數字PCR

來源: 發布時間:2024-07-16

與常規PCR方法相比,數字PCR有如下優勢:1、能夠***定量:常規PCR定量需要制定已知拷貝數的標準DNA曲線,但是由于待檢樣本與標準曲線不在統一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結果的準確性。而數字PCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可進行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴重的樣本。3、靈敏度高:數字PCR是將傳統PCR反應體系分割成數萬個 PCR反應,這些反應可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個 反應體系中,***降低了背景信號和***物對反應的干擾,擴增基質效應大大減小。浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數字PCR ,歡迎您的來電!數字PCR

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數字PCR是一種核酸分子 定量技術。當前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來定量;,Ct值就是指可以檢測到熒光值對應的循環數;數字PCR是***的定量技術,基于單分子PCR方法來進行計數的核酸定量,是一種 定量的方法。主要采用當前分析化學熱門研究領域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。深圳國產數字PCR哪家好浚和(上海)儀器科技有限公司是一家專業提供數字PCR 的公司,歡迎您的來電!

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數字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。 

定量PCR和數字PCR的特點:5.目前定量PCR已經能實現高通量樣品條件下的自動化操作。6.數字PCR在單分子層面上的***定量,可以徹底擺脫對標準曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數,提高了實驗結果在批內和批間的穩定性,甚至能用來對標準品進行定標。7.基于***定量的方式,數字PCR結果的高重復性和高精度可實現微小差異的基因表達分析,如等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、microRNA表達分析等等。所謂“微小差異”的標準一般而言是指表達水平的差異在2倍以內。8.同等條件下,數字PCR在靈敏度方面擁有優勢,使得該技術已成為**的液態活檢、病原微生物檢測、轉基因成分測定、宿主殘留DNA分析等的熱門技術。數字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,讓您滿意,有想法可以來我司咨詢!

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數字PCR(DigitalPCR-dPCR)技術是一種新的核酸檢測和定量方法,與傳統定量PCR(qPCR)技術不同,數字PCR采用***定量的方式,不依賴于標準曲線和參照樣本,直接檢測目標序列的拷貝數。由于這種檢測方式具有比傳統qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性,dPCR迅速得到***的應用,這項技術在極微量核酸樣本檢測、復雜背景下稀有突變檢測和表達量微小差異鑒定方面變現出的優勢已被普遍認可,而其在基因表達研究、microRNA研究、基因組拷貝數鑒定、**標志物稀有突變檢測、致病微生物鑒定、轉基因成分鑒定、NGS測序文庫精確定量和結果驗證等諸多方面具有的廣闊應用前景已經受到越來越多的關注。浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數字PCR ,有想法的不要錯過哦!南通MicroDrop-100數字PCR現貨

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相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數字PCR具備以下優勢:●靈敏度可達到單個核酸分子:檢測限低至0.001%,主要系為數字PCR可以實現靶標DNA/RNA的生物濃縮;●無需標準曲線活參照基因進行對比來測定核算量,可對靶分子起始量進行***定量,直 接獨處DNA分子的個數;●適合環境復雜樣品的檢測:終點PCR檢測,不依賴Ct值,不依賴擴增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問題,適合各類復雜環境中的樣本進行***定量,如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;數字PCR

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