儷斯康膠原外泌體

目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機、無法進行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難，需要盡快開發操作簡單、可提取高純度外泌體的技術。因此，日本和光著眼于巨噬細胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細胞外域與磁珠結合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結合Tim4蛋白和磁珠，再經過含有EDTA的洗脫緩沖液進行分離，提取高純度的完整外泌體。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。儷斯康膠原外泌體

外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結構,其穩定性較好,可保護內部生物分子免受體液中各種酶的影響,從而保持其完整性和生物活性。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液。目前,常用的儲存方法為冷凍保存,但是冷凍保存可能會導致外泌體形狀與物理性質的改變,也可能導致多層囊泡的形成和聚集,反復凍融會導致外泌體表面分子的生物特性、含量和標志物組成發生變化。血清中包含外泌體在內的細胞外囊泡DNA在不同儲存環境可保持穩定,血漿存放于4°C時其RNA會明顯降解,在–20°C下長期保存也會導致血漿中外泌體總RNA降解,但miRNA卻十分穩定,這也提示了外泌體miRNA作為生物標志物的潛力。sec提取外泌體方法外泌體本身的惰性相當高，但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能。

外泌體運輸的基因類藥物也可以是miRNA，miRNA是一類非編碼的內源性RNA，主要用于調節轉錄后的基因表達。miRNA主要通過與mRNA的未翻譯的區域(UTRs)結合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用。與siRNA不同，miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對，因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質的表達，而每種siRNA只針對一種蛋白質。miRNA的運載也存在著種種挑戰:miRNA體內穩定性差、生物分布不理想、易被體內酶降解以及容易引起副反應等。越來越多的研究表明外泌體也是體內運載miRNA的優良載體，并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經在許多疾病模型中得以應用。

瘤轉移是病癥致死的首要原因。長久以來，對瘤轉移機理的研究一直聚焦于瘤與機體之間的相互作用。然而在近年來，由于外泌體被發現可以作為包括瘤在內細胞之間信息傳遞的一種新方式，瘤轉移研究領域再度變得火熱起來。我所（瘤轉移的預警和預防研究所）以謝曉東博士為首的外泌體研究小組一直致力于研究瘤轉移與外泌體之間的聯系，已取得一系列成果。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。應用Tim4的外泌體強結合能力，可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。

建立記錄各論文實驗條件的數據庫也可作為規避混亂的方法之一。一方面，隨著EV研究倍受世界矚目，各國啟動了大型研究項目。美國啟動NIH戰略性大型項目（ExtracellularRNACommunication），國際厲害性學會——Gordon和KeystoneSymposia也從2016開始成立會議小組。受到歐洲藥物研究開發公司“創新藥物倡議組織（IMI）”的支持推進的CANCER-ID項目，也包含EV研究在內。2017年日本選定了EV研究為文部科學省研究開發戰略的目標之一，期待會加速今后的研究發展。無論如何，今后EV研究的根本就是必須有強有力的研究方法和技術，而PS親和法有望成為其中之一。免疫印跡法（WB）和Elisa檢測法作為被普遍應用的外泌體檢測的一般方法。杭州海洋生物外泌體

外泌體可以直接進入受體細胞影響細胞功能。儷斯康膠原外泌體

外泌體（Exosome）開始被認為是毫無作用的“垃圾”，但隨著研究的不斷深入，人們發現事實并非如此，外泌體（Exosome）是具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞的微囊泡。外泌體（Exosome）介導瘤細胞的免疫耐受。瘤細胞來源的外泌體（Exosome）本身可作為瘤抗原，因此，瘤來源的外泌體（Exosome）既是一種抗原呈遞系統，同時也是瘤排斥抗原的來源。瘤來源的外泌體（Exosome）能夠通過傳遞某些抑制信號，在機體免疫應答過程中起負性調節作用，誘導瘤細胞形成免疫耐受，從而逃避免疫細胞的殺傷。儷斯康膠原外泌體

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