一旦在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細(xì)胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘骸;(2)血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果;(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長;(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。為什么要熱滅活的血清?Capricorn去外泌體血清
培養(yǎng)細(xì)胞生長緩慢可能原因：1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清；2.培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必須成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞；3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；4.試劑保存不當(dāng)；5.接種細(xì)胞起始濃度太低；6.細(xì)胞已老化；7.支原體污染。解決方法：1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實驗，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；2.換入新鮮配置培養(yǎng)液，或補加谷氨酰胺及生長因子；3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，丟棄培養(yǎng)物；4.血清需保存在-10到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存，需在1周內(nèi)用完；5.增加接種細(xì)胞起始濃度；6.換用新的保種細(xì)胞；7.分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。依科賽間充質(zhì)干細(xì)胞用血清細(xì)胞診治專門用的胎牛血清。
CapricornScientific成立于2013年，是一家德國的細(xì)胞培養(yǎng)基、血清和試劑制造商。生產(chǎn)的主要重點是生產(chǎn)高質(zhì)量的動物血清，用于生物技術(shù)、診斷和研究應(yīng)用。團隊訓(xùn)練有素，經(jīng)驗豐富，快速、高效的訂單處理和透明的定價，安全準(zhǔn)時交貨，可靠的一致性。及時滿足全世界各地的要求和訂單。通過了ISO9001:2015質(zhì)量管理體系的認(rèn)證，其動物血漿原料來源于歐盟批準(zhǔn)的國家、澳大利亞和美國等。如果不能短期內(nèi)使用完畢，解凍后請適當(dāng)分裝。血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此在分裝血清時須使分裝瓶預(yù)留一定體積空間，否則易導(dǎo)致分裝瓶凍裂而發(fā)生污染。
Sciencell胎牛血清，比較小眾的品牌，性價比較高，常用的就是FetalBovineSerum（貨號：0500）ScienCell研究實驗室（ScienCell）是一家生物技術(shù)公司，其使命是實驗和***用細(xì)胞和細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品的研究和發(fā)展。ScienCell為研究界提供各種高質(zhì)量的正常的人類和動物細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基和試劑，培養(yǎng)基添加因子，細(xì)胞來源的RNA，cDNA和蛋白質(zhì)。ScienCell的科學(xué)家們以改善生活質(zhì)量，實現(xiàn)細(xì)胞的能力，打擊人類退化性疾病為目的研究和開發(fā)各種細(xì)胞***策略。ScienCell總部設(shè)在美國加利福尼亞州圣地亞哥，公司成立于1999年。細(xì)胞培養(yǎng)液中的血清濃度多少合適？
多項研究表明，飼養(yǎng)層依賴性培養(yǎng)要比FBS更可靠。賽默飛旗下Gibco品牌提供的KnockOut血清替代物，貨號：10828028，是一種無血清添加劑，支持在成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)的多能干細(xì)胞(PSC)的生長。適用于對來自多個物種的胚胎干細(xì)胞(ESC)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)進(jìn)行無血清的滋養(yǎng)細(xì)胞依賴性培養(yǎng)。這種成分明確的無血清配方可直接替代現(xiàn)有實驗方案中的FBS。使用KnockOut?血清替代物能夠消除使用FBS進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)時面臨的許多缺點，包括細(xì)胞分化和熱滅活。與添加FBS的培養(yǎng)基相比，在添加KnockOut?SR的培養(yǎng)基中培育時，ES和iPS細(xì)胞出現(xiàn)的分化明顯更少，種系傳遞能力應(yīng)該不會受到影響。在2000多篇涵蓋干細(xì)胞培養(yǎng)、分化、iPSC生成、ESC衍生化以及轉(zhuǎn)基因建模等應(yīng)用的同行評審出版物中，KnockOut?血清替代物被廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞培養(yǎng)。小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?Capricorn去外泌體血清
胎牛血清正確的解凍方法。Capricorn去外泌體血清
UltroserG是一種半定義的血清替代品，由美國公司Pall研發(fā)生產(chǎn)，包含6類真核生物細(xì)胞生長所必須的物質(zhì)，包括生長因子，粘附因子，荷爾蒙，結(jié)合蛋白，維生素，微量礦物元素等。和血清相比，它的生物活性是血清的5倍，一般使用濃度是2%，而血清是10%-20%。干粉狀包裝，真正小而強大，易儲存。組分的一致性，批次的穩(wěn)定性，使實驗結(jié)果的可重復(fù)性提高。恒定不變的生物活性，更低的蛋白含量使科研人員無需再為內(nèi)毒素和血紅蛋白而苦惱。更長的保質(zhì)期，從生產(chǎn)日期起4年，比血清還多1年，使科研人員可以批量采購，降低成本。兼容市場主流細(xì)胞培養(yǎng)基，同時提高細(xì)胞培養(yǎng)品質(zhì)。Capricorn去外泌體血清
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