啟動反應與結果分析確認參數無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應結束后,通過軟件查看結果:定量結果:根據標準曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達量(相對定量)。溶解曲線:若出現單一尖銳峰,說明擴增...
基于兩個熒光分子(供體與受體)距離接近時(<10nm),供體的能量轉移給受體,導致供體熒光減弱、受體熒光增強,用于分析分子間相互作用或構象變化。典型應用場景:蛋白質相互作用研究分別標記兩個蛋白(供體與受體),若相互結合,FRET 信號增強,可實時監測細胞內蛋白...
樣本處理:將待計數的細胞樣品進行適當的處理,通常細胞會與染色劑和/或稀釋液混合。計數腔和光源:細胞計數儀通常包含計數腔和光源,計數腔是一個小空間,可以容納樣本溶液。光敏傳感器:細胞計數器配備一個光敏傳感器,它可以感應到細胞在光源照射下發出的信號。光敏傳感器的種...
1. DNA 指紋分析應用:擴增人類基因組中的短串聯重復序列(STR),如 D21S11、TH01 等位點,用于個體識別、親子鑒定和犯罪現場證據分析。案例:通過 PCR - 毛細管電泳技術構建 DNA 圖譜,比對嫌疑人和現場生物樣本(如血跡、毛發)。2. 物種...
使用細胞計數儀(以常用的自動細胞計數儀為例)的**是通過標準化操作確保細胞懸液均勻、染色正確,從而獲得準確的計數結果。1. 儀器檢查開機預熱:部分儀器需 10-15 分鐘(參考說明書),確保軟件啟動正常,鏡頭清潔無污漬(若有灰塵,用鏡頭紙輕擦)。確認計數板類型...
快速檢測沙門氏菌:沙門氏菌是常見的食源性致病菌,可引發食物中毒等疾病。利用 PCR 儀,針對沙門氏菌的特定基因序列設計引物,能快速從食品樣本中擴增出相關基因片段,從而判斷食品中是否存在沙門氏菌。相比傳統檢測方法,縮短了檢測時間,提高了檢測效率。檢測大腸桿菌 O...
放入 PCR 儀:將配置好的反應管放入基因擴增儀 PCR 儀中,按照設定的程序進行擴增反應。設置擴增程序:一般包括預變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預變性步驟通常在 94℃-95℃下進行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-...
細胞計數儀主要有以下功能:數據分析與報告生成:數據統計分析:對計數和測量得到的數據進行統計分析,如計算平均值、標準差、變異系數等,以評估細胞樣本的一致性和穩定性。生成報告:可以生成詳細的計數報告,包括細胞總數、活細胞數、死細胞數、細胞存活率、細胞大小分布等信息...
轉基因作物檢測應用:擴增轉基因作物中的外源基因(如抗蟲基因Bt、抗除草劑基因EPSPS),用于安全性評估和監管篩查。案例:歐盟法規要求對食品中的轉基因成分進行 PCR 定性檢測。2. 作物育種與品種鑒定應用:利用 SSR(簡單序列重復)、AFLP(擴增片段長度...
篩選轉基因作物:在食品生產中,許多原料來自轉基因作物。PCR 儀可對食品中的植物成分進行檢測,通過擴增特定的轉基因元件,如啟動子、終止子、目的基因等,判斷食品是否含有轉基因成分。例如,檢測轉基因大豆中的 CP4-EPSPS 基因,確定大豆制品是否為轉基因產品,...
溫度校準:定期使用溫度驗證儀檢測梯度準確性(如每列孔實際溫度是否與設定值一致)。耗材適配:使用與儀器模塊匹配的 PCR 板(如薄型光學板用于熒光檢測),避免因板型差異導致溫度傳導不均。防污染措施:梯度優化實驗常涉及多引物組合,需嚴格遵循 PCR 實驗室分區原則...
精確含量測定:熒光定量 PCR 技術作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉基因成分,還可以通過標準曲線法或相對定量法等手段,對轉基因成分進行精確的定量分析,準確測定樣本中轉基因成分的含量,為轉基因生物的監管、標識管理以及風險評估等提供...
科研實驗室:優先選擇帶梯度功能的機型(如 Veriti、C1000),便于優化引物退火溫度。臨床檢測:選擇兼容熒光定量模塊的機型(如 QuantStudio),實現定性 + 定量一體化檢測。工業級批量檢測:選擇快速升降溫機型(如某些國產型號升降溫速率≥6℃/ ...
定性基因擴增儀(PCR 儀)憑借其高靈敏度和特異性的基因檢測能力,在多個行業中承擔著關鍵角色。1. 基因克隆與功能研究場景:目的基因的擴增、載體構建(如將目標基因插入質粒)、基因突變(點突變、缺失突變)驗證。技術價值:通過 PCR 擴增目的基因片段,結合酶切、...
**技術參數:決定實驗精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求。控溫精度:±0.1-0.5℃為優,精度不足可能導致引物非特異性結合或酶活性降低(如退火溫度波動易引發假陽...
