dPCR的基本原理
目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數少于或者等于1個。這樣經過PCR循環之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。可以使用幾種不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細管,油乳劑和帶有核酸結合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數量,根據泊松分布的原理,反應體系中目標分子的拷貝數可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算,從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性。 分辨率——低至0.1倍基因表達差異。杭州廣東數字PCR哪家好
相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數字PCR具備以下優勢:
· 能夠有效區分濃度差異微小的樣品:更好的準確度、精密度和重復性,可以用于精確測定靶基因的相對表達,基因拷貝數變異分析等。
· 數字PCR可開發針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環境提供檢測解決方案,該技術的應用范圍廣,尤其在液體活檢領域,已開發針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個位點檢測試劑盒,可精細指導臨床***的診斷,以便患者在后續得到更及時并且適當的***方案提供。 蘇州永諾數字PCR解決方案單張芯片一次可處理8個樣本。
數字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近幾年發展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統熒光定量PCR來說,數字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數,能夠對起始樣本核酸分子***定量。
數字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統計并計算。相對而言,傳統PCR或qPCR反應都是發生于同一體系當中,這也是數字PCR與其比較大的區別。
MiniDrop數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數據分析軟件組成,該系統的**為微流控微滴生成技術,采用原創性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數量級,各項指標均超越國內外的主流產品。
MiniDrop創新性采用高壓驅動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數字PCR領域的壟斷。 準確度不完全依賴于擴增效率。
與常規的PCR的方法相比,dPCR有很好的優勢。
***定量
常規PCR和實時熒光PCR定量檢測都需要已知拷貝數的標準DNA制定標準曲線,由于樣品測定在各種條件上不會完全一致,會造成PCR擴增效率的差異,從而影響定量結果的準確性。而ddPCR不受標準曲線和擴增動力學影響,可以進行***定量。
樣品需求量低
在檢測珍貴樣品和樣品核酸存在降解時具有明顯的優勢。
高靈敏度
ddPCR本質上是將一個傳統的PCR反應分成了數萬個**的PCR反應,在這些反應中可以精確地檢測到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品,且能避免非同源異質雙鏈的形成。
高耐受性
由于目的序列被分配到多個微滴中,***降低了體系間的影響以及背景序列和***物對反應的干擾,擴增基質效應大大減小。 FAM、VIC雙通道熒光檢測。蘇州永諾數字PCR解決方案
樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定。杭州廣東數字PCR哪家好
我國***擁有完全自主知識產權的微滴式數字PCR儀MiniDrop?研發成功并投入生產。這是國內***微滴式數字PCR檢測系統,能廣泛應用于醫療、農業、環境等領域,未來,采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創檢測成為可能。
MiniDrop?數字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數據分析軟件組成,該系統的**為微流控微滴生成技術,采用原創性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅動在2分鐘內生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數量級,各項指標均超越國內外主流產品。 杭州廣東數字PCR哪家好
浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業供應商和服務商,致力于為客戶提供專業的定制化解決方案。多年來,持續為醫藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業提供先進的產品和專業的服務。
浚和在不斷引進國內外先進儀器設備的同時,結合行業和市場需求,加強和客戶之間的溝通,并與國際上多家**儀器設備制造商保持著長期穩定的合作關系,不定期地與合作商進行技術交流,努力加強自身技術力量。公司配備了數名有著多年行業經驗的技術人員,依靠雄厚的技術實力、科學合理的配置方案、專業的安裝調試和周到的售后服務,得到了廣大用戶的支持與信賴。
公司主要經營產品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數字PCR、高壓滅菌鍋、培養箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業的技術服務,如設備的維護、驗證等。
浚和儀器將始終以行業特點為立足點,以客戶需求為導向,不斷地提高自身專業技術能力,不停地完善客戶服務質量,在發展中保持創新的精神,力求與客戶共同進步,為行業的發展作出不懈的努力。