深圳成熟卵母細胞紡錘體卵冷凍研究

Oosight影像分析系統采用液晶偏光成像技術，無需對卵母細胞進行染色，即可實時、清晰、高對比度地進行紡錘體結構和透明帶成像，對ICSI、核移植操作、卵母細胞質量評價等有很好的輔助作用。

主要應用ICSI：在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細胞，避免卵的破裂損傷，增強胚胎的發育潛能。卵評估：利用定量的分析數據對卵進行分級，改善對胚胎的選擇。體外成熟評估：在未成熟卵催化（IVM）過程判斷成熟期，判斷依據采用的是準確的識別紡錘體，而非不準確的極體。質量控制：利用定量的分析數據對卵進行分級，改善對胚胎的選擇。

核移植：顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質，使得核移植的成功率增加了80%，并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究：對冷凍的初級卵母細胞進行解凍前和解凍后的定量分析，從而判斷卵的發育力，改善妊娠率。紡錘體研究：檢測胚胎中紡錘體的發育過程，確定正常和非正常分裂率（只可用于搭配有培養箱的顯微鏡）。可以對染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像，從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究：測量卵母細胞的透明帶；準確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化，判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態 紡錘體的結構和功能在不同類型的細胞中可能存在差異。深圳成熟卵母細胞紡錘體卵冷凍研究

    紡錘體成像技術在細胞生物學領域具有很廣的應用價值。以下是幾個主要的應用方向：揭示紡錘體的精細結構和動態變化：紡錘體成像技術能夠清晰地捕捉到紡錘體的精細結構和動態變化，如微管的排列、染色體的分離和紡錘體的形態變化等。這些觀測結果不僅有助于揭示紡錘體的形成和功能機制，還為理解細胞分裂的復雜過程提供了新的視角。研究紡錘體相關疾病：紡錘體的異常與多種疾病的發生和發展密切相關，如遺傳性疾病等。紡錘體成像技術能夠實現對紡錘體結構和功能的精確觀測，為揭示這些疾病的發病機制提供有力的支持。此外，該技術還可以用于評估藥物對紡錘體的影響，為藥物篩選提供新的思路和方法。輔助生殖技術：在臨床診療中，紡錘體成像技術也被廣泛應用于輔助生殖技術中。例如，在卵胞質內單精子注射（ICSI）過程中，紡錘體成像技術能夠精確觀測卵母細胞中紡錘體的位置，從而避免在精子時損傷紡錘體，提高受精率和臨床妊娠率。 無需染色紡錘體紡錘體結構紡錘體在細胞分裂中扮演關鍵角色，確保遺傳物質均等分配。

秋水仙素為什么會使有絲分裂的細胞停滯于中期如果用秋水仙素處理有絲分裂的細胞，紡錘體會迅速消失，細胞停滯在有絲分裂中期，染色體無法分離成兩組。用秋水仙堿進行誘導，從而將細胞阻斷在細胞分裂中期，也是誘導細胞周期同步化的重要方法之一。真核細胞周期可分為4個時期，分別是G1期、S期、G2期和M期。在細胞周期調控中主要有3個控制點，***個控制點在G1期，決定細胞能否進入S期；第二個控制點在G2期，決定細胞能否進入有絲分裂期；第三個控制點在M期，決定細胞是否已經準備好將復制好的染色體拉向兩極。CDK（周期蛋白依賴性蛋白激酶）對細胞周期運行起著**性調控作用，CDK與不同時期的周期蛋白結合會在特定周期起調節作用。cyclinA、cyclinB是在M期起調節功能的兩種主要周期蛋白。細胞周期運轉到分裂中期后，在后期促進復合物(APC)的作用下，M期cyclinA和cyclinB通過泛素化途徑迅速降解，Cdkl活性喪失，細胞周期便從M期中期向后期轉化。APC活性變化是細胞周期由分裂中期向后期轉換的關鍵因素，其活性受到多種因素的綜合調節，紡錘體組裝檢查點是其重要的調控因素。紡錘體組裝不完全，或所有動粒不能被動粒微管全部捕捉，則APC不能被***。

液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數碼成像技術結合起來的成像系統，能夠觀測到具有雙折性特征的細胞結構，如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統無需對細胞進行固定和染色，因此能夠評估卵母細胞的質量與紡錘體、透明帶等的相關性。在紡錘體卵冷凍研究中，Polscope成像系統可用于實時監測冷凍過程中紡錘體的形態變化，評估冷凍保護劑的效果和冷凍速率對紡錘體的影響。此外，解凍后也可利用Polscope成像系統評估紡錘體的恢復情況和穩定性，從而篩選出高質量的卵母細胞進行后續操作。紡錘體的形成和功能受到多種信號分子的調控，如生長因子等。

紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應用我們知道，成熟的卵母細胞排出***極體。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進入卵子，隨著時間的推移，卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極，進而排出第二極體，再往后大約加精后9-16小時，雌雄原核會出現，而原核的出現才是受精的標志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現的時間窗，發現沒有受精時再去補救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間，因為沒有受精的卵子會在體外老化，即使受精，胚胎的發育潛能也很低。所以，我們在加精后的4-6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當然，偶爾也會出現錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細胞進行ICSI補救，實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統計紡錘體的數目，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細胞進行補救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細胞進行補救ICSI。結果發現，使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。在有絲分裂中，紡錘體形成并維持著染色體的穩定性。武漢輔助生殖紡錘體

紡錘體的形成和功能與細胞的周期調控密切相關。深圳成熟卵母細胞紡錘體卵冷凍研究

    在有絲分裂中，紡錘體的形成與功能至關重要。首先，在有絲分裂前期，中心體復制并分離至細胞兩極，形成紡錘體的兩極。隨后，微管從兩極向中心區域延伸，形成紡錘體的主干。在中期，染色體在紡錘絲的牽引下，自動在赤道板排列整齊。當細胞進入分裂后期，紡錘體微管收縮，將染色體牽引至兩極，形成兩組數目相等的姐妹染色單體。這一過程確保了遺傳信息的準確傳遞，避免了染色體分離錯誤導致的遺傳異常。此外，紡錘體還決定了胞質分裂的分裂面。在染色體分裂的同時，紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極，而是停弛在紡錘體中心，形成紡錘中心體。紡錘中心體的中心區域為兩組極性相反的微管交疊區，稱為紡錘中心區，它決定了接下來的胞質分裂面。胞質分裂開始于分裂后期的較晚期，一般結束于分裂末期后1-2小時，此期間兩個子細胞由中心顆粒體連接。紡錘體通過精確控制胞質分裂面的位置，確保了細胞分裂的對稱性和穩定性。 深圳成熟卵母細胞紡錘體卵冷凍研究