)、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。滿足法規(guī)要求:在食品安全管理和國際貿(mào)易中,許多法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)轉(zhuǎn)基因成分的含量有明確的規(guī)定和限量要求。PCR 儀的定量分析功能能夠幫助檢測(cè)機(jī)構(gòu)和企業(yè)準(zhǔn)確判斷產(chǎn)品是否符合相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn),確保產(chǎn)品的合規(guī)性。RePure-(D)B利用梯度功能進(jìn)行溫度梯度設(shè)計(jì),能夠快速找到適合的反應(yīng)溫度,提高PCR反應(yīng)效率。南京雙槽基因擴(kuò)增儀P...
啟動(dòng)反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無誤后,啟動(dòng) qPCR 程序,儀器自動(dòng)運(yùn)行并實(shí)時(shí)顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對(duì)表達(dá)量(相對(duì)定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說明擴(kuò)增特異性良好;若有雜峰,需排查引物或反應(yīng)條件問題。 污染防控(重點(diǎn))核酸污染:嚴(yán)格分區(qū)操作:將試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR 擴(kuò)增區(qū)分開,避免交叉污染。使用濾芯吸頭,每次加樣后更換吸頭,避免移液器接觸樣本或試劑瓶口。定期用 10% 次氯酸鈉或 DNA 酶清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器和儀器樣品槽,紫外燈照射消毒操作區(qū)(30 分鐘以上)。試劑污染:試劑...
科研實(shí)驗(yàn)室:優(yōu)先選擇帶梯度功能的機(jī)型(如 Veriti、C1000),便于優(yōu)化引物退火溫度。臨床檢測(cè):選擇兼容熒光定量模塊的機(jī)型(如 QuantStudio),實(shí)現(xiàn)定性 + 定量一體化檢測(cè)。工業(yè)級(jí)批量檢測(cè):選擇快速升降溫機(jī)型(如某些國產(chǎn)型號(hào)升降溫速率≥6℃/ 秒),縮短檢測(cè)周期。日常維護(hù)定期清潔熱蓋與反應(yīng)槽,避免污染或液體殘留影響溫度傳導(dǎo)。使用** PCR 板 / 管,確保與儀器模塊緊密貼合(非適配耗材可能導(dǎo)致孔間溫度不均)。實(shí)驗(yàn)優(yōu)化高通量檢測(cè)時(shí),建議使用熱啟動(dòng)酶和定量加樣設(shè)備(如多通道移液器),減少非特異性擴(kuò)增和加樣誤差。長時(shí)間運(yùn)行后,定期用標(biāo)準(zhǔn)品驗(yàn)證擴(kuò)增效率(如使用已知濃度的 DNA 模板...
環(huán)境監(jiān)測(cè)與生態(tài)保護(hù):微生物與污染物的 “基因追蹤”:1. 水體與土壤污染評(píng)估場景:檢測(cè)水體中病原微生物(如霍亂弧菌 ctx 基因)、土壤中***抗性基因(如 tetA 基因)的分布,評(píng)估環(huán)境污染程度。技術(shù)價(jià)值:通過 PCR 定量抗性基因豐度,為污水處理工藝優(yōu)化(如添加特異性降解菌)提供數(shù)據(jù)支持。2. 生態(tài)多樣性調(diào)查場景:環(huán)境 DNA(eDNA)檢測(cè),如從湖泊水樣中擴(kuò)增魚類線粒體基因,快速評(píng)估水生生物多樣性(替代傳統(tǒng)捕撈調(diào)查)。設(shè)備需求:便攜式 PCR 儀(野外現(xiàn)場檢測(cè))+ 防水型反應(yīng)模塊,適應(yīng)復(fù)雜環(huán)境條件。RePure-(D)B通過梯度功能優(yōu)化PCR反應(yīng)條件,可以將實(shí)驗(yàn)過程簡化,縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,...
醫(yī)療與臨床診斷:疾病檢測(cè)的 “金標(biāo)準(zhǔn)”1. 病原體快速檢測(cè)場景:病毒性疾病:(擴(kuò)增 N 基因 / ORF1ab 基因)、乙肝病毒(HBV-DNA 檢測(cè))、HPV 分型(L1 基因擴(kuò)增);細(xì)菌性疾病:結(jié)核分枝桿菌(IS6110 基因檢測(cè))、淋球菌(隱蔽質(zhì)粒基因擴(kuò)增)。技術(shù)價(jià)值:相比傳統(tǒng)培養(yǎng)法,PCR 可縮短檢測(cè)時(shí)間(如結(jié)核檢測(cè)從 2-4 周縮短至 4 小時(shí)),且適用于微量樣本(如腦脊液、拭子)。設(shè)備需求:高通量 96 孔板 PCR 儀,部分場景需搭配核酸提取儀實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測(cè)。2. 遺傳疾病篩查場景:產(chǎn)前診斷(如唐氏綜合征 21 號(hào)染色體三體檢測(cè))、新生兒遺傳病(囊性纖維化基因 F508del 突...
**技術(shù)參數(shù):決定實(shí)驗(yàn)精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求。控溫精度:±0.1-0.5℃為優(yōu),精度不足可能導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合或酶活性降低(如退火溫度波動(dòng)易引發(fā)假陽性)。溫度均勻性:各孔位溫差≤0.5℃,若均勻性差,同批次樣本擴(kuò)增效率可能不一致,影響結(jié)果重復(fù)性。升降溫速率:常規(guī) PCR 儀速率為 3-8℃/s,高速機(jī)型可達(dá) 10℃/s 以上,可縮短單循環(huán)時(shí)間(如 30 個(gè)循環(huán)從 2 小時(shí)壓縮至 1 小時(shí))。2. 反應(yīng)模塊兼容性樣本通量:低通量:單管、8 聯(lián)管(適合少量樣本,如科研初篩、臨床單樣本檢測(cè)...
科研實(shí)驗(yàn)室:優(yōu)先選擇帶梯度功能的機(jī)型(如 Veriti、C1000),便于優(yōu)化引物退火溫度。臨床檢測(cè):選擇兼容熒光定量模塊的機(jī)型(如 QuantStudio),實(shí)現(xiàn)定性 + 定量一體化檢測(cè)。工業(yè)級(jí)批量檢測(cè):選擇快速升降溫機(jī)型(如某些國產(chǎn)型號(hào)升降溫速率≥6℃/ 秒),縮短檢測(cè)周期。日常維護(hù)定期清潔熱蓋與反應(yīng)槽,避免污染或液體殘留影響溫度傳導(dǎo)。使用** PCR 板 / 管,確保與儀器模塊緊密貼合(非適配耗材可能導(dǎo)致孔間溫度不均)。實(shí)驗(yàn)優(yōu)化高通量檢測(cè)時(shí),建議使用熱啟動(dòng)酶和定量加樣設(shè)備(如多通道移液器),減少非特異性擴(kuò)增和加樣誤差。長時(shí)間運(yùn)行后,定期用標(biāo)準(zhǔn)品驗(yàn)證擴(kuò)增效率(如使用已知濃度的 DNA 模板...