精確含量測定:熒光定量 PCR 技術作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉基因成分,還可以通過標準曲線法或相對定量法等手段,對轉基因成分進行精確的定量分析,準確測定樣本中轉基因成分的含量,為轉基因生物的監管、標識管理以及風險評估等提供...
啟動反應與結果分析確認參數無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應結束后,通過軟件查看結果:定量結果:根據標準曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達量(相對定量)。溶解曲線:若出現單一尖銳峰,說明擴增...
細胞生物學細胞計數與活力評估:結合臺盼藍染色,通過 600 nm 吸光度估算細胞密度(需配合細胞計數板校準)。細胞增殖 / 毒性實驗:監測細胞懸液濁度變化,反映細胞生長狀態或藥物毒性。醫學與臨床檢測病原體核酸檢測:定量病毒載量(如 HIV、HBV)或細菌 DN...
定性基因擴增儀(PCR 儀)憑借其高靈敏度和特異性的基因檢測能力,在多個行業中承擔著關鍵角色。1. 基因克隆與功能研究場景:目的基因的擴增、載體構建(如將目標基因插入質粒)、基因突變(點突變、缺失突變)驗證。技術價值:通過 PCR 擴增目的基因片段,結合酶切、...
2. 代謝活性評估利用微生物代謝過程中輔酶(如 NADH)的吸光度變化(340nm),間接反映細胞活性。例如,在***敏感性測試中,藥物抑制代謝會導致 NADH 生成減少,吸光度變化速率降低。3. 核酸 / 蛋白定量雖然主要用于微生物濃度檢測,但分光光度計在 ...
環境監測與生態保護:微生物與污染物的 “基因追蹤”:1. 水體與土壤污染評估場景:檢測水體中病原微生物(如霍亂弧菌 ctx 基因)、土壤中***抗性基因(如 tetA 基因)的分布,評估環境污染程度。技術價值:通過 PCR 定量抗性基因豐度,為污水處理工藝優化...
定性基因擴增儀(PCR 儀)是分子生物學領域用于實現聚合酶鏈式反應(PCR)的設備,其通過精確控制溫度循環,使 DN段在體外實現指數級擴增,為基因檢測、疾病診斷、科研等提供關鍵技術支持。PCR的原理是利用DNA的熱變性、復性及延伸特性,通過循環控溫實現DNA擴...
醫療與臨床診斷:疾病檢測的 “金標準”1. 病原體快速檢測場景:病毒性疾病:(擴增 N 基因 / ORF1ab 基因)、乙肝病毒(HBV-DNA 檢測)、HPV 分型(L1 基因擴增);細菌性疾病:結核分枝桿菌(IS6110 基因檢測)、淋球菌(隱蔽質粒基因擴...
儀器預熱與校準開機預熱(通常 10-15 分鐘),確保光源穩定。用相應的緩沖液(如 TE 緩沖液、RNase-free 水)進行 “空白校準”:取 1-2μL 緩沖液滴在檢測探頭上,閉合探頭,執行校準程序(消除背景干擾)。樣品準備確保樣品充分混勻(避免沉淀或濃...
**技術參數:決定實驗精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求。控溫精度:±0.1-0.5℃為優,精度不足可能導致引物非特異性結合或酶活性降低(如退火溫度波動易引發假陽...
啟動反應與結果分析確認參數無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應結束后,通過軟件查看結果:定量結果:根據標準曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達量(相對定量)。溶解曲線:若出現單一尖銳峰,說明擴增...
開機與預熱按儀器說明書開機(部分儀器需先開主機再開軟件,或直接觸摸屏幕啟動)。開機后需預熱10-15 分鐘(確保光源穩定,尤其是紫外光部分),預熱期間可進行樣品準備。空白校準(關鍵步驟,消除背景干擾)空白校準的目的是去除緩沖液本身的吸光度影響,必須用與樣品溶解...
主要檢測功能:定量分析:基于特征波長吸光度與濃度的線性關系,如 DNA 在 260nm 的吸光度與濃度成正比。光譜定性分析:通過全波長掃描獲取樣本的吸收光譜曲線,對比標準譜庫判斷物質成分。技術優勢(對比傳統分光光度計)微量樣本檢測:*需 1-2μL 樣本(傳統...
科研實驗室:優先選擇帶梯度功能的機型(如 Veriti、C1000),便于優化引物退火溫度。臨床檢測:選擇兼容熒光定量模塊的機型(如 QuantStudio),實現定性 + 定量一體化檢測。工業級批量檢測:選擇快速升降溫機型(如某些國產型號升降溫速率≥6℃/ ...
微量分光光度計利用上述原理進行工作。其重要部件包括光源、單色器、檢測器和數據處理系統。光源:發射一束光線,為測量提供光源。單色器:將光源發出的光線分解為單一波長的光線,以便測量特定波長下的吸光度。檢測器:將透過樣品的光線轉換為電信號,以便進行后續的數據處理。數...