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多項(xiàng)研究表明,飼養(yǎng)層依賴(lài)性培養(yǎng)要比FBS更可靠。賽默飛旗下Gibco品牌提供的KnockOut血清替代物,貨號(hào):10828028,是一種無(wú)血清添加劑,支持在成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)的多能干細(xì)胞(PSC)的生長(zhǎng)。適用于對(duì)來(lái)自多個(gè)物種的胚胎干細(xì)胞(ESC)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)進(jìn)行無(wú)血清的滋養(yǎng)細(xì)胞依賴(lài)性培養(yǎng)。這種成分明確的無(wú)血清配方可直接替代現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)方案中的FBS。使用KnockOut?血清替代物能夠消除使用FBS進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)面臨的許多缺點(diǎn),包括細(xì)胞分化和熱滅活。與添加FBS的培養(yǎng)基相比,在添加KnockOut?SR的培養(yǎng)基中培育時(shí),ES和iPS細(xì)胞出現(xiàn)的分化明顯更少,種系傳遞能力應(yīng)該不會(huì)受到影響。在2000多篇涵蓋干細(xì)胞培養(yǎng)、分化、iPSC生成、ESC衍生化以及轉(zhuǎn)基因建模等應(yīng)用的同行評(píng)審出版物中,KnockOut?血清替代物被廣泛應(yīng)用于干細(xì)胞培養(yǎng)。胎牛血清的正確運(yùn)輸方法。AusgeneX胎牛血清代理
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。Biowest血清為什么要熱滅活的血清?
Corning胎牛血清,康寧旗下Cellgro,1984年成立,擁有符合美國(guó)FDA(21CFR,820)cGMP標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)廠房。自主研發(fā)產(chǎn)品包括:傳統(tǒng)液體培養(yǎng)基、傳統(tǒng)干粉培養(yǎng)基、無(wú)血清培養(yǎng)基、無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基、培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)添加劑、昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基及相關(guān)試劑、細(xì)胞分離產(chǎn)品、緩沖鹽溶液、血清、微生物及分子生物學(xué)產(chǎn)品、客戶(hù)定制產(chǎn)品等。產(chǎn)品市場(chǎng)占有率情況:產(chǎn)品質(zhì)量處于行業(yè)**地位,質(zhì)量與Gibco,Sigma同類(lèi)產(chǎn)品相當(dāng),國(guó)際上已被廣泛應(yīng)用于各大院校、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)藥及生物技術(shù)企業(yè)。(1)澳洲胎牛血清--FetalBovineSerum,AustraliaSourced(貨號(hào):35-076-CV)。
AusgeneX澳洲新生牛血清,所用的新生牛年齡都不超過(guò)10天。本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制和理、化、微生物指標(biāo)的分析檢測(cè),pH值、滲透壓、血紅蛋白濃度、內(nèi)毒素水平、總蛋白等多項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)合格,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及病毒污染,具有高質(zhì)量和高穩(wěn)定性。本新生牛血清來(lái)源清晰,具有可追溯性。本血清來(lái)源于澳洲或新西蘭。本新生牛血清為制品,不含任何人為的添加成分,可應(yīng)用于各種常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng),為細(xì)胞提供必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和多種生長(zhǎng)因子,有效促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。干細(xì)胞培養(yǎng)最好用哪種胎牛血清?
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別。來(lái)源不同:胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí),應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,絕對(duì)不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。細(xì)胞診治專(zhuān)門(mén)用的胎牛血清。熱滅活去外泌體血清
胎牛血清的正確分裝方法。AusgeneX胎牛血清代理
HyClone優(yōu)級(jí)胎牛血清(FBS)(源自新西蘭)是在Cytiva的新西蘭工廠進(jìn)行精心收集、加工和過(guò)濾的。廣闊的太平洋海域可保護(hù)新西蘭島嶼’免于遭受許多外部影響,包括地理和生物方面。這種海域屏障的好處之一是使新西蘭成為世界上報(bào)告牛病較少的國(guó)家,因此促使源自新西蘭的優(yōu)級(jí)胎牛血清(FBS)成為牛血清的較好來(lái)源,因?yàn)樗哂休^高的安全性。優(yōu)級(jí)胎牛血清(FBS)已經(jīng)過(guò)以下測(cè)定:伽馬球蛋白、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酸草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶、pH、總蛋白、白蛋白、血尿素氮、肌酐、總膽紅素、鈉、鉀、鈣、氯化物、無(wú)機(jī)磷、滲透壓、鐵,總鐵結(jié)合力(TIBC)、鐵飽和百分比、葡萄糖和IgG抗體。包含的測(cè)定如有更改,恕不另行通知。AusgeneX胎牛血清代理
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