外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒，組分經過優(yōu)化處理，適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取...

外泌體的提取、分離方法：梯度密度離心法。研究發(fā)現，外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間，因此，可以采用密度梯度離心法來分離外泌體。該方法是將超速離心結合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結合，原理是先除去非囊泡物質，再通過梯度密度濃縮提取外泌體，該方法可以得到相對...

糞便總RNA快速提取試劑盒：獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶，然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶，然后將粗純化的玻璃奶轉移到離心柱，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質去除，較后低鹽的洗脫緩沖液將...

環(huán)狀RNA是一類產生于RNA剪切過程中的封閉喚醒RNA分子，主要由外顯子和（或）內含子構成。環(huán)狀RNA參與了復雜的RNA-RNA的相互作用網絡，在基因轉錄后調控中發(fā)揮作用；環(huán)狀RNA可直接與蛋白質結合，也可通過RNA介導間接與蛋白質發(fā)生關聯，影響蛋白質功能；部...

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10...

細胞凍存液是如何保護細胞的：當溫度進一步下降，細胞內外都結冰，產生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑，則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合，從而降低冰點，減少冰晶的形成，并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度...

細胞凍存，我們應該注意哪些事項：1、液氮內的細胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細胞應一段時間內進行更替。一個細胞系在培養(yǎng)一個月后，可復蘇一管新的細胞確保其質量沒有發(fā)生太大變化，傳代幾次后，再凍存留種。2、細胞復蘇時，為保證獲得較高的存活率和接種率，應...

膠原蛋白的提取方法：1.堿法提取：堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解，因此得到的水解產物分子量比較低。所以，若想保留膠原的三股螺旋結構，此法不可取...

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL，用1mol/L氫氧化鈉調節(jié)酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中，倒入0.5mL自組裝液，室溫放置20min。予自組裝液自組裝24h。吸取0.0...

RNA提取試劑的選擇：首先，要確定材料的可用性。盡管現有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分，但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關鍵，但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時，使用Takara公司的樣品保護劑Sample...

RNA提取關鍵點病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性，在提取時，實驗人員需要佩戴口罩和手套等各種防護裝備，以防實驗室污染。而有種「自動滅活」的方法，在更加便利的同時，也能更好的保護實驗人員的安全。許多樣品中含有高水平的RNase，這種酶也會加速RNA的降解。為了...

外泌體(exosomes，Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞，實現細胞之間的信息交流及物質交換，并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天...

RNA提取注意事項：1、組織樣本要盡可能的新鮮，避免反復凍融。2、提取時組織要充分研磨，組織量不宜過少，更不宜過多。3、加入裂解液后應給予充分的孵育時間，使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時，分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸，不能多吸”，千萬不能提取到...

RNA提取試劑注意事項：1、需自備氯仿，異丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。2、所有離心管，泵頭及相關溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜，...

細胞凍存，我們應該注意哪些事項：1、有文獻表明，細胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙，因為這一速度可以很好的控制細胞內部晶體的產生。我們實際操作不可能將速度控制的這么精確，目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min、-80℃2h后轉入液氮中。2、正...

除了讓細胞更好貼上去，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠，這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內部的生長環(huán)境，讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然，除了這些，耗子尾汁還能做到很多事情，只需要打開網站——知網，輸入鼠尾膠原蛋白就能看到，例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺...

血漿/血清中miRNA提取試劑盒：是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的，利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質...

細胞培養(yǎng)過程中，細胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面（懸浮培養(yǎng)細胞除外）才能完成生長過程，而有一些細胞卻總是不太給力，自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難，這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔起讓細胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層（coating），給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后...

總RNA提取試劑是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性；加入氯仿后離心，RNA相將與DNA和蛋白質分離，隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于R...

外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體，可通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成多泡內涵體，內涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質、microRNA等多種物質，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體...

提取RNA的詳細步驟：首先，將研缽晾干夠，倒入1/3體積的液氮，加入0.2g均質的植物材料，充分研磨后轉入一個含有300微升GMT的1.5ml的離心管中，搖勻。然后，加入30微升2mol/lNaAc進行搖勻，加入300微升酸酚搖勻，加入100微升的氯仿搖勻。然...

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：膠原蛋白具有抗氧化作用，但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建，對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的：探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機...

拭子RNA提取試劑的選擇？應有較高的提取得率。對離心柱法而言，拭子核酸得率的高低，主要取決于離心柱對核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細胞裂解能力強、洗脫液洗脫能力好，核酸的提取得率就高。反之，如果離心柱硅...

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產，博取眾家之長，根據多年來市場反饋不斷進行技術升級和改良得來。具有操作步驟少，實驗快捷，RNA產量純度高，充分滿足后續(xù)實驗要求的需要，適用提取樣品普遍等特點。產量：每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不...

細胞凍存及復蘇的基本原則是“慢凍快融”，這樣可以較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多用二甲基亞砜（DMSO）作為保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性；緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少冰晶對細胞的物理損傷。復蘇細胞采用快...

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調節(jié)pH=6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上...

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10...

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機...

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機...

膠原蛋白的提取方法：酸法提取：酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿，而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸，主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用酸法提取的膠原較...