在細胞培養過程中常用的生長因子,細胞因子和趨化因子,許多科學家傾向使用進口的重組蛋白,如R&D Systems,PeproTech,ProSpec,Gibco等。這就導致可選擇范圍變得很窄。想要增加重組蛋白可選種類,建議選擇國產重組蛋白。如進口品牌賽默飛選擇與國產品牌義翹神州(Sino Biologcical)合作來拓展他們的重組蛋白套裝范圍,為用戶提供1500種左右的重組蛋白(Thermo Fisher Scientific與Sino Biological聯合品牌)。Sino重組蛋白主要有四大優勢:(1)包括粘附蛋白,細胞因子,趨化因子,生長因子,流感蛋白,蛋白酶,磷酸酶,轉錄因子,通道蛋白和受體在內的多種選擇;(2)具有競爭力的價格;(3)為每一種蛋白產品提供更多種的包裝尺寸規格(4)大多數由哺乳動物細胞所表達,90%由人體細胞系表達,這樣有助于就可確保蛋白產品具擁有正確的哺乳動物翻譯后修飾。重組蛋白的生物學活性定義。普欣Wnt3重組蛋白
常見的重組蛋白藥物:生長因子viii,幫助血友病患者形成血塊;非格司汀和sargramostim(造血骨髓因子),促進放療或移植后白細胞計數;胰島素,用于糖尿病;IGF1,用于某些生長問題;干擾素(阿爾法),用于乙型和丙型肝炎、生殖器疣、某些白血病和其他疾病;干擾素(β),用于多發性硬化癥;干擾素(伽瑪),用于慢性肉芽腫病;白細胞介素-2,殺死病變細胞;生長因子,用于生長因子缺乏癥;組織纖溶酶原actin劑(t-PA),溶解血凝塊,預防心臟病發作,減輕其嚴重程度。普欣重組蛋白國產重組蛋白品牌有哪些?
客戶購買的重組蛋白一般為裝在塑料管中的凍干粉,凍干粉在運輸過程中可能會因顛簸而漂散并粘貼于管壁或管蓋上,所以在打開塑料瓶蓋前,需將凍干粉通過離心收集到管底,以便用很小體積的液體即可將凍干粉完全溶解。那么應該用多少轉速、多長時間離心試劑管,才能達到良好的收集效果?答:有些小型高速離心機(多為進口品牌)的面板上有一個Spin鍵,按了此鍵后,離心機會自動快速上升到速度(10000rpm或12000rpm),上升后速度即刻下降,直至停止旋轉,整個過程大約30s。這個Spin鍵足以很好的將細胞因子或蛋白收集到管底。但有些實驗室沒有這樣的高速離心機,只有轉速為4000-4500rpm的離心機。這種情況下,需3000-3500rpm離心5min,也能達到類似的效果。
重組蛋白的活性低是讓科研工作者十分頭疼的難題,買來的重組蛋白活性低怎么辦?除了重組蛋白自身存在質量問題外,它可能只是需要一個“搭檔”。在某些重組蛋白在使用時,需要加入交聯抗體,進行交聯(Cross-linking)反應后才能表現出高活性,發揮出功能。其原理是,交聯反應能夠將重組蛋白的受體相互拉近,因為每個標簽抗體含有兩個抗原結合臂,從而能夠使兩個含標簽蛋白 - 受體復合物拉近,進而指數級放大下游信號,提升刺激的效率(表現為更低的 ED50 值)。眾所周知,在同一實驗中 ED50 越低表明著活性越高。外企的重組蛋白藥物占據了全球將近60%的醫藥市場份額。
不同細胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干(ES)細胞研究中的重組蛋白主要有,細胞培養用人重組actin A,bFGF,IGF-II等,細胞分化用BMP-4,EGF和HGF。間充質干(MSC)細胞研究中的重組蛋白主要有,間充質干(MSC)細胞培養和自我更新的生長因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生長因子或細胞因子:BMP-2與TGF-β1。神經干細胞(NSC)研究中的重組蛋白主要有,重組EGF,重組bFGF,和重組VEGF,用于神經干細胞的擴增。此外,包括BDNF在內的多幾種神經營養因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可適用于相關研究。比較熱門的重組蛋白主要為重組細胞因子。國產MMP-7重組蛋白
重組蛋白的保存和運輸條件。普欣Wnt3重組蛋白
CHO細胞即:中國倉鼠卵巢細胞(Chinese Hamster Ovary),它是基因工程疫苗研究中具有代表性的哺乳動物表達載體,是用來表達外源蛋白多也是成功的一類細胞。市場上超過70%的蛋白質藥物選擇的制造細胞就是CHO細胞。CHO細胞可以在外源表達的蛋白質上摻入復雜的聚糖,如N-連接聚糖。有助于蛋白質的折疊和細胞內運輸。重組蛋白表達側重于大化每個分子中含有唾液酸的復雜聚糖的數量,CHO細胞糖基化之后,能增加對蛋白水解的抵抗力和延長體內血清半衰期,所以CHO細胞成為用作重組蛋白的哺乳動物細胞系。普欣Wnt3重組蛋白
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