體液外泌體lncRNA芯片

來源: 發布時間:2023-05-14

外泌體運輸的基因類藥物也可以是miRNA,miRNA是一類非編碼的內源性RNA,主要用于調節轉錄后的基因表達。miRNA主要通過與mRNA的未翻譯的區域(UTRs)結合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用。與siRNA不同,miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對,因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質的表達,而每種siRNA只針對一種蛋白質。miRNA的運載也存在著種種挑戰:miRNA體內穩定性差、生物分布不理想、易被體內酶降解以及容易引起副反應等。越來越多的研究表明外泌體也是體內運載miRNA的優良載體,并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經在許多疾病模型中得以應用。科學家也嘗試利用外泌體的壓制發病機制功能。體液外泌體lncRNA芯片

體液外泌體lncRNA芯片,外泌體提取試劑盒

外泌體與免疫反應、病毒致病性、妊娠、心血管疾病、中樞的神經系統相關疾病和病癥進展相關。由外泌體傳遞到受體細胞的蛋白質、代謝物和核酸有效地改變了它們的生物反應。這種外泌體介導的反應可以促進或阻止疾病。外泌體在調節復雜的細胞內通路方面的固有特性使其在許多疾病的診療控制方面具有潛在的用途,主要包括神經退行性疾病和病癥。外泌體可被設計用于遞送不同的診療有效載荷,包括短干擾、反義寡核苷酸、化療藥物和免疫調節劑,并具有將其遞送到預期目標的能力。血液中提取外泌體人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。

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科學家也嘗試利用外泌體的壓制發病機制功能。例如,類風濕關節炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關節炎惡化。通過上述介紹可以知道癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子,神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子,因此,通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發生。隨著今后的研究發展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用,有望將外泌體應用在各種疾病醫治上。甚至可嘗試利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸到目標細胞中。

密度梯度離心法根據在蔗糖、碘海醇或碘克沙醇等惰性溶液中的浮力密度將外泌體分成特定的層,目前普遍應用的是蔗糖,這種方法可以成功地將亞細胞成分(例如過氧化物酶體,線粒體和核內體)分離到密度梯度溶液中的不同層中。樣品被放置在梯度的頂部,當施加離心力時,樣品中的顆粒以獨特的速率通過梯度,該梯度以從上到下的密度增加。樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,隨后可以通過分餾收集,密度梯度超速離心對從蛋白質聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效。此方法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣、費時且會造成外泌體損失。確認外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制,通過促進或壓制釋放機制。

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外泌體生物學功能:1、在心血管系統中,據報道,源自人胚胎干細胞(ESC)的間充質干細胞(MSC)外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷;2、在免疫系統中,據報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制;3、在中樞的神經系統(CNS)中,外泌體的作用是消除廢物并介導大腦活動,從而阻止神經退行性疾病的發病機理;迄今為止,尚未完全發現調節外泌體-細胞結合的途徑。然而,比較明顯,其結合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎,它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍,外泌體與PM融合或外泌體的內吞作用,從而導致蛋白質和RNA直接釋放到受體細胞中。從研究上來講并不太嚴格區分外泌體或微泡。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,有研究發現血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。杭州外泌體lncRNA測序

從外泌體中篩選的生物標志物,可用于疾病的診斷、預后及治理。體液外泌體lncRNA芯片

與PC-3細胞相比,PC-3細胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等,而外泌體囊泡內蛋白質則與來源細胞內的蛋白質密切相關,包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外,外泌體中還攜帶有來源細胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質。外泌體的完整囊泡結構能夠保護其內部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。體液外泌體lncRNA芯片

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