Buller等利用miR-146b的質粒轉染間充質干細胞,使其分泌的外泌體負載miR-146b,并將外泌體注射至移植到小鼠體內的GBM處。結果表明,這種利用外泌體運輸miRNA進行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流,體內zhiliao不同于體外細胞實驗,更需考慮腦部組織微環境對藥物的影響,外泌體可運輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而,至今還沒有利用外泌體載藥經靜脈注射zhiliaoGBM的報道,這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此,Wood等報道的在進行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力,因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。電子顯微鏡下外泌體大小不一,通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。黑龍江外泌體NTA
外泌體的檢測,在其他消化道系統瘤的診療中,存在著巨大的潛在價值.如:食管鱗狀細胞病的研究中發現,miRNA-21在外泌體中的高表達,表達水平可100%反應瘤水平,外泌體miRNA-21的高表達往往預示著寬泛浸潤與復發[36].十二指腸病的研究中,發現轉移性十二指腸病細胞分泌的外泌體富含PABP1蛋白,細胞不能耐受PABP在胞內的大量囤積,通過外泌體PABP1蛋白排出胞外是轉移性十二指腸病細胞所具有的特性,外泌體PABP1是轉移性十二指腸病的分子標志物,此發現不只在轉移性十二指腸病的診斷上提供了價值,也為轉移性十二指腸病的治理提供了新的思路。浙江外泌體circRNA測序外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達基底層起效。
瘤在生長過程中會不斷地將外泌體釋放到周圍環境中去,同時,外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長時間,可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術的進步,已經有生物公司嘗試涉足外泌體領域,外泌體中存在黑色素瘤標志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關蛋白,且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者,通過檢測MIA和S100B表達水平對黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質上說,液態活檢是分子診斷在樣本來源上的延伸,進一步豐富了檢測手段,而隨著外泌體的不斷揭秘,相信其會在液態活檢中發揮越來越重要的作用。
唾液中包含來自于唾液腺上皮體外細胞的外泌體,Michael等從唾液中提取外泌體,并對唾液外泌體中的miRNA進行分析,發現此類miRNA有望作為成為唾液腺疾病的生物標志物。Wu等成功從汗液中提取得到外泌體,并進行蛋白質組學分析,在汗液外泌體中鑒定到1062種蛋白質,其中包含多種抗jun肽和免疫因子,表明汗液外泌體參與皮膚免疫。Liu等從患有阿爾茲海默癥患小鼠的腦脊髓液中提取得到外泌體,并與野生型小鼠進行對比,發現實驗組miR-193b明顯下調。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。
獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應用于外泌體顆粒數目和粒徑分布的測量,但兩種方法也各有不足。動態光散射法中散射光強度依賴于顆粒質量(體積),混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴重影響測量結果,因此動態光散射法更適用于單分散體系。而且動態光散射法所得的結果強烈依賴于所應用的數學算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進行檢測時,為了得到準確的濃度和粒徑信息,需要根據所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準,操作繁瑣。受檢測靈敏度所限,納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm~1μm的顆粒,粒徑小于50nm的外泌體無法檢測。除此之外,兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運動進行分析,難以區分合成的納米材料、大蛋白質聚合體和生物囊泡。外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合,從而活躍細胞內的信號通路。山東外泌體NTA
外泌體分離之后,需要經過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。黑龍江外泌體NTA
結果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質和RNA。應用Tim4的外泌體強結合能力,可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡,也通過運用PS親和法實現高純度提取。本指導書中對該技術進行詳細說明,這項技術的有用性今后將受到世界各方評價,有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即:對各種外泌體的分類。研究人員尚未統一定義以何種方法提取的細胞外囊泡可以稱之為外泌體,給實驗數據的分析和重復性確認帶來困難。近年,隨著國際細胞外囊泡協會的成立、世界性研究者研討會的舉辦,提案MISEV指南作為國際標準,計劃或已經開始進行EV研究的科學家請務必閱讀這些方針。黑龍江外泌體NTA
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