CASA系統也可用于精子形態學評估。CASA系統可用來定量分析精子頭部形態學、中段甚至主段的形態,可以把精子頭部和中段分類為正常或者不正常,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數、標準差和中位數,以及對染色的精子頂體區進行測量[3]。
與人工操作相比,自動化系統更具客觀性,精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5],這優于有經驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經提示在CASA結果與生育力之間存在***聯系。Coetzee等發現自動分析的正常精子形態的結果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發現**中能與透明帶結合的、具有某些頭部形態特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。 Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂,用戶無需具備專業知識也能夠輕松上手使用。香港牛精子分析負相差
二、生化及免疫學檢驗:5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L。【臨床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關。現認為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪、精囊功能正常。當肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,則提示精囊功能障礙,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,果糖含量正常,說明附睪功能障礙,精囊功能正常;而肉堿急劇下降,果糖含量亦減少,表示精囊、附睪功能均發生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性。【臨床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動,干擾精子的運行,阻礙精子穿透及精卵結合,使受精發生障礙。即使已經受精,也可能影響發育中的胚胎,造成免疫性流產。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,當精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時,系精子外逸而產生的自身抗體。前向運動精子分析精確溫度控制HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數,鞭打頻率(BCF)?:精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。
世界衛生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版,以滿足臨床與科研對人類精液標準化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標準操作指南,旨在提高精液分析的質量和提高不同實驗室結果的可比性。在過去40年里,該手冊進行了4次修訂與補充(1987年、1992年、1999年和2010年),內容涉及精液檢查的標準化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質量保證等,已成為國際公認的標準,被世界各地臨床和實驗室***使用。中國衛生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術規范。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數據是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結果,通過循證醫學研究獲得的精液參數參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,即使在**近幾年其下載量也在穩步增長。它是男科實驗室及全球范圍內開展精液分析操作的其他實驗室、醫院和研究機構使用的標準操作手冊。該手冊在國際大會、科學會議、以及WHO合作中心、專業學會和其他學術機構的培訓項目中進行了***傳播。截止到2021年,已被3000余篇同行評議論文和評論引用。
通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數;變異系數(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。男性精液檢測主要依賴計算機輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses,CASA)。
醫生處置質量是指診斷質量?是以當今醫學科學知識、技術為基礎依據癥狀來完成的。CASA系統可以為醫生提供優于傳統精子分析的手段和快速準確的分析結果[5]。CASA在醫生處置質量方面的特點在于:①當CASA系統的參數設定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時?通過個體內和個體間的比較?CASA的精子活力重復性明顯好于直觀評估[6]。②實驗室數據資料是質量的一部分?CASA系統所有數據都是直接在線獲得的?因此明顯優于其他方法[6]?記錄傳遞到數據庫的過程無錯誤發生?可清楚準確地打印出結果。所有的數據可直接轉換到數據庫、能夠對***前和***后測定的數據進行統計學比較[9]、質量控制數據的采集與保存、每天的標本測試記錄以及許多其他報告等等?如此大量數據的處理只有在計算機中才能完成。但是CASA系統的參數設定也許限制了其質量?特別是在精子形態學檢查中?通過CASA系統對精子形態學特征進行分析[7]?這些特征(細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結果一致性較差[8]。就形態學分析而言?傳統方法的可變性遠遠大于CASA分析。精子分析儀能分析與精子運動功能相關的各種參數。全自動化精子分析DCL
精子分析儀參數,精子頭側擺幅度(ALH)?:精子頭關于其平均路徑的側向位移幅度。香港牛精子分析負相差
精子分析儀工作原理
以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術與顯微鏡結合,**標本液化后吸入計數,通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統獲取精子動、靜態圖像后輸入計算機。根據設定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數,對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態分析,由計算機處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測 [1]。
優點:
操作簡便,用量少,檢測速度快,重復性優于人工檢測,并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運動狀態的多種參數等。
缺點:
影響分析結果的因素較多,除**本身性質所含的固有誤差外,不同的精子計數池的相對準確性和精確性可產生明顯不一致的效果。 香港牛精子分析負相差