蛋白質生物學不僅包含研究內容,也包含了研究所需的工具。即基于蛋白質結構及功能的研究,和利用抗體、蛋白及多肽等作為純化、檢測和分析生物系統的工具。有些蛋白分析方法(如western blotting和ELISA等)已作為實驗室的常規實驗方法使用了多年。其它方法如定量蛋白質譜的實驗方法則是相對較新的實驗技術,并且正在快速發展中。針對重組蛋白純化,賽默飛提供種類豐富的標簽選擇,包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。還提供一系列磁珠和樹脂等純化產品,磁珠、磁性瓊脂糖、散裝樹脂、離心柱或試劑盒,FPLC層析柱,96孔過濾板等,用于從大腸桿菌、酵母、昆蟲或哺乳動物表達系統中純化從微克(μg)到低千克(kg)級重組蛋白。可滿足大多實驗的需求,包括高通量篩選、批量處理、中試和工藝純化等。多肽類激素藥是重組蛋白藥物中的明星產品。PeproTechIL-6重組蛋白怎么樣
市場上重組蛋白通常以凍干形式售賣,這是因為蛋白質對熱敏感,凍干能使蛋白質在存儲過程中保持活性,延長保存時間,同時也能降低運輸成本。但是凍干對蛋白質的活性會有一定的影響,可能造成蛋白質部分失活、聚集和其它變性等。這個時候,就需要通過加入保護劑(穩定劑,添加劑,輔料)和控制凍干的各種條件來盡可能降低這些負面的影響,盡可能的保護蛋白的活性。常見的保護劑或穩定劑包括糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。國產重組蛋白銷售重組蛋白定制中的注意事項。
為了保證重組蛋白良好的穩定性和生物學活性,通常加8%(質量比體積)的海藻糖和甘露醇作為凍干保護劑。海藻糖是一種以兩個葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖,不與氨基酸或蛋白質發生反應。它本身不存在于哺乳動物體內,但哺乳動物體內卻存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作為一種小分子的半抗原,哺乳動物對其免疫反應性很低。這使得海藻糖對live實驗或異種移植等實驗的干擾極小。海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態下改變其結構,更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保護性能與相對低廉的價格漸漸代替 BSA,是免疫實驗產品和蛋白類產品添加劑的新寵。
重組蛋白的活性低是讓科研工作者十分頭疼的難題,買來的重組蛋白活性低怎么辦?除了重組蛋白自身存在質量問題外,它可能只是需要一個“搭檔”。在某些重組蛋白在使用時,需要加入交聯抗體,進行交聯(Cross-linking)反應后才能表現出高活性,發揮出功能。其原理是,交聯反應能夠將重組蛋白的受體相互拉近,因為每個標簽抗體含有兩個抗原結合臂,從而能夠使兩個含標簽蛋白 - 受體復合物拉近,進而指數級放大下游信號,提升刺激的效率(表現為更低的 ED50 值)。眾所周知,在同一實驗中 ED50 越低表明著活性越高。高純度、高活性、低內毒素,高批次間一致性是選購重組蛋白的重點。
在重組蛋白生產中,酵母表達系統與大腸桿菌表達有所不同,大腸桿菌表達只需將質粒/載體轉入到宿主菌體內,其載體攜帶復制原點隨著宿主染色體的復制而復制,可以穩定存在。而酵母表達相對復雜,設計的質粒/載體均不帶有酵母自身復制原點,因此如果直接導入到宿主菌中,不能穩定存在。所以必須將質粒/載體線性化,以同源重組的方式與宿主菌的染色體進行整合,這樣外源基因才能夠穩定存在,而且同源重組一旦形成會很穩定,在通過后期的篩選排除沒有整合成功的質粒/載體和宿主菌,挑選整合成功并能夠高表達的重組轉化子,某種程度上與哺乳動物穩定細胞系構建原理類似。45.蘇州近岸蛋白專注生物醫藥領域中的重組蛋白質。PeproTechIL-3重組蛋白
選擇合適的重組蛋白表達系統,至關重要。PeproTechIL-6重組蛋白怎么樣
在科研實驗中,重組蛋白的生物學活性通常以ED50來表示。在大多數情況下,研究人員一般基于各類指示性細胞——如某些原代細胞或細胞系——來開展生物分析。常用的生物分析法包括細胞增殖分析,細胞趨化性分析,細胞因子生成分析和細胞毒性分析。通常以ED50來表示某一細胞因子的生物活性,該值表示能夠誘發50%大效應的細胞因子濃度。這一表示效價的方法適用于那些劑量效應曲線為S形的細胞因子。ED50被定義為處于max反應50%水平的細胞因子濃度。這一表示現效價的方法適用于那些劑量效應曲線為S形的細胞因子。將ng/mL單位的ED50活性值(注意:如當前為pg/mL,請先換算為ng/mL)轉換為(注意:如需當前單位為pg/mL,請先換算為ng/mL)單位/毫克(unit/mg)特定活性值的公式為(當ED50表示為處于一個范圍區間時,選擇此范圍的中點值):1 x 10E6/ED50* (ng/mL) = 以單位/毫克(Units/mg蛋白)表示為單位的特定蛋白特定活性。PeproTechIL-6重組蛋白怎么樣
上海研助寶生物醫藥有限公司坐落在中國(上海)自由貿易試驗區祖沖之路2288弄2號814室,是一家專業的非臨床診斷用生物試劑、實驗室儀器的銷售,從事計算機科技、網絡科技、化工科技、新材料科技、能源科技、生物醫藥科技、環保科技領域內的技術開發、技術咨詢、技術服務、技術轉讓,廣告的設計、制作、代理、發布,專利代理,從事貨物及技術的進出口業務。公司。一批專業的技術團隊,是實現企業戰略目標的基礎,是企業持續發展的動力。上海研助寶生物醫藥有限公司主營業務涵蓋試劑,儀器,耗材,試劑盒,堅持“質量保證、良好服務、顧客滿意”的質量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。公司深耕試劑,儀器,耗材,試劑盒,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領域拓展。